1、ICS 13.060 C 51 DB37 山东省 地方标准 DB37/T 4146 2020 水质 联苯胺的测定 固相萃取 -液相色谱 -串联质谱法 Water quality Determination of benzidine Solid phase extraction-Liquid chromatography-Tandem mass spectrometry 2020 - 09 - 25 发布 2020 - 10 - 25 实施 山东省市场监督管理局 发布 DB37/T 4146 2020 1 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 方法原理 . 1
2、 4 试剂和材料 . 1 5 仪器和设备 . 2 6 样品 . 2 7 分析步骤 . 2 8 结果计算与表示 . 4 9 精密度和准确度 . 4 10 质量保证和质量控制 . 5 DB37/T 4146 2020 2 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 2009给出的规则起草。 本标准由山东省住房和城乡建 设厅提出并组织实施。 本标准由山东省城镇给水排水标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：山东省城市供排水水质监测中心、国家城市供水水质监测网武汉监测站、国家城 市供水水质监测网杭州监测站、国家城市供水水质监测网青岛监测站、山东省分析测试中心、中国兵器 工业集团第五三研究所。 本标准主要起草
3、人：宋艳、贾瑞宝、孙韶华、赵清华、刘莉、许燕、李世蔚、张立亚、王晓芳、赵 汝松、王晓利、高岩立、冀克俭、潘慧慧、黄允河。 DB37/T 4146 2020 3 水质 联苯胺的测定 固相萃取 -液相色谱 -串联质谱法 警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具 有潜在的危害，应尽量避免与这些化 学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具 ,避免接触皮肤 和衣物。 1 范围 本标准规定了测定生活饮用水及其水源水中联苯胺的固相萃取 -液相色谱 -串联质谱法。 本标准适用于生活饮用水及其水源水中联苯胺的测定。 取水样 500 mL，浓缩倍数为 125倍时，
4、本标准测定联苯胺的方法检出限为 0.010 g/L，测定下限为 0.040 g/L。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日 期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 5750.2-2006 生活饮用水标准检验方法 水样的采集与保存 GB/T 5750.3-2006 生活饮用水标准检验方法 水质分析质量控制 GB/T 32465 化学分析方法验证确认和内部质量控制要求 GB/T 33087 仪器分析用高纯水规格及试验方法 HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范 HJ/T 164 地
5、下水环境监测技术规范 3 方法原理 本方法采用固相萃取柱对水中的联苯胺进行富集，经甲醇洗脱后，进入液相色谱分离后串联质谱检 测，根据保留时间、碎片离子质荷比定性，外标法定量测定。 4 试剂和材料 4.1 固相萃取柱 ： HLB（ 6 mL， 200 mg）或等效固相萃取柱。 4.2 高纯水：水质满足 GB/T 33087的规定。 4.3 甲醇：色谱纯。 4.4 氮气：纯度 99.999 %。 4.5 乙酸铵：分析纯。 4.6 硫代硫酸钠：分析纯。 4.7 联苯胺标准溶液 ： =100 mg/L， 溶剂为甲醇， 有证标准物质 。 DB37/T 4146 2020 4 4.8 标准 使用 液 ：
6、=1.0 mg/L。 取 1 000 L 联苯胺标准溶液（ 4.7），用甲醇（ 4.3）稀释并定容至 100 mL，配制 1.0 mg/L标准使用液。于 4 以下冷藏密封避光保存。 4.9 乙酸铵 -水 溶液 ： c =10.0 mmol/L。 称取 0.770 8 g乙酸铵（ 4.5）用高纯水（ 4.2）溶解并定容至 1 L。 4.10 硫代硫酸钠 溶 液：用硫代硫酸钠（ 4.6）、高纯水（ 4.2）配制，浓度为 5 g/L。 5 仪器和设备 5.1 液相色谱 -串联质谱仪：配有电喷雾离子源。 5.2 色谱柱： C18柱或其他等效色谱柱。 5.3 固相萃取装置。 5.4 棕色样品瓶： 2 m
