1、GB 1 701 5 -1 997 前L口炭瘟(Anthrax)是由炭瘟芽泡杆菌(Bacillusanthracis)引起的一种人与动物共患传染病，主要存在F食草动物和牲畜群落之中，并能造成环境的广泛污染。由于炭瘟芽抱具有对外界环境极强的抵抗力，造成这种污染常持续存在。人类主要通过接触患病的牲畜、进食感染本病的牲畜肉类、吸入含有该菌的气济胶或尘埃，以及接触污染的毛皮等畜产品而罹患本病。本标准规定了炭症病人的诊断标准及诊断后所必须进行的处理原则。本标准的附录A、附录B为标准的附录;附录C及附录D为提示的附录。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准由中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所负责起
2、草。本标准主要起草人2李爱芳、董树林、刘秉阳、俞东征。本标准由卫生部委托技术归口单位中国预防医学科学院负责解释。570 1 范围中华人民共和国国家标准炭瘟诊断标准及处理原则Diagnostic criteria and principles 。rmanagement for anthrax 本标准规定了人炭症的诊断标准及人炭瘟发生后的处理原则。GB 17015-1997 本标准适用于各级、各类医疗保健、卫生防疫机构对人炭殖的诊断及处理。2 定义本标准采用下列定义。2. 1 炭痕由炭瘟主H包杆菌引起的一切J人类感染，其中包括症状不典型的轻型病例。动物炭瘟在本标准中均IJ门指明，如称为炭症病畜等。
3、2.2 就地隔离在诊断地点或家中隔离炭瘟病人。2. 3 感染来源炭瘟病人获得感染的来源。其中包括传染源，指炭瘟病人、病畜或其尸体，以及被炭植穿于包污染的环境及各种物体。3 炭瘟病人的诊断3. 1 诊断依据3. 1. 1 流行病学病人生活在已证实存在炭瘟的地区内，或在发病前14日内到达过该类地区;从字与毛皮等畜产品密切接触的职业$接触过可疑的病、死动物或其残骸，食用过可疑的病、死动物肉类或其制品;在可能被炭瘟芽抱杆菌污染的地区从古耕耘或挖掘等操作，均应作为流行病学线索。3. 1. 2 临床表现3- 1.2.1 体表感染型(皮肤)炭瘟2在面、颈、手或前臂等暴露部位的皮肤出现红斑、丘咳、水也.周罔组
4、织肿胀及浸润，继而中央坏死形成溃窃性黑色焦癫，焦癫周围皮肤发红，肿胀，疼痛不显著。引流l交部忱的淋巴结肿大且常化胀，伴有发热、头痛、关节痛等。少数严重病例，局部呈大片水肿和坏死。3.1.2.2 经口感染型肠)炭瘟z急性起病.发热，腹胀，剧烈疼痛，腹泻，通常为血样便或血水样便。可11恶心、日在吐，呕吐物中含血丝及胆汁。可累及消化道以外系统。3.1.2.3 吸入感染型(肺)炭痕:高热，呼吸困难.可有胸痛及咳嗽，咯粘液血痰。肺部体征常只有散在的细湿罗音。X射线的主要表现为纵踊影增宽。常见胸腔积液。3.1.2.4 脑膜炎引决瘟:可继发于3.1. 2. 1 3. 1. 2. 3各型.也可能直接发生。剧烈
5、头痛.U. III:. J呢?f1.继而出现讼妄、昏迷、呼吸衰竭，脑脊液多为血性。国家技术监督局1997-10-06批准1998-10-01实施GB 170151997 3- 1.2.5 炭瘟败血症可继发于3.1.2.13.1. 2. 3各型，也可能直接发生。严重的全身中毒症状，高热、寒战，感染性休克与弥漫性血管内凝血(DIC)表现，皮肤出现出血点或大片淤斑，腔道中出现活动性出血，迅速出现呼吸与循环衰竭。在循环血液中可检出大量炭症芽抱杆菌。3. 1. 3 实验室检奇结果3.1. 3- 1 皮肤损害的分泌物，痰、呕吐物、排泄物.或血液、脑脊液等标本中，显微镜检查发现炭瘟芽泡杆菌。3- 1.3.2
