1、DEUTSCHE NORM Dezember 2003Mikrobiologie von Lebensmitteln und FuttermittelnHorizontales Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positivenStaphylokokken (Staphylococcus aureus and anderen Spezies)Teil 1: Verfahren mit Baird Parker Agar (ISO 6888-1:1999 + AMD 1:2003)Deutsche Fassung EN ISO 6888-1:1999
2、+ A1:2003EN ISO 6888-1ICS 07.100.30Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci(Staphylococcus aureus and other species) Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium(ISO 6888-1:1999 + AMD 1:2003);German version EN ISO 68
3、88-1:1999 + A1:2003Microbiologie des aliments Mthode horizontale pour le dnombrementdes staphylocoques coagulase positive (Staphylococcus aureus etautres espces) Partie 1: Technique utilisant le milieu glos de Baird-Parker(ISO 6888-1:1999 + AMD 1:2003);Version allemande EN ISO 6888-1:1999 + A1:2003E
4、rsatz frDIN EN ISO 6888-1:1999-05Die Europische Norm EN ISO 6888-1:1999 hat den Status einer Deutschen Norm,einschlielich der eingearbeiteten nderung A1:2003, die von CEN getrennt verteiltwurde.Nationales VorwortDiese Europische Norm enthlt unverndert die Internationale Norm ISO 6888-1:1999 + AMD 1:
5、2003, dievom SC 9 Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln (Sekretariat: Frankreich) des TechnischenKomitees ISO/TC 34 Landwirtschaftliche Lebensmittelerzeugnisse (Sekretariat: Ungarn) erarbeitet wurde.Aufgrund der Ergebnisse der parallelen Abstimmung im Rahmen der Wiener Vereinbarung gilt
6、diese Normebenso als Europische Norm EN ISO 6888-1:1999 + A1:2003.Die Mitarbeit des DIN im SC 9 des ISO/TC 34 und in der Arbeitsgruppe 6 des CEN/TC 275 wird ber denArbeitsausschuss Mikrobiologische Lebensmitteluntersuchung einschlielich Schnellverfahren desNormenausschusses Lebensmittel und landwirt
7、schaftliche Produkte (NAL) wahrgenommen.Anlass zur berarbeitung der ISO 6888-1:1999 war die Entscheidung, die Teile 1 und 2 der ISO 6888 alsgleichwertig anzuerkennen, sowie die Einarbeitung der Przisionsdaten.Der Text der nderung ist durch eine senkrechte Linie am linken Rand gekennzeichnet.Fr die i
8、m Abschnitt 2 zitierte Internationale Norm wird im Folgenden auf die entsprechende DeutscheNorm hingewiesen:ISO 6887-1 siehe DIN EN ISO 6887-1Fortsetzung Seite 2und 22 Seiten ENNormenausschuss Lebensmittel und landwirtschaftliche Produkte (NAL) im DINDeutsches Institut fr Normung e. V. DIN Deutsches
9、 Institut fr Normung e.V. .Jede Art der Vervielfltigung, auch auszugsweise, Ref. Nr. DIN EN ISO 6888-1:2003-12nur mit Genehmigung des DIN Deutsches Institut fr Normung e. V., Berlin, gestattet. Preisgr. 13 Vertr.-Nr. 2313Alleinverkauf der Normen durch Beuth Verlag GmbH, 10772 BerlinNormCD Stand 2004
10、-03DIN EN ISO 6888-1:2003-122nderungenGegenber DIN EN ISO 6888-1:1999-05 wurden folgende nderungen vorgenommen: nderung EN ISO 6888-1:1999/A1:2003 eingearbeitet.Frhere AusgabenDIN 10163-1: 1984-04DIN 10178-2: 1988-04DIN 10178-3: 1988-04DIN EN ISO 6888-1: 1999-05Nationaler Anhang NA(informativ)Litera
11、turhinweiseDIN EN ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln Vorbereitung von Untersuchungs-proben und Herstellung von Erstverdnnungen und von Dezimalverdnnungen fr mikrobiologischeUntersuchungen Teil 1: Allgemeine Regeln fr die Herstellung von Erstverdnnungen und Dezimal-verdnnun
12、gen (ISO 6887-1:1999); Deutsche Fassung EN ISO 6887-1:1999.NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-1Mai 1999EUROPISCHE NORMEUROPEAN STANDARDNORME EUROPENNE+A1Juli 2003ICS 07.100.30Deutsche FassungErsatz fr EN ISO 6888-1:1999Mikrobiologie von Lebensmitteln und FuttermittelnHorizontales Verfahren fr die Zhlun
13、g von koagulase-positivenStaphylokokken (Staphylococcus aureus und andere Spezies)Teil 1: Verfahren mit Baird Parker Agar(ISO 6888-1:1999 + AMD 1:2003)Microbiology of food and animal feeding stuffs Horizontal method for the enumeration of coagulase-positive staphylococci (Staphylococcus aureus and o
14、therspecies) Part 1: Technique using Baird-Parker agar medium(ISO 6888-1:1999 + AMD 1:2003)Microbiologie des aliments Mthode horizontale pour le dnombrement desstaphylocoques coagulase positive (Staphylococcusaureus et autres espces) Partie 1: Technique utilisant le milieu glos de Baird-Parker (ISO
