1、ICS 65.020.30 B 44 备案号 :40369-2014 DB11 北京市地方 标准 DB11/T 1053.4 2013 实验用鱼 第 4部分：病理学诊断规范 Laboratory fish Part 4： Specification of pathological diagnosis 2013 - 12 - 20发布 2014 - 04 - 01实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 1053.42013 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 采样要求 . 1 5 检查频率 . 2 6 检查程序 . 2 7
2、检查方法及项目 . 2 8 检查结果及结论 . 4 DB11/T 1053.42013 II 前 言 DB11/T 1053的本部分按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 DB11/T 1053实验用鱼分为六个部分： 第 1部分：微生物学等级及监测； 第 2部分：寄生虫学等级及监测； 第 3部分：遗传质量控制； 第 4部分：病理学诊断规范； 第 5部分：配合饲料技术要求； 第 6部分：环境条件。 本部分为 DB11/T 1053的第 4部分。 本部分由北京市科学技术委员会提出。 本部分由北京市科学技术委员会归口。 本部分由北京市科学技术委员会 组织 实施 。 本部分 主要起草 单位
3、： 国家人口 计生委科学技术 研究所，中国 科学 院水 生生物 研究所、中国食品药 品检定 研究院、 北京 大学 、中国农业大 学等。 本部分 主要起草 人： 孙德明、崔宗斌、岳秉飞、赵德明、张博、王天奇、孙荣泽。 DB11/T 1053.42013 1 实验用鱼 第 4部分：病理学诊断规范 1 范围 DB11/T 1053的本部分规定了 实验用鱼（斑马 鱼和剑尾 鱼 ）的病理诊断技术规范 ，包括 病理 标本的 采样、 检测频率 、检测 内容、检测程序 、检测方法和结果 判定 、质量控制等项要求。 本部分 适用 于实验用鱼 （斑马鱼和 剑尾 鱼） 病理学检查和诊断。 2 规范性引用文件 下列文
4、件 对于 本文件的 应用 是必不可少 的。 凡是注日期的引用文件 ，仅所注日期的 版本 适用 于 本文 件。凡是不注日期 的引用文件，其最新版 本（包括所有的 修改单）适 用于 本文件。 DB11/T 196 常见 鱼病 防治 技术 操作 规程 3 术语和定义 下列术语和定义 适用 于本文件。 3.1 实验用鱼 laboratory fish 经人工 饲养、繁育，对其携带的病 原微生物及寄生虫实行 控制 ， 遗传 背景明确或者来源清楚 ， 用 于 科学研究、 教学 、生 产、 检定以 及其 他科学实验的鱼 类 。 4 采样要求 4.1 采样对象 选择3 月龄以上 的成 鱼样本。 4.2 采样方
5、式 应 在每一 生产 、实验 设施内 隔离 的不 同水 环境 内随机抽取 样本鱼。病理样 品的采集 应与 微生物学、 寄生虫学检测 联合 进行 。 4.3 采样数量 抽 样采 集样 品数 量，见表 1。 DB11/T 1053.42013 2 表 1 抽样采集样品数量 同一水环境实验用鱼数量 抽样数量 100尾 以 下 5尾 100尾 以上 5%，最大取样量为30 尾 4.4 样本送检及运输 样本送 检及 运输 容器 应清洁卫生 ，防 止 样本 腐败 或 污染 。样本 应有 特定 编号和 标 志并附送 检单， 写 明 样本的 来源 、品 种品 系、 级 别、 数量 、检测项目和采样 时间 。