7、L。 5.5 容量瓶： 100 mL。 5.6 采样瓶： 1 L 4 L棕色玻璃瓶，螺旋盖（具聚四氟乙烯涂层的密封垫）。 5.7 微量注射器： 100 L和 1 000 L。 6 样品 6.1 样品 采集与保存 按照 HJ/T 91和 HJ/T 164的相关规定采集样品。用采样瓶（ 5.6）采集样品。 按照 GB/T 5750.2 2006的相关规定贮存样品。样品采集后在 4 下冷藏避光保存， 24 h内完成前处 理， 5 d内完成样品分析。若水样中存在残留氯，加入硫代硫酸钠溶液（ 4.10）去除余氯。 6.2 试样制备 6.2.1 活化 依次用 10 mL甲醇（ 4.3）和 10 mL高纯水
8、（ 4.2）活化固相萃取柱（ 4.1）。 6.2.2 样品富集 量取 500 mL水样，以 10 mL/min流速通过活化后的固相萃取柱，完成固相萃取富集。 注： 富集所用水样体积 根据水样实际情况可适当增减；不同型号的自动固相萃取仪或手动固相萃取仪，按照各自型 号仪器或手动进样操作规程进行萃取。 6.2.3 淋洗 用 5 mL高纯水（ 4.2）以 10 mL/min流速淋洗萃取柱，淋洗完成后用氮气吹干。 6.2.4 洗脱 用 4 mL甲醇（ 4.3）以 1 mL/min流速洗脱吸附在固相萃取柱上的被测组分，收集洗脱液至浓缩管中， 并用甲醇（ 4.3）定容至 4 mL，取 1 mL上机测定。
9、6.3 空白试样制备 用 高纯 水（ 4.2）代替样品，按照与样品（ 6.2）相同的步骤制备空白试样。 DB37/T 4146 2020 5 7 分析步骤 7.1 液相色谱条件 7.1.1 流动相： A相 甲醇（ 4.3）、 B相 10 mmol/L乙酸铵 -水溶液（ 4.9）。 7.1.2 洗脱模式及洗脱流速：采用等度洗脱，流动相为 A:B= 98:2（ V:V），洗脱速率为 0.3 mL/min。 7.1.3 柱温： 30 。 7.1.4 进样体积： 10 L。 7.2 质谱条件 7.2.1 离子源：电喷雾离子源，正离子模式 。 7.2.2 离子源温度： 350 。 7.2.3 扫描方式：
10、 MRM，多反应监测条件见表 1。 表 1 质谱参考参数设置 物质名称 母离子 子离子 碎裂电压 V 碰撞电压 V 联苯胺 185 167* 130 29 151* 30 注： 带 *为定量离子，带 *为定性离子。 7.3 校准曲线的 绘制 7.3.1 本方法使用外标法定量。 7.3.2 校准系列的配制：分别取 5 L 、 25 L 、 50 L 、 100 L 、 150 L 、 200 L 、 250 L 标准使 用液（ 4.8），用甲醇（ 4.3）定容至 1 mL，配制成浓度分别为 5 g/L 、 25 g/L 、 50 g/L 、 100 g/L 、 150 g/L 、 200 g/L
11、 、 250 g/L 校准系列溶液，保存在 2 mL棕色样品瓶（ 5.4）中待上机测试。 7.3.3 将 校 准系列溶液按浓度由低到高的顺序依次进样，以 校 准系列浓度为横坐标，峰面积为纵坐标， 绘制校准曲线。 7.4 试样 测定 7.4.1 采用自动进样 器 进样 ，进样量 为 10 L 。 7.4.2 将 6.2处理后的试 样 上机 测定。 注： 若样品中联苯胺浓度超出校准曲线最高点，用甲醇（ 4.3）稀释后测定。 7.4.3 联苯胺 MRM色谱图见图 1所示。 DB37/T 4146 2020 6 图 1 联苯胺 MRM 色谱图 7.5 空白试验 按照与试样测定（ 7.4）相同的步骤进行
12、空白试样（ 6.3）的测定。 8 结果计算与表示 8.1 定性结果 根据联苯胺 MRM色谱图中的保留时间和特征离子对进行定性分析。 8.2 定量结果 根据定量离子的峰面积外标法定量。由校准曲线得到样品中待测物的浓度 x按照公式（ 1）计算， 测定结果位数的保留与测定下限一致，最多保留三位有效数字。 x = . (1) 式中： x 样品中组分质量浓度，单位为微克每升（ g/L ）； 0 固相萃取洗脱液质量浓度，单位为微克每升（ g/L ） ； Vt 固相萃取洗脱液浓缩后定容体积，单位为毫升（ mL）； Vs 水样体积，单位为毫升（ mL）。 9 精密度和准确度 9.1 精密度 4家实验室分别测定
13、浓度为 0.08 g/L 1.00 g/L的高纯水加标样品。实验室内相对标准偏差为 0.9 % 14 %；实验室间的相对标准偏差为 8.0 % 12 %。 DB37/T 4146 2020 7 9.2 准确度 4家实验室分别测定地表水、地下水及生活饮用水加标样品。加标浓度为 0.08 g/L 1.00 g/L， 其加标回收率为 72.1 % 117 %。 10 质量保证和质量控制 10.1 空白试验 每批次样品应做空白试验，测定结果不能超过方法的检出限。 10.2 校准曲线要求 分析样品之前，应建立能够覆盖样品浓度范围的至少 6个浓度点的校准曲线，曲线的相关系数 r2应 大于 0.995。 10.3 平行样 平行双样测定结果的相对偏差满足 GB/T 5750.3 2006的要求。 10.4 基体加标 基体加标样品的加标回收率范围满足 GB/T 32465的要求。 _
