1、E.J 中华人民共和国核行业标准EJ/T 952-95 甲胎蛋白放射免疫分析试剂盒1995-07-05发布1995-11-01实施中国核工业总公司发布ii - . , . 闹闹闹闹咱闹闹OHHHHHH”RU E-EBEEtEBEBEE-i E咀咱咱呻啤nu刷刷川剧mm配配配配AUHHHHO -4 HHHHHHHZ 川HHHHHH5HHHUHUUUUnV -1-BEEttEEB-nhu l) iIl-11BtfL E-EE- | EE- . 中华人民共和国核行业标准EJ/T 952-95 甲胎蛋白放射免疫分析试剂盒1 主题内容与适用范围本标准规定了甲胎蛋白（以下简称AFP）放射免疫分析试剂盒的技
2、术条件及检验方法等。本标准适用于固相微球二抗法的AFP放射免疫分析试剂盒。也适用于其它免疫沉淀剂为分离剂的AFP放射免疫分析测定盒2 引用标准GB 11806 放射性物质安全运输规定EJ/T 804 放射性同位素产品代号3产品代号及试剂盒的组成3.1 产品代号根据EJ/T804规定编写产品代号AFP放射免疫分析试剂盒的代号为：RIAI 125 7 01 X 3.2 试剂盒的组成及主要试剂特性3. 2.1 试剂盒组成试剂盒的主要组成如下za. 1251-AFP, b. AFP标准晶Fc. 抗AFP抗体Fd. 温育液，也固相第二抗体。3.2.2 主要试剂特性主要试剂特性如下a. 标记抗原比活度s不
3、小于1.85MBq 闯一1J 放射化学纯度不小于90%。b. AFP标准晶应用国家标准品标定，标准品的标定值与国家标准晶的标示值偏差不超过士10%。c. 抗AFP抗体中国核工业总公司1995-07睛”批准1995-11-01实施EJ/T”一”亲合常数；K注1101。L mol-1 J 交叉反应z与IgG交叉反应小于210-sI与自蛋白交叉反应小于2io-s.4技术指标4.1 灵敏度最小撞出值不大于311g L-1. 4. 2非特异结合率（NSB)不大于5%.4. 3最大结合率倍。应大于40%.4. 4精密度用变异系数（T）表示批内r不大于B%n注10),批间CV不大于12%(n注10）。4.5
4、准确度在一次测定中，低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值，均应在允许酒围芳土2SD)内。4.6 回收率（R)应在90%110%之间4. 7 相关系数（r）和有效剂量值（ED)剂量响应曲线的相关系数r的绝对值不小于0.99. 有效剂量ED25、EDSO、ED75（即结合率分别为25%、50%、75%时的对应剂量值均应在剂量响应曲线范围内，其变化均应在主土2SD）范围内。4.8 测定植围推荐在3400问.L -1之间。4. 9 有效期在28条件下贮存，从生产日期计算，有效期为56d。5检验方法按附录A（补充件实验程序操作，也可以用其它等效方法。5.1 灵敏度的测定求出零管结合率侣。的标准差SD(
5、n注10），以零管结合率的均值减去2SD所得结合率的相应剂量值，即为试剂盒的灵敏度，5.2 NSB的测定取两支放免试管，分别加入与测定样品相同体棋的AFP零标准血清或温育液和125 I-AFP及与抗AFP抗体相同体帜的温育液操作。NSB按公式(1）计算e2 EJ/T 95:2-95 NSB =(CD一Cb)/(C，一Cb）100% (1) 式中：C.一一非特异管计数率，计数miniCb仪器本底计数率，计数min1c.一总放射性管计数率，计数min. 5.3 Bo的测定B。按公式（2）计算B0 = (C。一C.)/(C,- Cb) 100% .”(2) 式中：C。一一零标准管计数率，计数mino
6、5.4 精密度的测定精密度用样品测定值的变异系数表示。r按公式（3）计算。CV= (SD立lOOo/o.(3) 式中：SD一n次测定AFP值的标准差，立一n(n注10）次测定AFP的均值。5. 5 准确度的测定用低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值计算SD。5.6 R的测定在已知AFP含量的血样中加入一定量的AFP，然后测定血样中总AFP含量。R按公式（4）计算。R = (D，一Dk)/D.100%. (4) 式中：D，一一血样中测得的总AFP值，.g L-1, Dk一一血样中已知的AFP值，陈.L -1, D.血样中加入的AFP值，问L -i o 5,7剂量响应曲线的绘制及r,ED值的计算
7、各标准剂量点的放射性结合率B（习惯用Bl且表示按公式（5）计算zB = (C. -C.)/(C.。一C.）100%.“. (5) 式中：C.一一各标准剂量点的放射性计数率，计数min.以各标准剂量点的B为纵坐标，以各相应的标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线，并求出，、ED值3 EJ/T”2一”6幢验规则产品的质量检验分为型式撞验和出厂撞撞两项6. l 型式检验产品投产前及挽产后工艺流程改变、原料变更，均须按第4章技术要求中规定的内容撞验6. 2.出厂检验6. 2.1 金栓项目试剂盒组份、包装及标志等。6. 2. 2抽栓项目NSB、B。剂量响应曲线及质量控制血清测定值6. 2.3 抽检方
