1、ICS 67.040 C 53 中华人民共和国国家标准GB/T 5009.17-2003 代替GBjT5009.17-1996.部分代替GBjT5009.45-1996 食品中总宋及有机柔的测定Determination of total mercury and organic-mercury in foods 2003-08-11发布2004-01-01实施中华人民共和国卫生部中国国家标准化管理委员会发布129 GB/T 5009.17-2003 前言本标准代替GB/T5009. 17一1996(食品中总柔的测定方法和GB/T5009.451996(水产品卫生标准的分析方法中4.6甲基束。本
2、标准与GB/T5009. 17-1996和GB/T5009.45-1996(水产品卫生标准的分析方法中4.6甲基录相比主要修改如下:修改了标准的中文名称，标准中文名称改为食品中总*及有机柔的测定以一一按照GB/T20001. 4-200(标准编写规则第4部分:化学分析方法对原标准的结构进行了修改，一一-增加了氢化物原子荧光光谱法作为总柔的测定中的第一法手一一将GB/T5009. 451996(水产品卫生标准的分析方法中4.6甲基求作为甲基柔的测定。本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。本标准总柔的测定第一法由卫生部食品卫生监督检验所，北京市食品卫生监督检验所、四川省食品卫生监督检验所、北京进
3、口食品卫生监督检验所参加起草。本标准总柔的测定第二法(一)由上海市食品卫生监督检验所、中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所、卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准总隶的测定第二法(二)由卫生部食品卫生监督检验所负责起草。本标准总柔的测定第三法由江苏省卫生防疫站负责起草。本标准甲基柔的测定由上海市食品卫生监督检验所、江苏省卫生防疫站、杭州市卫生防疫站、卫生部食品卫生监督检验所、青海省卫生防疫站、福建省卫生学校负责起草。130 本标准总隶的测定第一法主要起草人2杨惠芬、黄流生、毛红、强卫国、i司军。本标准于1985年首次发布，于1996年第一次修订，本次为第二次修订。食品中总隶及有机柔的测定总
4、柔的测定1 范围本标准规定了各类食品中总柔的测定方法。本标准适用于各类食品中总柔的测定。GB/T 5009.17-2003 原子荧光光谱分析法z检出限O.15g/kg.标准曲线最佳线性范围。g/L60g/L;冷原子吸收法的检出限z压力消解法为0.4g/kg.其他消解法为10g/kg;比色法为25g/kg.第一法原子荧光光谱分析法2 原理试样经酸加热消解后，在酸性介质中，试样中乘被砌氢化例(KBH，)或棚氢化销(NaBH，)还原成原子态隶，由载气(氧气)带人原子化器中，在特制示空心阴极灯照射下，基态隶原子被激发至高能态，在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与录含量成正比，与标准系
5、列比较定量。3 试剂3. 1 硝酸(优级纯)。3.2 30 %过氧化氢。3.3 硫酸(优级纯)。3.4 硫酸十硝酸+水0+1十8)，量取10mL硝酸和10mL硫酸，缓缓倒入80mL水中，冷却后小心混匀。3.5 硝酸溶液o十的g量取50mL硝酸，缓缓倒入450mL水中，混匀。3.6 氢氧化饵溶液(5g/L)，称取5.0g氢氧化饵，溶于水中，稀释至1000 mL.混匀。3. 7棚氢化何溶液(5g/L)，称取5.0 g唰氧化饵，溶于5.0 g/L的氢氧化饵溶液中，并稀释至1 000 mL.混匀，现用现配。3.8 柔标准储备溶液精密称取0.1354g于干燥过的二氯化素，加硫酸+硝酸+水混合酸。+1+8
6、)溶解后移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1mg录。3.9 乘标准使用溶液z用移液管吸取乘标准储备液omg/mL)l mL于100mL容量瓶中，用硝酸溶液。+的稀释至刻度，混匀，此溶液浓度为10g/mL.在分别吸取10g/mL乘标准溶液1mL和5mL 于两个100mL容量瓶中，用硝酸溶液0+的稀释至刻度，混匀，溶液浓度分别为100ng/mL和500 ng/mL.分别用于测定低浓度试样和高浓度试样，制作标准曲线。4 仪器4. 1 双道原子荧光光度计。4.2 高压消解罐(100mL容量)。4.3 微波消解炉。131 GB/T 5009.17-2003 5 分析步骤5.