6、5 检查频率 无特定病 原体 级实验用鱼 种群每 6个 月至 少检查 一次； 普通 级实验用鱼 种群每 12个月至 少检查 一次。 6 检查程序 检查程序 见图 1。 抽 样 编号 外观检查 麻醉 大体病理 解剖 病理学检查和 取材 组织病理学检查 检测结果 病理诊断 报告 图 1 病理学检查程序 7 检查方法及项目 7.1 检查方法 7.1.1 外观检查： 利用目检和 放大 镜先 行活体 检查 ，观察 其体表 、色 泽、 营养、 发育 和 活动状态 。 7.1.2 大 体解剖 病理学检查： 利用 放 大镜 及解剖镜进 行病理学剖 检和 组织 涂片 、压片 或 浸片 检查。 7.1.3 组织病
7、理学检查： 利用 光学 显 微镜 ，对 疑似 病变器官 及 组织 进行常 规的 组织 病理学检查。 DB11/T 1053.42013 3 7.2 检查项目 7.2.1 外观 鳞片、 皮肤 、皮 下、 侧线 ，机体外观 形态 及功能 状况 。 7.2.2 鳃 检查鳃 外侧 、内 侧和 鳃片 ，从每一 侧鳃 的第 一片 鳃片取样 作为 组织 学检查样本 ， 检查 鳃弓、鳃丝。 7.2.3 口腔及天然孔 口 腔 ，有 无寄生虫 或其包 囊，刮 取上 下颌 少许粘液 镜检。检查 其它 天然孔 。 7.2.4 体腔 剖开腹腔 ，暴露 器官 ，检查 腹腔脏 器病理 变化 。取 病变组织， 进行组织 学检
8、查。 7.2.5 胃肠 观察肠胃 外壁 ，剖 检胃肠 及内容 物， 压片镜 检。 7.2.6 肝和脾 肝脾颜 色和病理 变化 ：分 别取肝 、脾 组织作组织 切片 检查和 组织 压片 检查。 7.2.7 胆囊 观察颜 色、大 小、有 无病理 变 化， 剪开胆囊 ，取 胆囊 和 汁放在 载玻 片镜 检。 7.2.8 肾脏 取出肾脏 ，检查 颜色 和病理 变 化。 取异 常的 肾脏 组织作组织 切片 和组织 压片 ，检查病理 变化 。 7.2.9 性腺和膀胱 取出两侧 性腺 和膀胱 进行 检查。 7.2.10 心脏 剪开胸腔 ，取 出并 剪开心脏 镜 检。 取心脏 组织 进行 压片镜 检。 7.2
9、.11 鳔 完整取 出鱼 鳔， 观察外观 ，然后剪开 检查 ，并进 行压片镜 检。 7.2.12 眼球 取出眼球 ，解剖镜 检查。 剪开巩膜 ，涂片 作显 微镜 检查。 7.2.13 脊髓 从头部 与躯干交接处剪 断脊柱， 再把 尾部 与躯干交接处脊柱剪 断， 用镊子从 前端的 端口 夹出 脊髓， 涂片镜 检。 7.2.14 肌肉 DB11/T 1053.42013 4 从 鱼 体 的 侧面剪开 一部分 皮肤， 用镊子剥去皮肤 ， 暴露肌肉 组织， 观察 颜色 ， 取疑似 病变 做组织病 理学检查。 7.2.15 骨骼 检查 骨骼 的发 育和 形态 的 异常 情况 。 7.2.16 检查要求
10、外观检查， 参 照DB/T 196 中 鱼体观察 的要求 进行 ； 大 体病理 解剖 检查和病理 组织 学检查， 参 照DB/T 196中 临床 检验的要求 进行。 8 检查结果 及结论 8.1 不合格判 定 当被检样本鱼的 外观 检测 、大 体 病理 解剖 和组织 学检查出 现一 尾及 一尾 以上 明显的 感染 性病 变 ，或 出 现两 尾及 两尾 以上 明显 的病变时 ，则 判定 该实验用鱼群 为不 合格 ，并 注明 病变的 比率。 8.2 合格判 定 所有被 检样本鱼的 外观检测 、大 体解剖 和组织 学检查 均未 检出明 显的病理变 化，该 普通级 或SPF级 实验用鱼 群均 判为合 格； 当被检样本鱼的 外观 检测 或大体 病理 解剖 检查出 现轻度异 常，组织 学检查未检 出 明 显的病理 变化， 该普通 级实验用鱼 群判 为合 格， SPF级实验用鱼 群则 判为 不合格 ， 并记录 主要病 变 。 8.3 结果确认 出 具 病理检查结果的 人员 ，应 具 有 病理学 专业 的学 历和中 级以上 技术 职务资 格， 并 具 有 3年 以上病 理诊断的 经历 ， 且需 要有 同 行复核 一致 的结果。病理诊断 报告 应由病理学 专业 高级技术 职务 的人 员签署。 _