6、 细菌分离培养获炭瘟芽泡杆菌(详见附录A)。3.1. 3- 3 血清抗炭瘟特异性抗体滴度出现4倍或4倍以上升高(详见附录Bl。3- 2 诊断3. 2. 1 疑似诊断具有3.1.2.1典型皮肤损害，或具有3.1. 1流行病学线索，并具有3.1.2. 23. 1. 2. 5的临床表现之音。3. 2. 2 临床诊断具有3.1.3.1的镜检结果及3.1. 2. 1 3. 1. 2. 5的临床表现之一者。3- 2. 3 确定诊断获得3.1.3.2或3.1.3.3任何项实验结果。4 炭瘟病人处理原则4. 1 隔离炭瘟病人由做出疑似诊断时起，即应隔离治疗。原则上应就地隔离，避免长距离运送病人。4. 2 治疗
7、治疗开始前，首先采取标本以备确定诊断。以抗生素治疗为基础，同时采取以抗休克、抗DIC为主的疗法，并根据情况辅以适当的对症治疗(详见附录。4.3 病人污染环境消毒病人的废弃物品必须焚毁，所有受到污染的物品也尽可能焚毁。污染的环境和不能焚毁的物品使用有效厅法消毒(详见附录D)。病人出院或死亡后，病人所处的环堤应行终末消毒。4.4 病人尸体处理炭症病人死亡后，其口、鼻、JII门等腔道开口均应用含挝消毒剂浸泡的棉花或纱布塞紧.尸体用消毒剂浸泡的床单包搓，然后火化。5 感染来源的确定与处理病人被确诊患炭瘟后，均应尽力确定其感染来源，并加以适当的处理，以避免继续发生感染。5. 1 采集流行病学资料楼诊疑似
8、炭瘟的病人时，须尽可能地询问其发病前的接触史，从而发现可疑的感染来源。5. 2 确定感染来源对可疑的感染来源应采样进行细菌学检验，以确定是否确为炭瘟芽抱杆菌污染。在动物组织标本巾，镜检发现炭殖芽抱杆菌;或在各种来源的标本中分离培养获得炭瘟芽抱杆菌，可以确定为感染的来源。5. 3 感染来源的处理原则对己确定的感染来源，进行以下处理za)隔离与治疗病人g572 GB 17015-1997 b)处死或隔离治疗病畜;c)消毒炭瘟芽抱杆菌污染的物体和环统号d)对在污染地区内或其周围活动的所有牲畜实施免疫接种，每年早春进行一次。、，、A1 标本的采取A 1.1 采取标本时必须遵循的两条原则GB 1701
9、5 1997 附录A(标准的附录炭瘟细菌学检查A1.1.1 尽司能在抗生素治疗开始前采取标本。A1.1.2 除必霎时并在具备操作病毒细菌条件的实验室内.不得用解剖的方式获取标本。所需的血液与组织标本，均应以穿和l方式取得。A 1.2 血液标本所有的疑似人类病例和病畜，都应采取血液标本，标本量至少应满足下列检查的需要za)涂片进行显微镜检查，b)接种培养基进行细菌分离培养;c)分离血清检查抗体:d)常规血液检查。A 1.3 粪便亏呕吐物标本表现消化道症状的叮疑病人收集粪便或呕吐物标本，特别注意选取其中混有血液的部分，肖元菌容器中。A 1- 4 痰与咳碟标本表现为呼吸道症状的可疑病人应收集其痰液标