7、1 试样消解5. 1. 1 离压消解法本方法适用于粮食、豆类、蔬菜、水果、瘦肉类、鱼类、蛋类及乳与乳制品类食品中总柔的测定。5. 1. 1. 1 粮食及豆类等干样z称取经粉碎混匀过40目筛的干样O.2 g1. 00 g.置于聚四氟乙烯塑料内罐中，加5mL硝酸，混匀后放置过夜，再加7mL过氧化氢，盖上内盖放入不锈钢外套中，旋紧密封。然后将消解器放入普通干燥箱(烘箱)中加热，升温至120C后保持恒温2h-3 h.至消解完全，自然冷至室温。将消解液用硝酸溶液。十9)定量转移并定容至25皿L.摇匀。同时做试剂空白试验。待测e5. 1. 1. 2 蔬菜、瘦肉、鱼类及蛋类水分含量高的鲜样用捣碎机打成匀浆，
8、称取匀浆1.00 g5. 00 g.置于聚四氟乙烯塑料内罐中，加盖留缝放于65C鼓风干燥烤箱或一般烤箱中烘至近干，取出，以下按5.1.1.1自加5mL硝酸起依法操作。5. 1. 2 微波消解法称取O.10 g-O. 50 g试样子消解罐中加人1四L5mL硝酸.1mL2 mL过氧化氢，盖好安全阀后，将消解罐放入微波炉消解系统中，根据不同种类的试样设置微波炉消解系统的最佳分析条件(见表1和表2).至消解完全，冷却后用硝酸溶液o十的定量转移并定容至25mL(低含量试样可定容至10 mL).混匀待测。表1粮食、蔬菜、鱼肉类试样微波分析条件步骤l 2 3 功率/c%) 50 75 90 压力/kPa34
9、3 686 1 096 升压时间/min30 30 30 保压时间/mn5 7 5 排风量/C%) 100 100 100 表2油脂、糖类试样微波分析条件步骤1 2 3 4 5 功率/c%)50 70 80 100 100 压力/kPa343 514 686 959 1 234 升压时间/min30 30 30 30 30 保压时间/min5 5 5 7 5 排风量/c%)100 100 100 100 100 5.2 标准系列配制5.2. 1 低浓度标准系列:分别吸取100ng/mL *标准使用液O.25、O.50、1.00、2.00、2.50 mL于25 mL容量瓶中，用硝酸溶液0+的稀释
10、至刻度，混匀。各自相当于求浓度1.00、2.00、4.00、8.00、10.00 ng/mL。此标准系列适用于一般试样测定a5.2.2 高浓度标准系列g分别吸取500ng/mL录标准使用液O.25、O.50、1.00、1.50、2.00mL于25 mL容量瓶中，用硝酸溶液。+9)稀释至刻度，混匀。各自相当于乘浓度5.00、10.00、20.00、30.00、GB/T 5009.17-2003 40.00 ng/mL。此标准系列适用于鱼及含求量偏高的试样测定。5.3 测定5. 3. 1 仪器参考条件g光电倍增管负高压，240V;乘空心阴极灯电流，30mA，原子化器z温度，300C.高度8.0mr
11、川氧气流速g载气500mL/min.屏蔽气1000 mL/ min;测量方式2标准曲线法，读数方式:峰面积，读数延迟时间:1.05;读数时间，10.0S;棚氧化饵溶液加液时间:8. 0 S;标液或样液加液体积22 mL。注，AFS系列原子荧光仪如，230、230a、2202、2202a、2201等仪器属于全自动或断序流动的仪器，都附有丰仪器的操作软件，仪器分析条件应设置本仪器所提示的分析条件，仪器稳定后，测标准系列，至标准曲线的相关系数0.999后测试祥。试样前处理可适用任何型号的原子荧光仪。5.3.2 测定方法:根据情况任选以下一种方法。5. 3. 2. 1 浓度测定方式测量g设定好仪器最佳
12、条件，逐步将炉温升至所需温度后，稳定10min20 min 后开始测量。连续用硝酸溶液。+引进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。转入试样测量，先用硝酸溶液(1十引进样，使读数基本回零，再分别测定试样空白和试样消化液，每测不同的试样前都应清洗进样器。试样测定结果按公式(1)计算。5.3.2.2 仪器自动计算结果方式测量z设定好仪器最佳条件，在试样参数画面输入以下参数s试样质量(g或mL).稀释体积(mL).并选择结果的浓度单位，逐步将炉温升至所需温度，稳定后测量。连续用硝酸溶液(1+9)进样，待读数稳定之后，转入标准系列测量，绘制标准曲线。在转入试样测定之前，再进入空白值测量状
