1、ICS 65100B 17N Y中华人民共和国农业行业标准NYT 1 156142008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第1 4部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法Guideline for laboratory bioassay of pesticidesPart 14：Potted plant test for fungicide control anthracnose【Colletotrichumorbiculare(Berk&Mont)Arx】on cucurbits20080516发布 20080701实施中华人民共和国农业部发布前 言农药室内生物测定试验准则杀菌剂为系列标准：第1部分：抑
2、制病原真菌孢子萌发试验凹玻片法第2部分：抑制病原真菌菌丝生长试验平皿法；第3部分：抑制黄瓜霜霉菌病菌试验平皿叶片法第4部分：防治小麦白粉病试验盆栽法；第5部分：抑制水稻纹桔病菌试验蚕豆叶片法；第6部分：混配的联合作用测定；第7部分：防治黄瓜霜霉病试验盆栽法；第8部分：防治水稻稻瘟病试验盆栽法；第9部分：抑制灰霉病菌试验叶片法；第10部分：防治灰霉病试验盆栽法；第11部分：防治瓜类白粉病试验盆栽法；第12部分：防治晚疫病试验盆栽法；第13部分：抑制晚疫病菌试验叶片法；第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法；第15部分：防治麦类叶锈病试验盆栽法；第16部分：抑制细菌生长量试验浑浊度法；本部分是农药室
3、内生物测定试验准则杀菌剂的第14部分。本部分由中华人民共和国农业部提出并归口。本部分起草单位：农业部农药检定所。本部分主要起草人：袁善奎、朱春雨、徐文平、吴新平、张薇、杨峻。NVT 1、5614 20081范围nOLT 1156 142008农药室内生物测定试验准则 杀菌剂第14部分：防治瓜类炭疽病试验盆栽法本部分规定了盆栽法测定杀菌剂防治炭疽病的试验方法。本部分适用于农药登记用杀菌剂对瓜类作物炭疽病菌的室内生物活性测定试验。2仪器设备普通实验室常规仪器设备。2 1电子天平(感量01rag)。22喷雾器械。2 3人工气候箱。24移液管或移液器等，3试剂与材料方法所用试剂，凡未指明规格者，均为分
4、析纯；水为蒸馏水。31生物试材供试病菌为野生敏感型瓜类炭疽病菌Colletotrichum orbiculare(Berk&Mont)Arx菌株。记录菌种来源。供试作物为感灰霉病品种，盆栽、培养至2片4片真叶期，编号备用。32试验药剂原药(或母药)。33对照药剂采用已登记注册且生产上常用的原药(或母药)，其化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。4试验步骤4 1孢子悬浮液制备将试验用病原菌在适宜的培养基上培养，待产生孢子后，用无菌水洗下孢子，并用2层4层纱布过滤，制成浓度为1105个孢子mL的悬浮液，备用。4 2药剂配制水溶性药剂直接用蒸馏水溶解稀释。其他药剂选用合适的溶剂(甲醇、丙酮、
5、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜等)溶解，用o1的吐温一80或其他合适的表面活性剂水溶液稀释。根据药剂活性，设置5个7个系列质量浓度，有机溶剂最终含量一般不超过051。制剂可以直接用水稀释。43药剂处理将药液均匀喷施于叶面至全部润湿，待药液自然风干后备用。每处理3盆，4次重复，并设只含溶剂和表面活性剂而不含有效成分及水的对照处理。44接种与培养NVT 115614 2008用微量取样器吸取10“1孢子悬浮液接种于叶片正面，每处理不少于30个接种点。保护性试验在药剂处理后24 h接种；治疗性试验在药剂处理前24 h接种。抗病激活性试验于药剂处理3 d7 d后再接种。接种后移至保湿箱中(相对湿度95100
6、)黑暗培养24 h，然后在2227。C、光照强度20 000 Lux、湿度8090的条件下培养。45调查空白对照发病率达到50以上时，用游标卡尺以十字交叉垂直法测量病斑直径各一次，取平均值，单位为毫米(mm)。5数据统计及分析5 1计算方法根据调查数据，按公式(1)计算防治效果，以百分率()表示，计算结果保留小数点后两位。P一旦铲100式中：P防治效果，单位为百分数()；Do空白对照病斑直径，单位为毫米(mm)；D，药剂处理病斑直径，单位为毫米(ram)。52统计分析用DPS(数据处理系统)、SAS(统计分析系统)或SPSS(社会科学统计程序)等标准统计软件对药剂浓度对数值与防效几率值进行回归分析，计算各药剂的EC50、Ec90等值及其95置信限，并进行各药剂处理间的差异显著性分析。6结果与报告编写根据统计结果进行分析评价，写出正式试验报告。
