1、ICS 67120。20B 45中华人民共和国国家标准农业部1025号公告一152008鸡蛋中磺胺喹嗯啉残留检测高效液相色谱法Determination of Sulfaquinoxaline residue in eggby high performance liquid chromatography20080429发布 2008-0429实施中华人民共和国农业部发布前 言本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：山东省畜产品质量检测中心。本标准主要起草人：高迎春、陈玲、冯修光、魏秀丽。农业部1025号公告152008农业部1025号公告一152008
2、鸡蛋中磺胺喹口恶啉残留检测高效液相色谱法1范围本标准规定了鸡蛋中磺胺喹嚷啉残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于鸡蛋中磺胺喹嘿啉残留量的检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。6BT 11 2000标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则(ISOIEC Directives，Part 3，1997，Rules for the structur
3、e and drafting of International Standards，NEQ)GBT 6682分析实验室用水规则和试验方法农业部农牧发E200311号兽药残留试验技术规范(试行)3制样3 1样品的制备取适量新鲜的空白或供试鸡蛋内容物，匀浆使均匀。3 2样品的保存oc4贮存。4测定方法4 1方法提要或原理试样中残留的磺胺喹嚼啉经乙酸乙酯提取，过无水硫酸钠柱净化，流出液浓缩至干，残余物用o015 toolL磷酸溶液一乙腈溶液(1+1)溶解，用高效液相色谱紫外法测定，外标法定量。4 2试剂和材料以下所用试剂，除特别注明外均为分析纯试剂，水为符合GBT 6682规定的二级水。4 2 1磺
4、胺喹嚼啉对照品：含磺胺喹嘿啉(c，H，C。NO)不得少于98O。4 2 2乙腈：色谱纯。4 2 3磷酸。4 2 4乙酸乙酯。4 2 5正己烷。426无水硫酸钠。4 2 7 0015 toolL磷酸溶液：量取磷酸1 mL，用水稀释至1 000 mL。42 8磺胺喹嘿啉标准储备液：取磺胺喹嗯啉对照品约25mg，精密称定，置250mL量瓶中，用乙腈溶解并稀释成浓度为100 gmL的储备液。一20以下保存，有效期为3个月。4 2 9磺胺喹嘿啉标准工作液：精密吸取磺胺喹瞟啉标准储备液10 mL于10 mL量瓶中，用流动相农业部1025号公告一152008稀释成浓度为10 gmI的标准工作液。43仪器与设
5、备4 3 1高效液相色谱仪：(配紫外检测器)。4 3 2天平：感量001 g。4 3 3分析天平；感量0000 01 g。434旋转蒸发仪。4 3 5匀浆机(io ooo rmln)。436漩涡混合器。4 3 7离心机(5 000 rrain)。4 3 8玻璃层析柱：300 mm10 mm，下装G砂芯板。4 3 9微孔滤膜：孔径为o45m有机系滤膜。4 3 10具塞离心管：25mL、50mL。4 4测定步骤4 4 1无水硫酸钠柱的制备称取无水硫酸钠5 g，置入玻璃层析柱中，用约10mL乙酸乙酯淋洗后备用。4 4 2试料的制备试料的制备包括：取均质后的供试样品，作为供试试料；取均质后的空白样品，
6、作为空白试料；取均质后的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试料。443提取称取试料(5o05)g置50 mL离心管中，加入20 mL乙酸乙酯，振摇5 rain，4 000 rmin离心10 min，取上清液过无水硫酸钠柱，收集流出液于鸡心瓶中，残渣再加乙酸乙酯20 mL，重复提取一遍，并用少量乙酸乙酯洗残渣，过无水硫酸钠柱，合并流出液于同一鸡心瓶中，于45旋转蒸发至干。残余物用o015 moIL磷酸溶液乙腈溶液(1+1)10 mL溶解，加入1 mL水饱和正己烷，涡旋30 s，将溶液转移至25 mL离心管中，5 000 rrain离心10 rain，取下层清液，用045 p“微孔滤
7、膜过滤，供高效液相色谱分析。4 4 4标准曲线的制备精密吸取2o mL、10 mL、05 mL、02 mL、01 mL、005 mL、0025 mL磺胺喹嘿啉标准工作液分别于10 mL量瓶中，用流动相稀释成2 gmL、I gmL、05 gmL、02 gmL、01 gmL、005 gmL、0025 gmL的浓度，供高效液相色谱分析。445测定4 4 5 1色谱条件色谱柱：C18柱，150 minX46 mm(id)，粒径5 pm，或相当者；流动相：0015molL磷酸溶液+乙腈(70+30)；柱温：室温；流速：10mLmin；检测波长：270 nm；进样量：20“L。4 4 5 2测定法取适量试
8、样溶液和相应的标准工作液，作单点或多点校正，以色谱峰面积积分值定量。标准工作液2及试样液中磺胺喹嚷啉的响应值均应在仪器检测的线性范围之内。样溶液的液相色谱图见附录A中图A1、图A2。4 46空白试验除不加试料外，采用完全相同的测定步骤进行平行操作。45结果计算和表述按式(1)计算试料中磺胺喹嗯啉的残留量(“gkg)：x一筹农业部1 025号公告一152008在上述色谱条件下，标准溶液和试式中：x试样中磺胺喹嘿啉的残留量，单位为微克每干克(”gkg)；A试样溶液中磺胺喹嚼啉的峰面积；A；对照溶液中磺胺喹嚼啉的峰面积；e对照溶液中磺胺喹嚼啉的浓度，单位为纳克每毫升(ngmL)；M试样的质量，单位为克(g)；v溶解残余物的体积，单位为毫升(mL)。注：计算结果需扣除空白值，测定结果用两次平行测定的算术平均值表示，保留至小数点后两位5检测方法的灵敏度、准确度、精密度5 1灵敏度本方法在鸡蛋中的检测限20 pgkg，定量限为50 pgkg。5 2准确度本方法在50 pgkg200 pgkg添加浓度的回收率为70iIO。5 3精密度本方法的批内相对标准偏差20，批间相对标准偏差20。农业部1025号公告一152008oi o0o附录A(资料性附录)高效液相色谱图图A 1 0 5 gmL磺胺喹口恶啭标准溶液色谱图图A 2鸡蛋中添加100 gkg磺胺喹曙啉色谱图