13、态，用试样空白消化液进样，让仪器取其均值作为扣底的空白值。随后即可依法测定试样。测定完毕后，选择打印报告即可将测定结果自动打印。6 结果计算试样中柔的含量按式(1)进行计算。AU nu-AU nu-nu -nu l -1 一-x v一-AU 一)一。-IC- -m (-X . ( 1 ) 式中-X 试样中柔的含量，单位为毫克每千克或毫克每升(mg/kg或mg/U;c 试样消化液中柔的含量，单位为纳克每毫升(ng/mL); co-试剂空白液中柔的含量，单位为纳克每毫升(ng/mL); V 试样消化液总体积，单位为毫升(mL); m 试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。计算结果保留三位有效
14、数字。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。第二法冷原子吸收光谱法8 原理录蒸气对波长253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用。试样经过酸消解或催化酸消解使柔转为离子状态，在强酸性介质中以氯化亚锡还原成元素柔，以氮气或干燥空气作为载体，将元素乘吹入柔测定仪，进行冷原子吸收测定，在一定浓度范围其吸收值与*含量成正比，与标准系列比较定量。133 GB/T 5009.17一20039 试剂9. 1 硝酸。9.2 盐酸。9.3 过氧化氢(30%)。(一)压力消解法9.4 硝酸(0.5十99.5) :取0.5mL硝酸慢慢加入50mL水中，然后加水稀释至100
15、mL。9.5 高锺酸饵溶液(50g/L) :称取5.0g高锺酸饵置于100mL棕色瓶中，以水溶解稀释至100mLo 9.6 硝酸-重格酸饵溶液g称取0.05g重错酸梆溶于水中，加入5mL硝酸，用水稀释至100mL。9.7 氯化亚锡溶液(100g/L):称取10g氯化亚锡溶于20mL盐酸中.以水稀释至100mL，临用时现配。9.8 无水氯化钙。9.9 柔标准储备液g准确称取0.1354 g经干燥器干燥过的二氧化乘溶于硝酸重错酸饵溶液中，移人100 mL容量瓶中，以硝酸-重错酸饵溶液稀释至刻度。混匀。此溶液每毫升含1.0 mg录。9. 10 录标准使用液z由1.0 mg/mL录标准储备液经硝酸重错
16、酸饵溶液稀释成2.0 ng/mL. 4.0 ng/mL, 6. 0 ng/mL, 8. 0 ng/mL, 10. 0 ng/mL的录标准使用液。临用时现配。10 仪器所用玻璃仪器均需以硝酸。十日浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。10. 1 双光束测录仪(附气体循环泵、气体干燥装置、乘蒸气发生装置及录蒸气吸收瓶)。10.2 恒温干燥箱。10.3 压力消解器、压力消解罐或压力溶弹，11 分析步骤11. 1 试样预处理11.1. 1 在采祥和制备过程中，应注意不使试样污染。11.1. 2 粮食、豆类去杂质后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。11.1. 3 蔬菜、水果、鱼类、肉
17、类及蛋类等水分含量高的鲜样用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。11. 2 试样消解(可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解)压力消解罐消解法:称取1.00 g-3. 00 g试样(干样、含脂肪高的试样1.00 g，鲜样3.00g或按压力消解罐使用说明书称取试样子聚四氟乙烯内罐，加硝酸2mL-4 mL浸泡过夜。再加过氧化氢(30%)2 mL-3 mL(总量不能超过罐容积的二分之一)。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，1200C 1400C保持3h-4 h，在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗人或过滤入(视消化后试样的盐分而定)10.0mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐
18、，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用;同时作试剂空白。11. 3 测定11. 3. 1 仪器条件=打开测隶仪，预热1h2 h，并将仪器性能调至最佳状态。11. 3.2 标准曲线绘制:吸取上面配制的乘标准使用液2.0，4.0，6.0、8.0、10.0ng/mL各5.0mL(相当于10.0ng、20.0ng、30.0 ng、40.0ng、50.0ng)置于测隶仪的家蒸气发生器的还原瓶中，分别加入1. 0 mL还原剂氯化亚锡000g/L)，迅速盖紧瓶塞，随后有气泡产生，从仪器渎数显示的最高点1月l得其吸收值.然后，打开吸收瓶t的二通阀将产生的乘蒸气吸收于高锤酸梆溶液(50g/L)中，待测乘仪上
