1、 ICS 13.310 CCS A 92 中 华 人 民 共 和 国 公 共 安 全 行 业 标 准 GA GA/T XXXX XXXX 法庭科学 大麻性别 基因特异 片段检测 毛细管电 泳荧光检 测法 Forensic Science - The detection of cannabis sativa L sex-determining gene fragment Capillary-electrophoresis and fluorescence method （报批稿 ） - - 发布 - - 实施 中华人民 共和国 公安部 发 布 GA/T XXXX XXXX I 前 言 GB/T
2、1.1-2020 1 SAC/TC 179 GA/T XXXX XXXX 1 法庭科学 大 麻性 别基因特 异片段 检测 毛细管 电泳 荧光检测 法 1 范围 DNA PCR 2 规范性 引用 文件 GA/T 382-2014 DNA GA/T 1160-2014 DNA 3 术语和 定义 3.1 性 染色 体 sex chromosome X Y 3.2 阳 性对 照 positive control PCR DNA DNA 3.3 阴 性对 照 negative control DNA PCR 4 器材 a) b) c) GA/T XXXX XXXX 2 d) 5 试剂 a) b) PCR
3、 1 X F 5 FAM-AGCCTGTCTAAGAGTGGG3 R 5 ACGTTGTTGCTCGTAAAT3 2 Y F 5 FAM-GCCCAAGTTGCTGCTGAG3 R 5 CCCACCGTTTAGGGAGCA3 c) PCR d) Taq DNA e) MgCl2 ） f) dNTPs g) h) i) DNA 6 实验室 环境 要求 GA/T 382-2014 5 7 操作步 骤 7.1 扩增反 应 7.1.1 DNA GA/T 1160-2014 7.1.2 7.1.3 1 表1 大麻性 别基 因特 异片 段 PCR 反应 体系 L 10 PCR Buffer 2.5 dNT
4、Ps(2.5mmol/L) 2.0 0.2 mmol/L MgCl2(25mmol/L) 2.0 2 mmol/L 1 (5 mol/L) 0.85 0.17 mol/L 2 (5 mol/L) 1.0 0.2 mol/L Taq DNA 5U/ L 0.2 0.04 U/ L 13.6 GA/T XXXX XXXX 3 表1 （ 续） L DNA 1.0 DNA DNA 0.5ng 1ng 7.1.4 7.1.5 2 表2 大麻性 别基 因特 异片 段扩 增条件 ( ) 95 11min 1 94 30s 30 60 30s 72 1min 72 2min 1 4 - - 7.1.6 7.1.7 4 2 -15 -20 7.2 检测分 析 7.2.1 7.2.2 10 L 1 L 7.2.3 7.2.4 8 结果判 断 1 X 2 Y 1 Applied Biosystems 3500 xL GeneScan TM 600 Liz TM GeneMapper TM ID-X 0.5bp GA/T XXXX XXXX 4 a) X 分型（大麻雌性植株） b) X/Y 分型（大麻雄性植株） 图1 大麻雌 性和 雄性 样本 检测 结果 9 注意事 项 9.1 9.2 150RFU RFU 9.3 DNA 9.4 DNA _