10、本，元痰液者，应取供细菌分离培养用的培养基，打开平皿盖肾病人口鼻10cm处g令病人对平皿咳嗽，然后迅速盖立平皿。A 1.5 脑脊液标本表现脑膜剌激症状的病人，腰椎穿和l获取脑脊液，标本量参照Al.Z的要求。A 1.6 尸体标本食草动物死于炭症时，通常会从口、鼻、111门等腔道开I1VIt出血液，这种血液应是首先采取的标本。如果血液己渗入土壤，则应收集混有血液的土模作为标本。没有f血液流出，或已不可能获取血液标本时，可通过穿刺心脏获得血液或穿刺肝脏等实质性脏器获得组织标本。A 1.7 肉类标本如果怀疑罹患炭疫的家畜己被宰杀，或对商品肉类进行常规检查时，可剪取小块肉类新l:中;。如有可能，特别应剪
11、取肝脏、脾脏等富含血液以及含淋巴组织的标本。A 1.8 毛皮或其他可疑污染物品标本剪取小块毛皮或其他可疑物品，剪碎置无菌试管内，加适量无菌生理盐水浸泡。A1.9 ;K标牛二检查水体污染时，用广口瓶收集水样。如须取深层水样时.将带盖广口瓶伸入水中.然后将用绳系住的瓶盖提起nA 1. 10 土壤标本在牲畜死亡或宰杀的地点，应取士楼标本以供检查。A2 显微镜检查所有来自病人、病畜或尸体的标本.都应首先进行显微镜检查。A2.1 复合负染法GB 17015-1997 将标本或悬液滴在载玻片上，立即加等量的炭素理水.混匀推片。待干燥后滴加95%乙醇数淌干燥后再以1%结晶紫液染1min，用水冲洗，干后用油镜
12、检查。如果发现在细菌与提素颗粒之间布在明显的、连续的间隔带，即说明细菌的周围存在英膜。液体标本(如血液、脑脊液)和悬液标本(如粪便或1昆有血液的土填)在能够采取标本后在即迦行!w微镜检查的情况下，推荐使用复合负染法。A2.2 英膜染色法将标卒涂片或印片干燥，妥善包装后带回实验室，按常规方法固定，以美蓝染液染色35min(n 英膜不清晰，染色时间可稍延长).7洗、干后镜检。菌体呈蓝色.而英膜呈红色。组织印片标本，或制片后无法立即进行显微镜检查，或进行大面积普查时，推荐使用英膜染色法。A2.3 显微镜检查结果判定来自病人、病畜或尸体的标本中如发现由较宽的英膜环绕的、两端平齐的粗大杆菌，特别是镜下发
13、现大量、纯一通常呈竹节状的该种细菌，而且没有明显的真他细菌污染时.炭瘟的诊断便吁确立。A3 细菌分离培养A1中所列的全部标本，均应进行细菌分离培养。A 3.1 培养基炭症芽但杆菌的分离培养应同时用两种培养基进行常规的血琼脂平板和选择性平板。后者按切F处方配制:蛋白防、iA化纳酵母浸ff粉2g Q. 5日Q.5 g EDTA 乙酸亚铠水杨素0.03日O. 004日1 g 0.2%澳!烧香草阶蓝(町、日)1.2 mL 琼脂粉1. 8 g 加j蒸惚水至100mL.调pH军7.6.121C灭菌20min.冷却至45 50 (时.加入事粘南京B(3 ()OO u/mL水溶液)0.1mL.溶菌酶(3000
14、0u/mL水溶液)0.1mL.混匀后倾注平板。Al2 标本处理在正常情况下所4元菌的标本，如血液或脑脊液.直接涂布上述两种平板.每平板O.1 mL.组织标本应先以元菌剪刀剪开断面.在培养基表面压印.然后以白金耳涂开。所有污染的和1陈旧的标本.均应首先制成悬液。根据标本中含菌茧的多少，叮将悬液适当稀将或经自然沉淀除去粗大沉淀物后，再3000 r /min离心30min.取富集的沉淀物。将所得的悬液67C加l热UffiLD.冷却后涂布上述两种平板，每平板0.1mL Al3 挑选可疑陶格k述平板在37(孵育过夜或24h后.检查是否长出可疑的炭瘟芽泡杆茵茵落。炭症芽J包杆菌在血琼脂平板上的形态为.灰白