19、的读数达到零点时进行下一次测定。并求得吸光值与录质量关系的一元线性回归方程。134 GB/T 5009.17-2003 11. 3. 3 试样测定:分别吸取样液和试剂空白液各5.0mL置于测乘仪的乘蒸气发生器的还原瓶中，以下按11.3. 2自分别加入1.0 mL还原剂氯化亚锡. 起进行回将所测得其吸收值，代人标准系列的一元线性回归方程中求得样液中乘含量。12 结果计算试样中求含量按式(2)进行计算。式中gx = (A , - A,) X (V, /V2) X 1 000 -m X 1000 X 试样中求含量，单位为微克每千克或微克每升(g/kg或用/L), A，一一测定试样消化液中求质量，单位
20、纳克(ng), A2一一试剂空白液中乘质量，单位纳克(ng)，V，一一试样消化液总体积，单位为毫升(mL), V2一一一测定用试样消化液体积，单位为毫升(mL), m一一试样质量或体积，单位为克或毫升(g或mL)。计算结果保留两位有效数字。13 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。14试剂14. 1 硝酸。14.2 硫酸。(二)其他消化法( 2 ) 14.3 氯化亚锡溶液(300g/L) ，称取30g氯化亚锡(SnCl， 2H20)，加少量水，并加2mL硫酸使溶解后，加水稀释至100mL，放置冰箱保存。14.4 元水氯化钙:干燥用。14.5 混合酸。
21、+1+的z量取10mL硫酸，再加入10mL硝酸，慢慢倒人50mL水中，冷后加水稀释至100 mL 14.6 五氧化二饥。14.7 高锺酸御溶液(50g/L) ，配好后煮沸10min，静置过夜，过滤，贮于棕色瓶中。14. 8 盐酸经胶溶液(200g/Ll。14. 9 录标准储备溶液准确称取O.135 4 g于干燥器干燥过的二氯化素，加混合酸0+1+8)溶解后移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1.0 mg示。14. 10 示标准使用液z吸取1.0 mL录标准储备溶液，置于100mL容量瓶中，加混合酸。+1+8)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0用录。再吸取此液1.0
22、 mL置100mL容量瓶中，加混合酸(1十1+8)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.10吨隶，临用时现配。15 仪器15. 1 消化装置。15.2 测录仪，附气体干燥和抽气装置。15.3 乘蒸气发生器，见图1.135 GB/T 5009.17-2003 图160 mL 量蒸气发生器16 分析步骤16. 1 试样消化16. 1. 1 固派消化法16. 1. 1.1 粮食或水分少的食品称取10.00g试样，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加45mL 硝酸、10mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后，加热回流2h.如加热过程中溶液变棕色，再加5
23、mL硝酸，继续回流2h，放冷后从冷凝管上端小心加20mL水，继续加热回流10min.放冷，用适量水冲洗冷凝管，洗液并入消化液中，将消化液经玻璃棉过滤于100mL容量瓶内，用少量水洗锥形瓶、滤器，洗液并人容量瓶内，加水至刻度，混匀。按同一方法做试剂空白试验。16. 1. 1.2 植物油及动物油脂.称取5.00g试样，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加入7mL硫酸，小心混匀至溶液颜色变为棕色，然后加40mL硝酸，装上冷凝管后，以下按16.1.1.1自小火加热.起依法操作。16.1. 1. 3 薯类、豆制品:称取20.00g捣碎混匀的试样(薯类须预先洗净晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒
24、及30mL硝酸、5mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按16.1.1.1自小火加热起依法操作。16. 1.1. 4 肉、蛋类2称取10.00g捣碎混匀的试样，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30mL硝酸、5mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按16.1.1.1自小火加热.起依法操作。16. 1.1. 5 牛乳及乳制品s称取20.00 g牛乳或酸牛乳，或相当于20.00 g牛乳的乳制品(2.4g全脂乳粉、8g甜炼乳，5g淡炼乳)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30mL硝酸，牛乳或酸牛乳加10 mL硫酸，乳制品加5mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝
