2018_2019学年高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1.ppt

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资源描述

1、,析出,溶解,DNA,0.14 mol/L的NaCl溶液,2 mol/L的 NaCl溶液,溶解规律,项目,DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同; 选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的,总结,溶解,部分发生盐析沉淀,蛋白质,0.14 mol/L的NaCl溶液,2 mol/L的NaCl溶液,溶解规律,项目,NaCl溶液为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质;当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质,

2、溶于NaCl溶液中并稀释,DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,目的,方法,基本原理,鉴定DNA,加入二苯胺,并沸水浴加热,DNA可被二苯胺染成蓝色,DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质,加入冷却酒精(95%),DNA不溶于酒精溶液,嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,分解蛋白质,加入嫩肉粉,DNA不被蛋白酶所水解,目的,方法,基本原理,溶解DNA,过滤除去不溶的杂质,向上述滤液中加入NaCl,使NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L,并用玻璃棒沿一个方向搅拌,然后过滤,溶解DNA,使细胞因过度吸水而破裂,释放核物质,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,并充分搅拌,过滤后收集滤液,提取细胞核物质,防止血

3、液凝固,使血细胞与血浆分离,每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠,然后静置或离心,除去上清液,制备鸡血细胞液,目的,实验操作,步骤,除去溶于酒精的杂质,获得较纯净的DNA,向上述滤液中加入等体积的体积分数为95%的冷却酒精溶液,待出现丝状物时用玻璃棒沿一个方向搅拌,将丝状物卷起,提取较纯净的DNA,溶解DNA,过滤除去杂质,将纱布上的黏稠物放入2 mol/L的NaCl溶液中,搅拌至完全溶解,然后过滤,DNA的再溶解,使NaCl溶液的浓度降至0.14 mol/L,析出DNA,过滤除去溶于该浓度的NaCl溶液的杂质,向上述滤液中缓缓加入蒸馏水并 轻轻搅拌,至白色丝状黏稠物不 再增加时停止加水,然

4、后用多层 纱布过滤,析出DNA,目的,实验操作,步骤,DNA在沸水浴条件下,遇二苯胺会变成蓝色,实验结论,不变色,变蓝,实验现象,沸水浴5 min,4,加4 mL二苯胺混匀,3,加DNA丝状物溶解,2,加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL,1,B,A,试管 序号,去除不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质,去除溶于 0.14 mol/L NaCl溶液的杂质,去除不溶于 2 mol/L NaCl溶液的杂质,去除细胞膜、核膜等杂质,过滤目的,NaCl溶液,蒸馏水,NaCl溶液,蒸馏水,过滤前加入的物质,不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质,DNA,不溶于 2 mol/L NaCl溶液 的杂质,细胞膜、 核膜等残片,纱布上,DNA,溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质,DNA,含DNA 的核物质,滤液中,第四次过滤,第三次过滤,第二次过滤,第一次过滤,

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