15、色、不透明、中等大小.常不规则.表面呈毛玻璃样.周围无溶ll环。决痕芽于包杆菌在选择平板上菌落较血琼脂平板上为小，具有类似表面特征，菌落呈蓝绿色。但是.若jE商落形态与以主描述完全一致但呈黄色的菌落.也应进行A4的鉴定步骤。A4 炭瘟芽抱杆菌鉴定将u.主iJ疑菌藩挑出.划线接种于普通营养琼脂平极之上，在划线区内分别贴七浸有诊断丹!炭也茅于包中I菌噬菌体相青霉素的纸片。37C孵育过夜或24h后，在两种纸片的周围均出现明显的仰菌町、.便可判定为炭瘟芽抱杆菌。在病人、病畜或尸体中分离获得炭植芽也杆菌，炭瘟的诊断便可确注。S 7 ,) 81 标本的采取G8 17015-1997 附录B(标准的附录炭瘟
16、血清学检查在不具备细菌学检验条件时，或者发现可疑的炭瘟病人时，病人已经接受了抗生素治疗的条件下，可依据血清学检验结果确定对病人的追溯诊断。由于诊断必须由双份血清做出，需要特别强调急性期血清的采取。首份血清应在首次检视病人时采取，通常应次采取血液标本供涂片镜检，细菌分离培养，血清学检查及常规的血液检查使用。血清分离后宣4C保存.待获得恢复期血清后.一同进行抗体检查。恢复期血清应在发病后15日左右采取。82 酶联免疫吸附试验(ELISA)采用酶联免疫吸附试验来检测病人血液内针对炭瘟芽抱杆菌保护性抗原的抗体，试验方法如fo82.1 滴定板包被炭痕芽饱杆菌的保护性抗原以0.05mol/L碳酸盐缓冲液(
17、pH9.6)稀释歪3050mg/mL，加至滴定极孔巾，每孔。.1mL.4C18 ho次日倾去抗原液，用。.5mol/L盐水洗板2次。82.2 待检血清待检血清以含0.05%牛血清臼蛋白的0.01mol/L PBS(pH7. 2)倍比稀释，每孔O.1 mL，白37C 1 h.倾去血清.以0.5mol/L盐水洗板3次。82.3 祸联酶标记使用辣根过氧化物酶标记的羊(兔)抗人IgG.或该酶标记的葡萄球菌A蛋白检验已与上述抗原结合的IgG抗体。每孔加0.1mL. 37 C温育40min，倾去标记液.以0.5mol/L盐水洗板5次。82.4 显包每.fLr)JD入0.1mL底物液，底物液应在l恼用时按以
18、下配方自己制20.1 mol/L拧核酸0.2 mol/L磷酸氢二纳邻苯工胶蒸馆水2.43 mL 2.57 mL 4 mg 5 mL 30%过氧化氢15 mL 37 C 20 min后，每孔加2mol/L硫酸1滴终止反应。82.5 结果判断实验结果口I用酶标仪判读，被检孔OD值达阴性血清对照fLOD值的2.1倍时，始可判为阳性。在没有酶标仪的情况f，也可用目测判读，被检孔显示与阴性对照孔具有明显区别的黄褐色时，始判为阳陀。17川Cl 开始治疗GB17015-1997 附录C(提示的附录)炭瘟病人的治疗从做出疑似炭症的诊断开始就应当按照炭症进行治疗，治疗开始时应做到如F两点。Cl. 1 采取标本.
19、以备确定诊断。Cl.2 建立并保持通畅的静脉进路以备采取有效的抢救情施。C2 抗菌治疗C2.1 青霉素G为首选抗生素。成人一般剂量为160万320万u.分24次肌注。肺炭瘟、败血症刑决痕或脑膜炎型炭痕的病人，剂量增至每日1000万u以上.并行静脉滴注。C2.2 不能使用青霉素的病人，或万一出现耐青霉素菌株.首先考虑采用再霉素或大环内醋类优生素.然后根据抗尘素敏感试验的结果，选取有效抗生素进行治疗。C2.3 皮肤炭瘟患部可外敷红霉素或金霉素软膏.严禁切开引流或切除，也不可挤压。C3 抗休克与DIC治疗C3.1 扩容2炭症病人通常伴有高热，般均需从静脉补充液体，出现休克与弥漫性血管内凝血迹象时.!