15、6888-1:1999 + AMD 1:2003)Diese Europische Norm wurde von CEN am 1999-02-15 angenommen.Die nderung A1 wurde von CEN am 2. Juni 2003 angenommen.Die CEN-Mitglieder sind gehalten, die CEN/CENELEC-Geschftsordnung zu erfllen, in der die Bedingungen festgelegt sind, unter denendieser Europischen Norm ohne
16、jede nderung der Status einer nationalen Norm zu geben ist.Diese Europische Norm wurde vom CEN in drei offiziellen Fassungen (Deutsch, Englisch, Franzsisch) erstellt. Eine Fassung in eineranderen Sprache, die von einem CEN-Mitglied in eigener Verantwortung durch bersetzung in seine Landessprache gem
17、acht und demManagement-Zentrum mitgeteilt worden ist, hat den gleichen Status wie die offiziellen Fassungen.CEN-Mitglieder sind die nationalen Normungsinstitute von Belgien, Dnemark, Deutschland, Finnland, Frankreich, Griechenland, Irland,Island, Italien, Luxemburg, Malta, Niederlande, Norwegen, ste
18、rreich, Portugal, Schweden, Schweiz, Spanien, der TschechischenRepublik, Ungarn und dem Vereinigten Knigreich.EUROPISCHES KOMITEE FR NORMUNGEUROPEAN COMMITTEE FOR STANDARDIZATIONCOMIT EUROPEN DE NORMALISATIONManagement-Zentrum: rue de Stassart, 36 B-1050 Brssel 2003 CEN Alle Rechte der Verwertung, g
19、leich in welcher Form und in welchemVerfahren, sind weltweit den nationalen Mitgliedern von CEN vorbehalten.Ref. Nr. EN ISO 6888-1:1999 + A1:2003 (D)NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-1:1999+A1:2003 (D)2InhaltSeiteVorwort 3Einleitung 41 Anwendungsbereich. 52 Normative Verweisungen . 53 Begriffe. 54 Kur
20、zbeschreibung. 55 Verdnnungsmittel und Nhrmedien 66 Gerte und Glasgerte 97 Probenahme. 108 Vorbereitung der Untersuchungsprobe109 Durchfhrung 1010 Angabe der Ergebnisse 1211 Przision 1512 Untersuchungsbericht 17Anhang A (informativ) Ergebnisse des Ringversuchs 18Literaturhinweise 21Anhang ZA (normat
21、iv) Normative Verweisungen auf internationale Publikationen mit ihrenentsprechenden europischen Publikationen . 22NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-1:1999+A1:2003 (D)3VorwortDer Text der Internationalen Norm ISO 6888-1:1999 vom Technischen Komitee ISO/TC 34 Agricultural foodproducts der Internationale
22、n Organisation fr Normung (ISO) wurde als Europische NormEN ISO 6888-1:1999 durch das Technische Komitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale“Verfahren bernommen, dessen Sekretariat vom DIN gehalten wird.Diese Europische Norm muss den Status einer nationalen Norm erhalten, entweder durch Verf
23、fentlichungeines identischen Textes oder durch Anerkennung bis August 1999, und etwaige entgegenstehende nationaleNormen mssen bis August 1999 zurckgezogen werden.Entsprechend der CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nationalen Normungsinstitute der folgendenLnder gehalten, diese Europische Norm zu
24、bernehmen: Belgien, Dnemark, Deutschland, Finnland,Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Luxemburg, Malta, die Niederlande, Norwegen, sterreich,Portugal, Schweden, die Schweiz, die Slowakei, Spanien, die Tschechische Republik, Ungarn und dasVereinigte Knigreich.Die erste Ausgabe von ISO
25、 6888-1 zusammen mit ISO 6888-2 ersetzt die ISO 6888:1983, die fachlichberarbeitet wurde.ISO 6888 besteht aus den folgenden Teilen unter dem allgemeinen Titel Mikrobiologie von Lebensmitteln undFuttermitteln Horizontales Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positiven Staphylokokken(Staphylococcus a
26、ureus und andere Spezies). Teil 1: Verfahren mit Baird-Parker-Agar. Teil 2: Verfahren mit Kaninchenplasma/Fibrinogen-Agar.AnerkennungsnotizDer Text von ISO 6888-1:1999 wurde vom CEN als Europische Norm ohne irgendeine Abnderunggenehmigt.Vorwort der nderung A1Der Text der nderung EN ISO 6888-1:1999/A
27、1:2003 zur EN ISO 6888-1:1999 des Technischen KomiteesISO/TC 34 Lebensmittelerzeugnisse wurde als nderung zur Europischen Norm durch das TechnischeKomitee CEN/TC 275 Lebensmittelanalytik Horizontale Verfahren, dessen Sekretariat vom DIN gehaltenwird, bernommen.Diese nderung der Europischen Norm EN I