25、管后，以下按16.1.1.1自小火加热起依法操作。16. 1. 2 五氧化二饥消化法本法适用于水产品、蔬菜、水果。16. 1. 2.1 取可食部分，洗净，晾干，切碎，混匀。取2.50g水产品或10.00g蔬菜、水果，置于50mL100 mL锥形瓶中，加50mg五氧化工饥粉末，再加8mL硝酸，振摇，放置4h，加5mL硫酸，混匀，然后移至140C砂浴上加热，开始作用较猛烈，以后渐渐缓慢，待瓶口基本上元棕色气体逸出时，用少量水冲136 GB/T 5009.17-2003 洗瓶口，再加热5min，放冷，加5mL高健酸饵溶液(50g/L).放置4h(或过夜)，滴加盐酸楚胶溶液(200 g/L)使紫色褪去
26、，振摇，放置数分钟，移人容量瓶中，并稀释至刻度。蔬菜、水果为25mL，水产品为100mL. 16. 1. 2. 2 按同一方法进行试剂空白试验。16.2 测定16. 2. 1 用回流消化法制备的试样消化液16.2. 1. 1 吸取10.0mL试样消化液，置于柔蒸气发生器内，连接抽气装置，沿壁迅速加入3mL氯化亚锡溶液(300g/L)，立即通过流速为1.0 L/min的氮气或经活性炭处理的空气，便乘蒸气经过氯化钙干燥管进入测柔仪中，读取测柔仪上最大读数，同时做试剂空白试验。16.2. 1. 2 吸取0、O.10、O.20、O.30、O.40、0.50mL隶标准使用液(相当O.O. 01、O.02
27、、O.03、O.04、0.05昭示)，置于试管中，各加10mL混合酸(1十1+8)，以下按16.2.1.1自置于录蒸气发生器内起依法操作，绘制标准曲线。16.2.2 用五氧化二饥消化法制备的试样消化液16. 2. 2. 1 吸取10.0mL试样消化液，以下按16.2.1.1的方法操作。16.2.2.2 吸取0.1.0.2. 0.3. 0、4.0、5.0mL柔标准使用液(相当0、O.1、0.2、O.3、0.4、O.5g录).置于6个50mL容量瓶中，各加1mL硫酸。+1)、1mL高健酸饵溶液(50g/L)，加20mL水，混匀，滴加盐酸经胶溶液(200g/L)使紫色褪去，加水至刻度混匀，分别吸取1
28、0.0mL(相当0、0.02、0.04、0.06、0.08、O.10附录).以下按16.2.1.1自置于乘蒸气发生器内起依法操作，绘制标准曲线。17 结果计算试样中录的含量按式(3)进行计算。式中zX -(A , - A ,) X 1 000 m X (V, /V,) X 1 000 x一一试样中柔的含量，单位为毫克每千克(mg/kg), A, 测定用试样消化液中录的质量，单位为微克(g), A 试剂空白液中柔的质量，单位为微克(J1.g), m 试样质量，单位为克(g), V , 试样消化液总体积，单位为毫升(mL), V, 测定用试样消化液体积，单位为毫升(mL)。计算结果保留两位有效数字
29、。18 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。第二法二硫踪比色法19 原理( 3 ) 试样经消化后，柔离子在酸性溶液中可与二硫踪生成橙红色络合物，溶于三氯甲烧，与标准系列比较定量。20 试剂20. 1 硝酸。137 GB/T 5009.17-2003 20.2 硫酸。20.3 氨水。20.4 三氯甲位:不应含有氧化物。20.5 硫酸。+35):量取5mL硫酸，缓缓倒入150mL水中，冷后加水至180mL. 20.6 硫酸(1+19):量取5mL硫酸，缓缓倒入水中，冷后加水至100mL。20. 7 盐酸瓷胶溶液(200g/L):吹清洁空气，除去溶液中含有
30、的微量录。20.8 澳蹲香草酸蓝乙醇指示液(1g/L)。20.9 二硫腺-三氯甲烧溶液(0.5g/L) .保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。称取0.5g研细的二硫踪，溶于50mL三氯甲烧中，如不全溶，可用滤纸过滤于250mL分液漏斗中，用氨水(1十99)提取三次，每次100mL.将提取液用棉花过滤至500mL分液漏斗中，用盐酸。+1)调至酸性，将沉淀出的二硫踪用三氯甲统提取2次3次，每次20mL.合并三氯甲烧层，用等量水洗涤两次，弃去洗涤液，在50C水浴上蒸去三氯甲烧。精制的二硫踪置硫酸干燥器中，干燥备用，或将沉淀出的二硫踪用200、200、100mL三氯甲炕提取三次，合并三氯甲烧层为二硫踪溶
