1、ICS 65.100 B 17 NY 中华人民共和国农业行业标准NY/T 1156.3一2006农药室内生物测定试验准则杀菌剂第3部分:抑制黄瓜霜霉病菌试验平皿叶片法Pesticides guidelines for laboratory bioactivity tests Part 3: Petri plate test for determining fungicide inhibition of Pseudoperonospora cubensis growth on detached leaves 061030000127 2006-07 -10发布2006 -10-01实施中华人民共
2、和国农业部发布前农药室内生物测定试验准则杀菌剂为系列标准。本部分是农药室内生物测定试验准则杀菌剂的第3部分。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位:农业部农药检定所。本标准主要起草人:徐文平、朱春雨、张弘、吴新平、邱涧平、张薇。本标准由农业部农药检定所负责解释。NY /T 1156.3-2006 I NY /T 1156.3-2006 农药室内生物测定试验准则杀菌剂第3部分:抑制黄瓜霜霉病菌试验平皿叶片法1 范围本部分规定了平皿叶片法测定杀菌剂对黄瓜霜霉病菌生物活性的基本要求和方法。本部分适用于杀菌剂对黄瓜霜霉病菌生物活性测定的农药登记室内试验,其他试验参照本部分执行。2 试验
3、条件2.1 试验靶标黄瓜霜霉病菌(Pseudo如ronos如racubens公)。记录菌种来源。2.2 仪器设备2.2.1 电子天平(感量0.1mg); 2.2.2 喷雾器械;2.2.3 人工气候箱或光照保湿箱;2.2.4 生物培养箱;2.2.5 培养皿;2.2.6 移液管或移液器等。3 试验设计3.1 试材准备选用黄瓜感病品种盆栽,自上向下4叶位-6叶位,剪取相同部位、长势一致、带有1cm-2 cm叶柄的叶片,用湿棉球包裹叶柄放置在培养皿中,保湿备用。3.2 药剂3.2.1 试验药剂试验药剂采用原药(母药),并注明通用名、商品名或代号、含量和生产厂家。3.2.2 对照药剂对照药剂采用已登记注
4、册且生产上常用的原药。对照药剂的化学结构类型或作用方式应与试验药剂相同或相近。3.3 试验步骤3.3.1 抱子囊悬浮液配制选择发病叶片,用4t蒸锢水洗下叶片背面霜霉病菌抱子囊,配成悬浮液(浓度控制在每毫升1X105个-1X 107个子包子囊),4t下存放备用。3.3.2 药剂配制水榕性药剂直接用水溶解稀释。其他药剂选用合适的洛剂(如甲醇、丙酣、二甲基甲眈胶或二甲基亚枫等)溶解,用0.05%的吐温80水溶液稀释。根据药剂活性,设置5个-7个系列质量浓度,有机溶剂最终含量不超过1%。1 NY /T 1156.3-2006 3.3.3 药剂处理将药液均匀喷施于叶片背面,待药液自然风干后,将各处理叶片
5、叶背向上,按处理标记后排放在保湿盒中。试验设不含药剂的处理作空白对照。3.3.4 接种与培养用准备好的新鲜抱子囊悬浮液点滴10L接种于叶片背面。每叶片接种4滴,每处理不少于5片叶。保护性试验在药剂处理后24h接种,治疗性试验在药剂处理前24h接种。接种后盖上皿盖,置于人工气候箱或有光照的保湿箱,在每天连续光照/黑暗12h交替,温度为17C-22C ,相对湿度90%以上的条件下培养。4 调查视空白对照发病情况测量记录病斑直径,单位为毫米(mm)。5 数据统计及分析5.1 计算方法根据调查数据,按公式(1)计算防治效果,以百分数(%)表示,计算结果保留小数点后两位。式中:P一一防治效果;Do-一空
6、白对照病斑直径;Di一一-药剂处理病斑直径。Dn-D唱P=飞100(1)5.2 统计分析根据各药剂浓度对数值及对应的防效几率值作回归分析,计算各药剂的ECso,Eo等值及其95%置信限。进行药剂联合毒力测定时,根据Wadley法或孙云沛法计算混剂的增效系数(SR)或共毒系数(crC) ,评价混剂的联合作用类型。Wadley法:根据增效系数(SR)来评价药剂混用的增效作用,即SR1.5为增效作用。增效系数(SR)按公式(2)、(3)计算:2 PA + PR Xl=n/fl nD/口x100 . (2) 式中:X1一一混剂的ECso理论值,单位为毫克每升(mglL); PA一一混剂中A的百分含量,
7、单位为百分率(%);PB一-7昆剂中B的百分含量,单位为百分率(%);A一-7昆剂中A的ECso值,单位为毫克每升(mglL); B一一混剂中B的ECso值,单位为毫克每升(mglL)。SR=主式中:SR一-1昆剂的增效系数;X1一一混剂ECso理论值,单位为毫克每升(mglL); L一一混剂ECso实测值,单位为毫克每升(mglL)。NY /T 1156.3-2006 孙云沛法:根据共毒系数(crC)来评价药剂混用的增效作用,即crC:S;80为拮抗作用,80crC120为相加作用,crc注120为增效作用。共毒系数(crC)按公式(4)、(5)、(6)计算:A刀=是x100 . (4) 式
8、中:ATI一-昆剂实测的毒力指数;S一一标准药剂的ECso,单位为毫克每升(mg只L); M-一-t昆剂的ECso,单位为毫克每升(mglL)。ITI= TIA X PA + TIB X PB . (5) 式中:ITI一混剂理论毒力指数;TIA一-A药剂毒力指数;PA 一-A药剂在1昆剂中的百分含量,单位为百分率(%); TIB一-B药剂毒力指数;PB 一-B药剂在混剂中的百分含量,单位为百分率(%)。ATI C=于X 100 . (6) 式中:CTC一-共毒系数;ATI一一混剂实测毒力指数;ITI一-混剂理论毒力指数。6 结果根据统计结果进行分析评价,写出正式试验报告,并列出原始数据。3 COON-的-cm=Hhz 中华人民共和国农业行业标准农药室内生物测定试验准则杀菌荆第3部分:抑制黄瓜霜霉病菌试验平皿叶片法NY/T 1156.3一2006中国农业出版社出版(北京市朝阳区麦子店街18号楼)(邮政编码:100026 网址:) 中国农业出版社印刷厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销9号争等* * 争爸* 印张0.5字数5千字2006年9月北京第1次印刷印数:1-500册定价:8.00元开本880mmx 1230mm 1/16 2006年9月第1版书号:16109 950 版权专有侵权必究举报电话:(010) 65005894