28、SO 6888-1:1999 muss den Status einer nationalen Normerhalten, entweder durch Verffentlichung eines identischen Textes oder durch Anerkennung bisJanuar 2004, und etwaige entgegenstehende nationale Normen msen bis Januar 2004 zurckgezogenwerden.Entsprechend der CEN/CENELEC-Geschftsordnung sind die nat
29、ionalen Normungsinsitute der folgendenLnder gehalten, diese Europische Norm zu bernehmen: Belgien, Dnemark, Deutschland, Finnland,Frankreich, Griechenland, Irland, Island, Italien, Luxemburg, Malta, die Niederlande, Norwegen, sterreich,Portugal, Schweden, die Schweiz, die Slowakei, Spanien, die Tsch
30、echische Republik, Ungarn und dasVereinigte Knigreich.AnerkennungsnotizDer Text der nderung zu der Internationalen Norm ISO 6888-1:1999/AMD 1:2003 wurde von CEN als nde-rung zur Europische Norm ohne irgendeine Abnderung genehmigt.ANMERKUNG Die normativen Verweisungen auf Internationale Normen sind i
31、m Anhang ZA (normativ)aufgefhrt.NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-1:1999+A1:2003 (D)4Einleitung0.1 Wegen der Vielzahl von Lebensmitteln und Futtermitteln kann dieses horizontale Verfahren nicht bis insEinzelne fr bestimmte Produkte geeignet sein. In diesem Falle drfen unterschiedliche Verfahren, diesp
32、eziell auf diese Produkte zutreffen, angewendet werden, wenn dies aus fachlichen Grnden absolutnotwendig ist. Dennoch sollte stets versucht werden, diesem horizontalen Verfahren so weit wie mglich zufolgen.Bei der nchsten berarbeitung von ISO 6888 werden smtliche dann zur Verfgung stehendenInformati
33、onen ber die Akzeptanz dieser Norm und die Grnde fr Abweichungen bei einzelnen Produktenbercksichtigt werden.Die Harmonisierung der Untersuchungsverfahren kann nicht sofort erfolgen. Fr bestimmte Produktgruppenknnen bereits Internationale Normen und/oder nationale Normen bestehen, die diesen Regeln
34、nichtentsprechen. Es ist jedoch anzustreben, sie bei einer berarbeitung an diesen Teil von ISO 6888anzupassen, so dass es sich bei den noch verbleibenden Abweichungen nur um solche handelt, die fachlichbegrndet sind.0.2 ISO 6888 beschreibt zwei horizontale Verfahren (Teil 1 und Teil 2) fr die Zhlung
35、 von koagulase-positiven Staphylokokken, zu denen enterotoxische Stmme gezhlt werden. Hier ist hauptschlichStaphylococcus aureus gemeint, aber auch S. intermedius und einige Stmme von S. hyicus.Beide Teile der ISO 6888 sind gleichwertig. ISO 6888-2 (siehe Literaturhinweis 1) wird fr solcheLebensmitt
36、el (wie z. B. Rohmilchkse und bestimmte rohe Fleischerzeugnisse) empfohlen, die wahrscheinlichkontaminiert sind durch: Staphylokokken, die auf Baird-Parker-Agar atypische Kolonien bilden, oder Begleitflora, die die gesuchten Kolonien berdecken kann.0.3 In diesem Teil von ISO 6888 beruht die Besttigu
37、ng von Staphylococcus aureus auf einer stark positi-ven Koagulase-Reaktion, es ist jedoch zu beachten, dass einige Stmme von Staphylococcus aureusschwach positive Koagulase-Reaktionen aufweisen. Diese letztgenannten Stmme knnen mit anderen Kei-men verwechselt werden, sie knnen jedoch von diesen Keim
38、en mit zustzlichen Prfungen, die nicht in die-sem Teil von ISO 6888 enthalten sind, unterschieden werden, wie z. B. anhand der Lysostaphin-Empfindlich-keit und der Bildung von Hmolysin, von Thermonuklease und von Mannit (siehe Literaturhinweis 2).NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-1:1999+A1:2003 (D)51
39、AnwendungsbereichDieser Teil von ISO 6888 legt ein horizontales Verfahren fr die Zhlung von koagulase-positivenStaphylokokken in Lebensmitteln und Futtermitteln fest. Die nach aerober Inkubation bei 35 C oder 37 C aufeinem festen Medium (Baird-Parker-Agar) erhaltenen Kolonien werden gezhlt und bestt
40、igt.2 Normative VerweisungenDie folgenden zitierten Dokumente sind fr die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datiertenVerweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzteAusgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschlielich aller nderungen).
