GB T 21916-2008 水果罐头中合成着色剂的测定.高效液相色谱法.pdf

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资源描述

1、ICS 67080X 74 a囵中华人民共和国国家标准GBT 219162008水果罐头中合成着色剂的测定高效液相色谱法2008-05-16发布Determination of synthetic colour in fruit tinsHigh performance liquid chromatography2008-1卜01实施丰瞀髅鬻瓣訾雠瞥鐾发布中国国家标准化管理委员会厘111刖 吾GBT 219162008本标准的附录A为资料性附录。本标准由全国食品安全应急标准化工作组提出并归口。本标准起草单位:沈阳产品质量监督检验院(国家加工食品及添加剂质量监督检验中心)。本标准主要起草人:于立

2、强、王冬妍、苏锡辉、赵丽秀、吕成学、张凤清、赵检、张丽君、黄士军、明立艳、杨晓丽。水果罐头中合成着色剂的测定高效液相色谱法GBT 2191620081范围本标准规定了水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的高效液相色谱测定方法。本标准适用于水果罐头中柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红人工合成着色剂的测定。本标准检出限为柠檬黄0300 ragkg、苋菜红0300 mgkg、靛蓝0300 mgkg、胭脂红o300 ragkg、日落黄0150 mgkg、诱惑红0150 mg妇、亮蓝0100 ragkg、赤藓红0150 mgkg。2原

3、理水果罐头中的人工合成着色剂用乙醇一氨水提取,利用固相萃取柱净化,采用高效液相色谱一二极管阵列检测器测定,外标法定量。3试剂和材料31水:去离子水或相当纯度的水。32甲醇:色谱纯。3,3无水乙醇:分析纯。34氨水:分析纯。35盐酸:分析纯。36乙酸铵溶液(o02 toolL):称取154 g乙酸铵,加水溶解,定容至1 000 mL,经045”m过滤器过滤。37无水乙醇一氨水溶液:量取无水乙醇80 mL,氨水1 mL,加水定容至100 mL,混匀。38 pH8的50甲醇溶液:量取甲醇50mL,加水定容至100mL,混匀,加氨水调pH值到8。39 pH8的水:水加氨水调pH值到8。310 2氨水:

4、量取氨水z mL,加水定容至t00 mL,混匀。3,11盐酸一乙醇溶液(1+9):量取10 mL盐酸、90 mL乙醇,混匀。312 50甲醇溶液:量取甲醇50 mL,加水定容至100 mL,混匀。313固相萃取柱或相当者:Sep-Pak Plus QMA 360 mg,颗粒度37Lm55xm,临用前依次加5 mL甲醇(32)和5 mL水预处理,保持柱体湿润。314合成着色剂标准储备液:准确称取按其纯度折算为100质量的柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红各0050 0 g,置100mL容量瓶中,加水至刻度,配制成500zgmL标准储备液。315合成着色剂标准使用液:临用时

5、将标准储备液加水稀释成20 pgmL的标准中间液,再将该中间液稀释成0100,0200,0400,1_00,300,500 t-gmL的标准系列溶液,经045 btm过滤器过滤。4仪器41 高效液相色谱仪,配有二极管阵列检测器。1GBT 21916200842分析天平:感量01 rag。43匀浆机。44快速混匀器。45离心机:3 000 rrain。46恒温水浴。47 045 pm水性样品过滤器。48固相萃取装置。5样品制备51提取将整份试样用匀浆机打碎,再搅拌均匀,准确称取200 g左右样品(精确至001 g),装入离心管中。加10 mL无水乙醇一氨水溶液,涡旋05 rain,再3 000

6、rrain离心10 rain,将上清液倒人塞有脱脂棉的玻璃漏斗中过滤,将剩余残渣再重复操作三次,将收集的滤液(约40 mL)置于80水浴中浓缩至约2 mL,为试样溶液。52净化将浓缩后的试样溶液用2的氨水调成pH8后,转移到预处理过的固相萃取柱中,依次用3 mLpH8的水和3mL pH8的50甲醇以小于2mLmin的流速清洗,弃去全部流出液。再用10mL盐酸一乙醇溶液(1+9)将着色剂洗脱出固相萃取柱,收集洗脱液,用氨水中和,80水浴浓缩至尽干,冷却后用50的甲醇溶液溶解并定容至10 mL,经045 bLm滤膜过滤后,进行高效液相色谱测定。6测定61液相色谱条件611色谱柱:Diamonsil

7、 C”5 pm,46 mrnX250 mm。612流动相:甲醇一乙酸铵溶液(O02 toolL)。613梯度洗脱:梯度洗脱条件见表1。表1 液相色谱梯度洗脱条件时间rain 流速(mLmin) 甲醇 乙酸铵溶液0 10 20 805 10 35 6510 10 80 2016 10 80 2017 10 20 8025 10 20 80614进样量:10 pL。615检测器:二极管阵列检测器选择柠檬黄428 nm、苋菜红521 nm、靛蓝608 nm、胭脂红509 nm、日落黄483 nm、诱惑红507 nm、亮蓝625 nin、赤藓红529 nm波长测定。62测定根据保留时间定性,外标峰面积

8、法定量。八种合成着色剂标准品的液相色谱图参见附录A。27结果计算结果按式(1)计算:。 cV1 000“一再可百式中:x试样中被测组分的含量,单位为毫克每千克(mgkg)GBT 219162008c由标准曲线得到的试样溶液中被测组分的含量,单位为微克每毫升(ttgmL)v试样溶液定容体积,单位为毫升(mL);m试样质量,单位为克(g)。计算结果保留三位有效数字。8精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。GBT 21916200890 ooo85 ooo80 oooj 50 ooo45 ooo40 ooo30 ooo20 ooo附录A(资料性附录)八种合成着色剂标准品的液相色谱图1柠檬黄;2苋菜红;3靛蓝;4胭脂红;5日落黄;6诱惑红;7亮蓝;8赤藓红。8 10 12 14 16 18 20 22 24图A1 八种合成着色剂标准品的液相色谱图

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