31、液。20. 10 二硫踪使用液z吸取1.0 mL二硫踪溶液，加三氯甲烧至10mL.混匀。用1cm比色杯，以三氯甲统调节零点，于波长510nm处测吸光度(A)用式(4)算出配制100mL二硫踪使用液(70%透光率)所需二硫腺溶液的毫升数(v)。v=旦产1旦=lfH .( 4 ) 20. 11 柔标准溶液=准确称取O.135 4 g经干燥器干燥过的二氯化隶，加硫酸。+35)使其溶解后，移人100mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0 mg柔。20. 12 柔标准使用液s吸取1.0 mL乘标准溶液，置于100mL容量瓶中，加硫酸。+35)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0吨录。再吸
32、取此液5.0mL于50mL容量瓶中，加硫酸。十35)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0g录。21 仪器21. 1 消化装置。2 1. 2 可见分光光度计a22 分析步骤22. 1 试样消化22. 1. 1 粮食或水分少的食品2称取20.00 g试样，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及80mL硝酸、15mL硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后加热回流2h。如加热过程中溶液变棕色，再加5mL硝酸，继续回流2h.放冷，用适量水洗涤冷凝管，洗液并入消化液中，取下锥形瓶，加水至总体积为150mL.按同一方法做试剂空白试验。22. 1. 2 植物油及
33、动物油脂g称取10.00g试样，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及15mL硫酸，小心混匀至溶液变棕色，然后加入45mL硝酸，装上冷凝管后，以下按22.1. 1自小火加热起依法操作。22. 1. 3 蔬菜、水果、薯类、豆制品z称取50.00 g捣碎、混匀的试样(豆制品直接取样，其他试样取可食部分洗净、晾干).置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45mL硝酸、15mL硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按22.1. 1自小火加热起依法操作。22. 1. 4 肉、蛋、水产品z称取20.00g捣碎混匀试样，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45mL 硝酸、15mL硫酸，装上冷凝管后，
34、以下按21.1. 1自小火加热起依法操作。22. 1. 5 牛乳及乳制品:称取50.00 g牛乳、酸牛乳，或相当于50.00 g牛乳的乳制品(6g全脂乳粉，138 GB/T 5009.17-2003 20 g甜炼乳，12.5 g淡炼乳)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45mL硝酸，牛乳、酸牛乳加15 mL硫酸，乳制品加10mL硫酸，装上冷凝管，以下按22.1. 1自小火加热. 起依法操作。22.2 测定22. 2. 1 取21.1.121.1. 5消化液(全量)，加20mL水，在电炉上煮沸10min，除去二氧化氮等，放冷。22.2.2 于试样消化液及试剂空白液中各加高锺酸钢溶液(50g/
35、L)至溶液呈紫色，然后再加盐酸楚胶溶液(200g/L)使紫色褪去，加2滴廓香草盼蓝指示液，用氨水调节pH，使橙红色变为橙黄色(pH12)。定量转移至125mL分液漏斗中。22.2.3 吸取0、O.5、1.0、2.0，3.0，4.0，5.0、6.0L乘标准使用液(相当于0、O.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5. 0、6.0昭示)，分别置于125mL分液漏斗中，加10mL硫酸。+19)，再加水至40mL，混匀。再各加1 mL盐酸楚胶溶液(200g/U，放置20min，并时时振摇。22.2.4 于试样消化液、试剂空白液及标准液振摇放冷后的分液漏斗中加5.0mL二硫踪使用液，剧烈振摇2min，静
