1、1 印月9610月 本標準非經本局同意得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 號 ICS 67.120 N6184 10888經濟部標準檢驗局印 公布日期 修訂公布日期 735月18日 9610月24日 (共3頁)食品中亞硝酸鹽之檢驗法 Method of test for nitrites in food 1. 適用範圍：本標準規定於香腸、火腿、水產品及其他肉製品中亞硝酸鹽之檢驗。 2. 原理：試樣用熱水萃取，以蛋白質沉澱劑將蛋白質沉澱後加以過濾。再加入對胺苯磺醯胺(sulfanilamide)和萘乙二胺鹽酸鹽（N-(1-naphthyl)-ethylene diamine2HCl）使亞硝酸
2、根呈現紅色並取其濾液在波長540 nm時測定其吸光值。 3. 試藥 3.1 亞鐵氰化鉀(potassium ferrocyanide trihydrate)、醋酸鋅、冰醋酸、四硼酸鈉(sodium tetraborate dehydrate)及鹽酸均採試藥級。對胺苯磺醯胺及萘乙二胺鹽酸鹽均採用試藥特級。 3.2 蛋白質沉澱劑之調製 3.2.1 沉澱劑I：稱取亞鐵氰化鉀106 g，溶於水使成1000 mL。 3.2.2 沉澱劑：稱取醋酸鋅220 g及量取冰醋酸30mL，溶於水使成1000 mL。 3.2.3 飽和四硼酸鈉溶液：稱取四硼酸鈉50 g，溶於1000 mL溫水中，冷卻至室溫。 3.3
3、呈色液之調製 3.3.1 呈色液I：稱取對胺苯磺醯胺2 g，加水800 mL於水浴上加熱溶解後，冷卻過濾，濾液徐徐加入濃鹽酸100 mL並時時攪拌，再加水使成1000 mL。 3.3.2 呈色液：稱取萘乙二胺鹽酸鹽0.25 g，溶於水成250 mL，應貯存於褐色瓶，本液宜新鮮配置。 3.3.3 呈色液：量取濃鹽酸445 mL加水使成1000 mL。 3.4 亞硝酸鈉(sodium nitrite)標準溶液之調製及標準曲線之製作 3.4.1 精確稱取亞硝酸鈉150 mg (於烘箱內以100 乾燥30分鐘後，移置於乾燥器內，冷卻至室溫)，以水定容至1000 mL。 3.4.2 量取第3.4.1節溶
4、液10 mL，加水定容至100 mL，其濃度為每mL相當含亞酸酸根(NO2-) 10 g。精確稱取1 mL，2 mL，4 mL，6 mL及水(做空白試驗)分置於100 mL定量瓶，各加水至60 mL，加入呈色液I （第3.3.1節）10 mL及呈色液 （第3.3.3節）6 mL，混合均勻靜置5分鐘，再加呈色液（第3.3.2節）2 mL，混合均勻靜置15分鐘，最後加水定容至100 mL。 3.4.3 以波長540 nm分別測其吸光度，按所得吸光值與相對之標準液濃度(g/mL)製作標準曲線。 4. 儀器 4.1 碎肉機。 4.2 分析天平。 2 CNS 10888, N 6184 4.3 定量瓶：
5、100 mL、200 mL及1000 mL。 4.4 水浴槽。 4.5 光電比色計或分光光度計。 4.6 凹槽濾紙，直徑約15 cm。 5. 取樣 5.1 參照CNS 6257肉及肉製品檢驗法取樣之一般規定至少抽取樣品200 g。 5.2 供檢試樣應新鮮製備。若不能立即製備，則將樣品貯放於05 最多不得超過4天。 6. 步驟 6.1 樣品製備：將檢體以碎肉機細碎兩次並混合均勻後，置於不透氣之容器內，貯放於冷藏的環境，在24小時內儘速分析。 6.2 檢驗部分：精確稱取樣品10 g(精稱至0.001 g)置於三角瓶內，加入飽和四硼酸鈉溶液5 mL及80 以上之熱水100 mL，於沸騰水浴中加熱15
6、分鐘，並時時振盪，然後靜置冷卻至室溫，再加入沉澱劑I及各2 mL充分混合後移入200 mL容量瓶內，以水定容至200 mL，混合均勻，於室溫下靜置30分鐘，經過濾後取濾液供作檢液。 6.3 定量 6.3.1 精確量取檢液20 mL (或含亞硝酸根小於60 g之適當檢液)及水(做空白試驗用)分置於100mL容量瓶內，各加水至60 mL左右，加入呈色液I（第3.3.1節）10mL及呈色液（第3.3.3節）6 mL混合均勻靜置5分鐘，再加呈色液（第3.3.2節）2 mL混合均勻靜置15分鐘，最後加水定容至100 mL。 6.3.2 以波長540 nm測定其吸光值，並由標準曲線求出檢體中亞硝酸根之含量
7、。如檢液著色時，量取上述同量檢液及水(做空白試驗)分置於100 mL容量瓶內加水至60 mL，並加6 mL呈色液混合再加水定容至100 mL，以波長540 nm測定其吸光度，經校正後，再由標準曲線求出檢體中亞硝酸根之含量。 備考：若溶液吸光值超過標準溶液最大濃度之吸光值，則重新吸取較少量之檢液，依第6.3節重新操作。 7. 結果表示法 7.1 計算 NO2-(ppm)m100V200C 式中，C=檢液之吸光度經由標準曲線所求得亞硝酸根之濃度(g/mL) V=用光電比色計或分光光度計測定所取得之濾液體積(mL) m=檢體重量(g) 7.2 重複性：同時檢驗同一試樣，由同一分析者使用相同方法及相同設備測定時的兩次所測得之值不得大於平均值的10%。 備考：本方法之最低檢出量為0.50 ppm。 3 CNS 10888, N 6184 引用標準：CNS 6257肉及肉製品檢驗法取樣之一般規定 相對應國際標準：ISO 2918-1975(E) Meat and meat products Determination of nitrite content (Reference method) 修訂日期：第一次修訂：76年11月28日 第二次修訂：77年01月29日 差異性分析表 CNS 10888 ISO 2918-1975(E) 使用波長 540 nm 538 nm