20、J!tJ应及早足.fil:扩容。通常使用晶体液、血浆及低分子有旋糖背.必要时补充新鲜全血。在扩容的同时.J注意纠正酸中毒及电解质平衡紊乱。CJ, 2 血管活性药物应根据病人的具体情况，慎重使用。CJ, 3 危重病人在有效抗生素的控制之下，可以短期使用中等剂量的肾t腺皮质激素。CJ, 4 出现弥漫性血管内凝血时，在监视凝血时间的条件下.给予府素及潘生丁。C4 预防心功能不全炭症毒素具有杀伤细胞的作用，重症炭瘟病人应及早考虑预防心功能不全，优先考虑预防性给F快速强心制1ftj毒毛旋花子ll或毛花试丙。C5 使用炭瘟抗毒素l市iJ-般均已不再使用。但在中毒症状明显的危重病人.在能获得供应的条件下，也
21、可考虑使用。但应先作皮试以避免过敏反应。C6 其他对症及支持治疗问般伴有高热的传染病。7 GB 17015一1997附录D(提示的附录)炭瘟病畜及受到炭瘟芽抱杆菌污染的畜产品及环境的处理01 炭瘟病畜处理具有重大经济价值的家畜或受保护的野生动物应严加隔离并由专人饲养治疗。一般家畜应以不流血的方式处死，尸体经表面消毒处理后火化。02 炭瘟动物尸体处理严禁剥皮食用死于炭瘟的牲畜.畜尸应按处理死于炭痕的人类尸体的方式完整地火化，不得肢解。若死于炭痕的动物己被宰杀，贝IJ须将畜尸的剩余部分尽可能地搜集完全并焚毁。03 炭瘟芽抱污染的消毒0 3. 1 炭瘟病人和牲畜的排出物消毒炭瘟病人和牲畜的排出物宜使
22、用新配制的含氯消毒剂乳液消毒，可使用二倍量的20%漂白粉，或6%次氯酸钙(漂粉精)与排出物混合，作用12h后再行处理。0 3. 2 污染表面消毒污染物体的坚固表面，如墙面、地面，家具等，可喷雾或擦洗消毒。可用含氯消毒剂如5%10%二氯异锐尿酸纳(优氯净)或氧化剂如2%过氧乙酸(每平方米表面8mLlo03.3 污染毛皮、衣物或纺织品消毒i价值的污染物品应尽可能焚毁，可耐高压消毒者可用高压灭菌器灭菌，无法用高压处理者，可装入密闭的塑料袋内，每立方米加入50g封、氧乙烧消毒。0 3. 4 污染水体消毒被当K瘟芽于包污染的水源应停止使用，使用含氯消毒剂使有效氯浓度达200mg/L.待检查不再存在炭症芽
23、抱杆菌后方可恢复使用。3.5 污染上壤消毒土耳是被炭瘟芽于包污染时应首先查明污染的范围，被污染的土地应避免耕耘、开挖和用于放牧牲畜。士壤表面的污染可按03.2处理。如果炭症芽饱污染已渗入土壤之中，应使用20%漂白粉液每平方米1000 mL.待漂白粉液渗入地面数小时后，将地表土20cm挖起，坑内每平方米撒入漂白粉干粉2040且，再将挖起的土壤与20%漂白粉液充分混合，填入挖出的坑中。证明被炭瘟芽抱杆菌巧染的土地应尽可能移做官用，直至证明己消除了炭殖芽胞杆菌的污染。如果在环境中检出的炭瘟芽泡杆菌均缺失了决定毒力的质粒.03.4和03.5两条的规定可免予执行。3.6病房终末消毒病人出院或死亡，病房应以甲自主羔蒸处理。紧闭门窗后，按0.8kg/m甲醒加热蒸发，次日经通风处理后才能恢复使用。04 消毒效果考核消毒效果必须通过取样进行细菌分离培养确定，连续三次取样，按A3至A5所规定的程序.不能检出具有完整毒力的炭4豆芽抱杆菌时，方可认为已消除了炭瘟芽抱杆菌的污染。578