36、置分层后，经脱脂棉将三氯甲烧层滤人1cm比色杯中，以三氯甲烧调节零点，在波长490 nm处测吸光度，标准管吸光度减去零管吸光度，绘制标准曲线。23 结果计算试样中柔的含量按式(5)进行计算。式中zX(AIA2) 1000 一m X 1000 X 试样中柔的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); A 试样消化液中求的质量，单位为微克(p.g); A2 试剂空白液中录的质量，单位为微克(g);m一一试样质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。24 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。甲基柔的测定25范围本标准规定了水产品中甲基柔的测定方法。本标准
37、适用于水产品中甲基柔的测定。气相色谱法(酸提取琉基棉法)26 原理. ( 5 ) 试样中的甲基隶，用氯化销研磨后加入含有Cu2+的盐酸0+11) , (Cu2+与组织中结合的CH，Hg交换)完全萃取后，经离心或过滤，将上清液调试至一定的酸度，用疏基棉吸附，再用盐酸0+5)洗脱，最后以苯萃取甲基束，用带电子捕获鉴定器的气相色谱仪分析。27试剂27. 1 氯化纳。139 GB/T 5009.17-2003 27.2 苯z色谱上元杂峰，否则应重蒸馆纯化。27.3 无水硫酸销用苯提取，浓缩液在色谱上无杂峰。27.4 盐酸0+5)取优级纯盐酸，加等体积水，恒沸蒸馈，蒸出盐酸为o十1)，稀释配制。27.5
38、 氯化铜溶液(42.5 g/L)。27.6 氢氧化纳溶液(40g/L)，称取40g氢氧化纳加水稀释至1000mL。27.7 盐酸。+11)，取83.3mL盐酸(优级纯)加水稀释至1000 mLo 27.8 淋洗液(pH3.03. 5)用盐酸0+11)调节水的pH为3.03. 50 27.9 疏基棉:在250mL具塞锥形瓶中依次加入35mL乙酸醉，16mL冰乙酸、50mL硫代乙醇酸、0.15 mL硫酸、5mL水，混匀，冷却后，加入14g脱脂棉，不断翻压，使棉花完全浸透，将塞盖好，置于恒温培养箱中，在(37土0日保温4天(注意切勿超过40C)，取出后用水洗至近中性，除去水分后平铺于瓷盘中，再在(3
39、7+0.5)OC恒温箱中烘干，成品放入棕色瓶中，放置冰箱保存备用(使用前，应先测定流基棉对甲基隶的吸附效率为95%以上方可使用)。注2所有试剂用苯萃取，萃取液不应在气相色谱上出现甲基录的峰。27. 10 甲基隶标准溶液2准确称取0.1252g氯化甲基隶，用苯溶解于100mL容量瓶中，加苯稀释至刻度，此溶液每毫升相当于l.0 mg甲基束。放置冰箱保存。27. 11 甲基录标准使用液2吸取l.0 mL甲基柔标准溶液，置于100mL容量瓶中，用苯稀释至刻度。此溶液每毫升相当于10g甲基录。取此溶液l.0 mL，置于100mL容量瓶中，用盐酸。+5)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于O.10g甲基示，临用
40、时新配。27. 12 甲基橙指示液(1g/L)。28 仪器28. 1 气相色谱仪:附63Ni电子捕获鉴定器或1m.源电子捕获检定器。28.2 酸度计。28.3 离心机g带50mL80 mL离心管。28.4 琉基棉管:用内径6mm、长度20cm，一端拉细(内径2mm)的玻璃滴管内装O.1 gO. 15 g疏基棉，均匀填塞，临用现装。28.5 玻璃仪器z均用硝酸。+20)浸泡一昼夜，用水冲洗干净。29 分析步骤29. 1 气相色谱参考条件29. 1. 1 Ni电子捕获鉴定器:柱温1850C，鉴定器温度为2600C，汽化室温度2150C。29. 1. 2 氟源电子捕获鉴定器z柱温185C，鉴定器温度
41、为190C，汽化室温度1850C。29. 1. 3 载气:高纯氮，流量为60mL/min(选择仪器的最佳条件)。29. 1. 4 色谱柱z内径3mm，长l.5m的玻璃柱，内装涂有质量分数为7%的丁二酸乙二醇聚醋(PEGS)或涂质量分数为l.5%的OV-17和l.95%QF-1或质量分数为5%的丁二乙酸二乙二醇酶CDEGS)固定液的60吕80目chromosorbW A WDMCSo 29.2 测定29. 2. 1 称取l.00 g2. 00 g去皮去刺绞碎混匀的鱼肉(称取5g虾仁，研碎)，加入等量氯化纳，在乳钵中研成糊状，加入0.5mL氯化铜溶液(42.5岁L)，轻轻研匀，用30mL盐酸(1十