41、ISO 6887-1, Microbiology of food and animal feeding stuffs Preparation of test samples, initial suspensionand decimal dilutions for microbiological examination Part 1: General rules for the preparation of the initialsuspension and decimal dilutions.ISO 7218, Microbiology of food and animal feeding s
42、tuffs General rules for microbiological examination.3 BegriffeFr die Anwendung dieses Teils von ISO 6888 gelten die folgenden Begriffe.3.1koagulase-positive StaphylokokkenMikroorganismen, die auf der Oberflche eines selektiven Nhrmediums typische und/oder atypischeKolonien bilden und eine positive K
43、oagulase-Reaktion zeigen, wenn die Untersuchung nach diesem Teil vonISO 6888 durchgefhrt wird3.2Zhlung von koagulase-positiven StaphylokokkenBestimmung der Anzahl von koagulase-positiven Staphylokokken in einem Milliliter oder einem Gramm Probe,wenn die Untersuchung nach diesem Teil von ISO 6888 dur
44、chgefhrt wurde4 Kurzbeschreibung4.1 Die Oberflchen eines festen selektiven Nhrmediums von zwei Platten (Doppelbestimmung) werdenmit einer festgelegten Menge der flssigen Untersuchungsprobe oder mit einer festgelegten Menge derErstverdnnung bei nicht flssigen Proben beimpft.Unter denselben Bedingunge
45、n werden zwei Platten je Verdnnungsstufe mit Dezimalverdnnungen derUntersuchungsprobe oder mit der Erstverdnnung beimpft.4.2 Die Platten werden aerob bei 35 C oder 37 C1)bebrtet und nach 24 h wie auch nach 48 h berprft.4.3 Die Anzahl der koagulase-positiven Staphylokokken je Milliliter oder je Gramm
46、 der Probe wird aus derAnzahl der typischen und/oder atypischen Kolonien auf den Platten berechnet, wobei die Verdnnungen sogewhlt werden, dass ein signifikantes Ergebnis erhalten und durch den Koagulase-Test besttigt wird.1) Die Temperatur wird zwischen den betreffenden Partnern vereinbart und im U
47、ntersuchungsbericht festgehalten.NormCD Stand 2004-03EN ISO 6888-1:1999+A1:2003 (D)65 Verdnnungsmittel und Nhrmedien5.1 AllgemeinesZur blichen Laborpraxis siehe ISO 7218.5.2 VerdnnungsmittelSiehe ISO 6887-1 und die spezielle Norm fr die zu untersuchende Probe.5.3 Baird-Parker-Agar2)ANMERKUNG Kommerz
48、iell erhltliche Medien drfen verwendet werden, wobei den Herstelleranweisungen sorgfltiggefolgt werden sollte.5.3.1 Grundmedium5.3.1.1 ZusammensetzungCasein, pankreatisch verdaut 10,0 gHefeextrakt 1,0 gFleischextrakt 5,0 gNatriumpyruvat 10,0 gL-Glycin 12,0 gLithiumchlorid 5,0 gAgar 12 g bis 22 gaWas
49、ser, bis zu einem Endvolumen von 1 000 mlaJe nach Geliereigenschaften5.3.1.2 HerstellungDie Bestandteile oder das gebrauchsfertige trockene Grundmedium werden durch Kochen im Wasser gelst.Falls erforderlich, wird der pH-Wert auf 7,2 0,2 eingestellt, bei 25 C nach der Sterilisierung gemessen.Das Medium wird in 100-ml-Anteilen in Kolben oder Flaschen (6.5) m
