1、GB 552285 本标准适用于商品粮食过氧化氢酶活动度的测定。 1 仪器和用具 1.1 恒温水浴锅； 1.2 电炉； 1.3 离心机或吸滤装置； 1.4 锥形瓶：100ml； 1.5 量筒：10、15ml； 1.6 移液管：5、10、20ml； 1.7 研钵； 1.8 滴定管、细口瓶、漏斗等。 2 试剂 2.1 3过氧化氢溶液：取30过氧化氢溶液3ml加水稀释至30ml； 2.2 10硫酸溶液； 2.3 0.1N高锰酸钾溶液； 2.4 pH7.7索伦逊磷酸盐缓冲液： 甲液，称取磷酸氢二钠11.876g溶于1l水中。 乙液，称取磷酸二氢钾9.078g溶于1l水中。 临用时，甲、乙液按91混合。
2、 2.5 石英砂或用干净的玻璃片研制成的细砂。 3 操作方法 3.1 过氧化氢酶的提取：称取试样（能换算成无水试样1g），放入研钵中，加少量细砂，量取缓冲液50ml，先倒出510ml于研钵中研磨试样，然后经漏斗倒入锥形瓶中，用剩余的缓冲液洗净研钵和漏斗，再把洗液倒入锥形瓶内,振摇后静置23h，用吸滤法或离心沉淀法获得透明的提取液。 3.2 酶活动度的测定：摇匀提取液，吸取20ml注入锥形瓶中，加入20ml水和3ml 3过氧化氢溶液，在室温下放置1530min，加入5ml10硫酸溶液，摇匀，用0.1N高锰酸钾溶液滴定剩余的过氧化氢，记下用去的高锰酸钾溶液毫升数（ V1）。 3.3 对照试验：吸取
3、20ml提取液注入锥形瓶中，置于沸水浴中加热5min，或用直接煮沸法页码，1/2GB 5522852006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR552200K.htm破坏过氧化氢酶。加20ml水和3m l3过氧化氢溶液于锥形瓶中，在室温下放置1530min，再加入10硫酸5ml，摇匀，用0.1N高锰酸钾溶液滴定，记下用去的毫升数（ V2）。 4 结果计算 过氧化氢酶活动度按下列公式计算： 双试验结果允许差不超过平均值的10，取平均值为测定结果。测定结果取小数点后第一位。 过氧化氢酶活动度（mgH2O2/1g试样）=（ V2-V1）N17（50/20） 式中： V1酶活动度测定时所用的0.1N高锰酸钾溶液体积，ml；V2对照试验时用去的0.1N高锰酸钾溶液体积，ml；N高锰酸钾溶液当量浓度；17H2O2的毫克当量。页码，2/2GB 5522852006-3-29file:/C:InetpubwwwrootdatagbrR552200K.htm