42、11)分次完全转人100 mL带塞锥形瓶中，剧烈振摇5min，放置30min(也可用振荡器振摇30min) ，样液全部转入50mL 离心管中，用5mL盐酸(1十11)淋洗锥形瓶，洗液与样液合并，离心10min(转速为2000 r/min) ，将上清液全部转入100mL分液漏斗中，于残渣中再加10mL盐酸。十11)，用玻璃棒搅拌均匀后再离心，合并两份离心溶液。140 GB/T 5009.17-2003 29.2.2 加入与盐酸。+11)等量的氢氧化纳溶液(40g/L)中和，加1滴2滴甲基橙指示液，再调至溶液变黄色，然后滴加盐酸。十11)至溶液从黄色变橙色，此溶液的pH在3.O3. 5范围内(可用
43、pH计校正)。29.2.3 将塞有疏基棉的玻璃滴管接在分液漏斗下面，控制流速约为4mL/min5 mL/min;然后用pH3. O3. 5的淋洗液冲洗漏斗和玻璃管，取下玻璃管，用玻璃棒压紧jfrt基棉，用洗耳球将水尽量吹尽，然后加入1mL盐酸。+5)分别洗脱一次，用洗耳球将洗脱液吹尽，收集于10mL具塞比色管中。29.2.4 另取二支10mL具塞比色管，各加入2.0mL甲基柔标准使用液(0.10g/mU。向含有试祥及甲基柔标准使用液的具塞比色管中各加入1.0 mL苯，提取振摇2min，分层后吸出苯液，加少许无水硫酸俐，摇匀，静置，吸取-定量进行气相色谱测定，记录峰高，与标准峰高比较定量。30
44、结果计算试样中甲基隶的含量按式(6)进行计算。nv-nu x- vh-m叫二h一-h-Vm-v x ( 6 ) 式中3X 试样中甲基柔的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); m 甲基录标准量，单位为微克仰自); h, 试样峰高，单位为毫米(mm); V , 试样苯萃取溶剂的总体积，单位为微升(L); V , 测定用试样的体积，单位为微升(L); h, 甲基隶标准峰高，单位为毫米(mm); m2二一试样质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。31 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。冷原子吸收法(酸摄取琉基棉法)32 原理同第26章。但在碱性
45、介质中用调j柔仪测定，与标准系列比较iE量。33试剂33. 1 氯化亚锡溶液(300g/Ll ，称取60g氯化亚锡(SnCl， 2H2 0).加少量水，再加10mL硫酸，加水稀释至200mL.放置冰箱保存。33.2 铜离子稀溶液s称取50g氯化纳.JJ日水溶解，加5mL氯化铜溶液(42.5g/Ll.加50mL盐酸。+1).加水稀释至500mL, 33.3 氢氧化纳溶液(400g/L), 33.4 甲基柔标准液z准确称取0.1252g氯化甲基隶，置于100mL容量瓶中，用少量乙醇溶解，用水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0 mg甲基示，放置冰箱保存。33.5 甲基隶标准使用溶液z吸取1.0 m
46、L甲基乘标准溶液，置于100mL容量瓶中，加少量乙醇，用水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10月甲基隶，再吸取此溶液1.0 mL.置于100mL容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于O.10g甲基来，临用时新配。141 GB/T 5009.17-2003 33.6 其余试剂同第27章。34 仪器34. 1 测乘仪。34.2 pH lt。34.3 离心机2带50mL80 mL离心管。34.4 颈基棉管z同28.4.34.5 玻璃仪器z处理同28.5。35 分析步骤按29.2. 129. 2. 3操作。洗脱液收集在10mL具塞比色管内，补加铜离子稀溶液至10mL再吸取2.0mL此溶液，加铜离子
47、稀溶液至10mL。另取12支10mL具塞比色管，分别加入5mL铜离子稀溶液，然后加入0，0.20.0.40.0.60.0.80.1. 0 mL甲基录标准使用液各两管，各补加铜离子稀溶液至10mL(相当于0、O.020、O.040、O.060、0.080、O.10陆甲基柔。将试样及乘标准溶液分别依次倒入柔蒸气发生器中，加2mL氢氧化锵溶液(400 g/L)、15mL氯化亚锡溶液(300g/L).通气后，记录峰高或记录最大读数，绘制标准曲线比较。36 结果计算试样中甲基柔的含量按式(7)进行计算。式中-X-Am1X 1000 一一一二Xm2 X 1 000 10 X一一试样中甲基隶的含量，单位为毫克每千克(mg/kg); m，一一测定用试样中甲基柔的质量，单位为微克(g); m2一一试样质量，单位为克(g)。计算结果保留两位有效数字。37 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20%。142 ( 7 )
