CNS 12634-2006 Method of test for fruit and vegetable juice products - Determination of sugars by HPLC《水果及蔬菜汁饮料检验法-糖类之测定(HPLC法)》.pdf

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1、1 印月954月 本標準非經本局同意得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 號 ICS 67.160.20 N622312634經濟部標準檢驗局印 公布日期 修訂公布日期 7111月22日 954月19日 (共2頁)水果及蔬菜汁飲料檢驗法 糖類之測定(HPLC法) Method of test for fruit and vegetable juice products Determination of sugars by HPLC 1. 適用範圍:本標準規定水果及蔬菜汁飲料中以高效液相層析儀測定糖類之方法。 2. 檢驗方法 2.1 裝置:高效液相層析儀(high performance li

2、quid chromatography, HPLC)。 2.1.1 偵檢器:RI偵檢器(Refractive index detector)。 2.1.2 層析管:Lichrospher NH2,5 m,內徑4 mm 25 cm或同等級品。 2.2 器具及材料 2.2.1 冷凍離心機或超高速離心機。 2.2.2 濾膜:孔徑0.45 m,直徑13 mm。 2.3 試藥:乙醇採試藥特級,乙腈採液相層析級,木糖、葡萄糖、果糖、蔗糖採試藥特級級。 2.4 試劑之調製 2.4.1 50%乙醇溶液:取酒精500 mL加二次去離子水,定容至1000 mL。 2.4.2 移動相溶液:乙腈與去離子水以82:18

3、 (v/v)比例混合後經濾膜過濾並脫氣。 2.5 標準溶液之配製 2.5.1 糖類標準溶液:取糖類標準品約3g,置於真空烘箱70 乾燥4小時以上。 2.5.1.1 葡萄糖(1.0%)溶液:稱取乾燥後葡萄糖標準品1.0 g,加乙醇溶液(50%)定容至50 mL。 2.5.1.2 果糖(1.0%)溶液:稱取乾燥後果糖標準品1.0 g,加乙醇溶液(50%)定容至50 mL。 2.5.1.3 蔗糖(1.0%)溶液:稱取乾燥後蔗糖標準品1.0 g,加乙醇溶液(50%)定容至50 mL。 2.5.2 糖類內部標準溶液:稱取木糖10 g於100 mL容量瓶中,精確稱定,以50%乙醇溶液使其完全溶解,再定容至

4、100 mL,供作10%木糖內部標準溶液。 2.5.3 糖類混合標準溶液:稱取葡萄糖、果糖及蔗糖各1.5 g,置於50 mL容量瓶中,精確稱定,以50%乙醇溶液使其完全溶解,再定容至50 mL。各取7 mL、4 mL、1 mL分別置於10 mL容量瓶中,各加入10%木糖內部標準溶液1 mL,再以50%乙醇溶液定容至10 mL,混合均勻後,以濾膜過濾後備用。 2.6 檢液之調製:將樣品充分混合均勻後,取適量體積於100 mL容量瓶,加入10%木糖內部標準溶液10 mL及50%乙醇溶液50 mL,混合均勻,定容至100 mL,以高速離心15分鐘後,取澄清液經濾膜過濾,供作檢液。 2 CNS 126

5、34, N 6223 2.7 鑑別試驗與含量測定:精確量取檢液及糖類混合標準溶液各20 L,分別注入高效液相層析儀中,參照下列條件進行液相層析,就檢液與標準溶液所得波峰滯留時間比較鑑別之,並依下列計算式求出檢體中糖類之含量(%)。 糖類(g/100 mL)X V1 D.F. V X:試樣溶液經鑑定後,其波峰面積代入標準曲線求得之濃度(g/100 mL) V1:定量體積(mL) V:樣品取樣體積(mL) D.F.:稀釋倍數 高效液相層析測定參考條件 層析管柱:Lichrospher NH2,5 m,內徑4 mm 25 cm 偵檢器:RI偵檢器 移動相溶液:依第2.4.2節所調製之溶液 移動相流速:1.0 mL/min 相對應國際標準:IFU Method No.67, 1996, Determination of Sugars and Sorbitol 修訂日期:第一次修訂:80年6月25日 第二次修訂:93年8月16日

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