1、 ICS 65.120 CCS B 46 34 安徽省地方标准 DB34/T 4206 2022 饲料中癸 氧喹酯的 测定 高 效液相色 谱法 Determination of decoxyquine in feeds high performance liquid chromatography method 2022-06-29 发布 2022-07-29 实施 安徽省市 场监督 管 理局 发 布 DB34/T 4206 2022 I 前 言 本文件 按照GB/T 1.1 2020 标 准化 工作 导则 第1 部分：标准 化文 件的 结构 和起草 规则 的 规 定起草。请注意 本文 件的 某
2、些 内容 可能涉 及专 利。本文 件的 发布机 构不 承担 识别 专利 的责任。本 文件 由安 徽省 兽药 饲料 监察所 提出。本 文件 由安 徽省 农业 农村 厅 归口。本 文件 起草 单位：安徽 省 兽药饲 料监 察所、安徽 赛 如分析 检测 科技 有限 公司、上 海衡 威生 物技 术长丰有限 公司、安徽 省饲料 与健康 养殖行 业协 会、岳 西县农 业农村 局、阜阳市 动物疫 病预防 与控 制中心、萧县丁 里畜 牧站、安 徽农 业大学、安 徽省 农业 科学 院畜牧 兽医 研究 所。本 文件 起草 人：宋亚 伟、丁在亮、王 文风、訾 振义、吴信 礼、程莹、李 保章、束玲 玲、袁琪、刘发全、
3、吴 昊、许世 富、汤春 莲、陈 凤敏、邵颖、潘孝 成、祁 钊、赵瑞 宏、李珲、李佳 庆。DB34/T 4206 2022 1 饲料中癸 氧喹酯 的测定 高效液 相色谱法 1 范围 本 文件 规定 了饲 料中 癸氧 喹酯含量 的 高效 液相 色谱 法测定 方法。本 文件 适用 于饲料 中 癸氧 喹酯含 量 的 测定。2 规范性 引用 文件 下列文 件中 的内 容通 过文 中的规 范性 引用 而构 成本 文件必 不可 少的 条款。其 中，注日 期的 引用 文件，仅该日 期对 应的 版本 适用 于本文 件；不注 日期 的引 用文件，其 最新 版本（包 括所有 的修 改单）适 用 于 本文件。GB/T
4、 6682 分 析实 验室 用 水规格 和试 验方 法 GB/T 20195 动 物饲 料 试样的 制备 3 术语和 定义 本文件 没有 需要 界定 的术 语和定 义。4 原理 试样中 的 癸 氧喹 酯 经 氯化 钙甲醇 溶液 超声 提取 过滤 后，高效 液相 色谱 分离，用 紫外检 测器 测定，外标法定 量。5 试剂和 材料 除 另有 说明 外，所用 试剂 均为分 析纯，实 验用 水应 符合 GB/T 6682 中 一级 水 的规定。甲醇：色谱 纯。无水 氯 化钙。1 氯 化钙 甲醇 溶液：称 取 氯化钙 2.0 g，加甲 醇 200 mL，超声 溶解。微孔滤 膜：0.45 m 有机 膜。标
5、准品：癸 氧喹 酯标 准品（CAS 号：18507-89-6），纯度 99.7。标准溶 液的 配制 如下：a)标准储备 液（100 g/mL）：精 确称 取 20 mg 癸 氧喹 酯 标准 品（精 确至 0.01 mg）于 200 mL容量瓶 中，用氯 化钙 甲醇 溶液（5.4）超 声溶 解，冷却，此 溶液 浓度 为 100 g/mL。置于 4冰箱中 保存，有 效期 2 个月；b)标准工 作液：分 别吸 取储备 液 1 mL、2 mL、5 mL、10 mL、20 mL 于 100 mL 容量瓶 中，用氯化钙甲 醇溶 液（5.4）定 容，标准 工作 溶液 系列 浓度 分别为 1 g/mL、2 g
6、/mL、5 g/mL、10 g/mL、20 g/mL，现 配现 用。6 仪器和 设备 DB34/T 4206 2022 2 高效液 相色 谱仪：配 有紫 外检测 器。超声波 仪。分析天 平：感量 0.1 g、0.1 mg、0.01 mg。离心机：转 速 3000 r/min。7 测定 试样的 制备 按照 GB/T 20195 的 规定 进行 制 样。提取 称取 适 量饲 料样 品（预混 合饲 料 1 g，浓 缩饲 料 3 g，配 合饲 料 5 g），精确至 0.01 g，置于 50 mL 容量 瓶中，用 氯化 钙甲 醇溶液（5.4）准确 定容，置于超 声波 仪超 声提 取 30 min。将试
7、样提 取液 转移至离 心管，3000 r/min，离心 10 min。取离 心上 清液，用 0.45 m 滤膜 过 滤，滤 液作 为试 样溶 液，供高效 液相 色谱 仪测定。色谱条 件 如下：a)色谱柱：C18 柱，长 250 mm，内径 4.6 mm，粒径 5 m（或 相当 者）；b)检测波 长：265 nm；c)流动相：氯 化钙 甲醇 溶液+甲醇，按体 积比 15 85（V/V）；d)流速：1.0 mL/min；e)柱温：25；f)进样体 积：20 L。上机测 定 取试样 溶液 和标 准工 作溶 液分别 进样，得到 色谱 峰 面积响 应值，在线 性范 围 内，用外 标法 作单 点或多点校
8、准，以保 留时 间定 性，峰 面积 定量。癸 氧喹 酯标准 色谱 图见 附录A中图A.1。空白试 验 取空白 试样，除 不加 标准 溶液外，采 用相 同的 测定 步骤进 行平 行操 作。8 结果 计算公 式 结果按 式（1）计算：=1 0 0 0 1 0 0 0(1)式中：X 试 样中 癸氧 喹酯 含量，单 位为 毫克 每千 克（mg/kg）；C 试 液色 谱峰 对应 的 癸氧喹 酯浓度，单位 为微 克 每毫 升（g/mL）；m 试 样质 量，单位 为 克（g）；DB34/T 4206 2022 3 V 定 容体 积，单位 为 毫升（mL）。结果表 示 计算结 果需 扣除 空白 试样，平行 测定 结果 用算 术平 均值表 示，保留 至小 数点 后1位 有效 数字。灵敏度 本标准 定量 限为 1.0 mg/kg。允许差 本方法 的批 内、批间 相对 标准偏 差均 10。DB34/T 4206 2022 4 附录A（资料 性）癸氧喹 酯标 准图 谱 见图A.1。图A.1 癸氧喹 酯 标 准溶 液 的 液相 色谱图