8、式抽栓采取随机取样方式。100盒以下抽取1盒，101300盒抽取2盒，301500盒抽取3盒，501盒以上抽取4盒。6.2.4抽检结果判断如果检验结果有一项指标不符合本标准规定的技术要求时，应重新以两倍的数量随机取样进行复检。经复检仍有一项指标不符合本标准规定的技术要求时，则本批试剂盒判为不合格6. 2. 5 检验证书产品应有检验合格证书，见附录B（参考件。7 标志、包襄、运输和贮存7.1 标志包括试剂盒封面标志，放射性试剂瓶标志，试剂标志。7.1. 1 试剂盒封面标志试剂盒封面标志内容包括za. 生产厂家Fb. 产品名称Fc. 注册商标Fd. 产品代号Fe. 产品批号，f. 批准文号，I 注
9、意事项Fh. 有效期7.1. 2放射性试剂瓶标志4 放射性试剂瓶标志内容包括s. 名称，b. 批号，c. 放射性活度，d. 测量日期ge. 放射性标志1.1. 3试剂瓶标志试剂瓶标志内容包括2. 名称，b. 批号，也浓度Fd. 贮存条件Fe. 有效期7.2包装和运输7. 2.1 包装EJ/T ” 2-95 包装必须保证运输及防护安全，应符合GB11806豁免运输包装规定。包装盒内必须附有产品使用说明书说明书内容包括a. 生产厂家Fb. 产品名称pc. 产品代号Fd. 批准文号Fe. 产品批号；r. 适用范围Fg. 方法原理Fb. 试剂盒的组成及其试剂配制Fi. 操作程序pj. 结果计算Fk.
10、质量指标；I. 注意事项pm. 有效期pn. 参考文献。7.2.2运输运输应符合GB11806的规定7.3贮存试剂盒应贮存于285 Al 方法提要EJ/T 952-95 附录A甲胎蛋白放射免疫分析方法补充件甲胎蛋白是一种恃殊球蛋白，由单一的多肤链组成其分子量约68000.本方法采用竞争放射免疫分析法，即待测血清或组织中的AFP和1251-AFP与有限量的AFP抗体在适宜条件下进行竞争性结合反应。一部分山I-AFP与抗体结合，而另一部分则呈游离状态.125!-AFP与抗体结合的比例决定于待测样品或标准中未标记AFP的量。抗原抗体复合物用固相微球二抗作分离剂沉淀下来，测定其放射性计数率。用不同浓度
11、的标准，获得剂量响应曲线。从剂量响应曲线上查出被测样品中AFP的含量。A2 仪器及设备r计数器、微量加样器、放免试管、负压泵、离心机、恒温水浴锅和一般生物化学实验室仪器设备。A3实验程序实验程序包括za. 按说明书要求配制有关试剂Fb. 试管编号。1,2为总放射性管（T）仆，4为NSB管，5,6为零标准管；718为标准管；标准管后依次为质量控制血清及样品管，c. 操作顺序，按表Al实验顺序进行操作，逐步加入相应的试剂。潜液量以L表示。A4结果计算各管沉淀物的放射性计数率减去NSB的放射性计数率，标准管按公式（5）计算，样品管的结合率B(B/B。计算见下式。B(B/B。（Cp一C.)/(C。C.
12、）100%.(Al) 式中：Cp一待测样品管沉淀物的放射性计数率，计数min.以各标准管的B(B/B。%为纵坐标，AFP标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线根据待测样品的B，在剂量响应曲线上查得样品AFP含量（见图Al）。6 EJ/T 952-95 表AlAFP测定操作顺序表L 标准曲线组操作顺序T管待测组1.2 非特异管零标准管标准管3,4 5,6 7 18 温育液200 100 AFP标准100 待测血样100 1251-AFP 100 100 100 100 100 抗AFP抗体100 100 100 充分摇匀，放37水浴23h回相微球二抗200 200 200 200 充分摇匀，
13、放37水溶o.5 Lh 各管摇匀，然后离心（3500r/min)20min，吸出上清液总放射性管除外。测量总放射性管和i各管沉淀物的放射性汁数率。BB/B伪100 书* 80 9峰j i 、，( 40 斗牛20 争牛斗奄。10 zo 50 100 200 4(J0 AFP浓度g L 图AlAFP剂量响应曲线7 产品名称标记物放化纯度% 标准晶批号抗血清批号NSB B. r 检验指标结论复核附加说明zEJ/T 952-95 附录B披射免疫分析试剂盒撞验合格证书参考件放射免疫分析试剂盒检验合格证书批号生产人员比活度每瓶放射性活度MBq.问：kBq ED25 ED50 ED75 质量控制血清批号剂量低值中值范围实测检验人员年月日检滥单位印意本标准由全国核能标准化技术委员会放射性同位素分技术委员会提出。本标准由中国原子能科学研究院同位素所负责起草。本标准主要起草人z蒋有文8 高值maNm也H国
