1、ICS 67.050 X 04 国家标准国民共和中华人GB/T 20762-2006 畜禽肉中林可霉素、竹桃霉素、红毒素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霆素、吉它霉素、交沙霉素残留量的测定液相色i普-串联质谱法Method for the determination of lincomycin, oleandomycin, erythromycin, tilmicosin , tylosin , clindamycin, spiramycin, kitasamycin and josamycin residues in livestock and poultry muscles一LC-MS
2、-MS method 2007-03-01实施2006-12-31发布发布中华人民共和国国家质量监督检验检瘦总局中国国家标准化管理委员会目E昌本标准的附录A和附录B为资料性附录。本标准由中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局提出。本标准由中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局、山东农业大学。GB/T 20762-2006 本标准主要起草人:庞国芳、王飞、曹彦忠、贾光群、连玉晶、张进杰、李学民、范春林、刘永明、石玉秋。本标准系首次发布的国家标准。I 1 范围畜禽肉中林可霉素、竹桃霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉它毒素
3、、交沙霉素残留量的测定液相色谱，串联质谱法GB/T 20762-2006 本标准规定了牛肉、猪肉、羊肉和鸡肉中林可霉素、竹桃霉素、红毒素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉它霉素和交沙霹素残留量的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于牛肉、猪肉、羊肉和鸡肉中林可霉素、竹桃霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉它霉素和交沙霉素残留量的测定。本标准的方法检出限:林可霉素、竹桃霉素、红霉素、替米考墨、泰乐菌素、克林霉素、螺旋毒素、吉它毒素和交沙毒素均为1.0g/kgo2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修
4、改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 6379. 1 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第1部分z总则与定义CGB/T 6379.1-2004,1S0 5725-1 :1 994 ,IDT) GB/T 6379.2 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度)第2部分:确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法CGB/T6379. 2-. 2004 ,1S0 5725-2:1994 , IDT) GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法CGB/T66
5、82-1992 , neq IS0 3696 :1 987) 3 原理畜禽肉中丸种大环内醋类抗生素(林可毒素、竹桃霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉它霉素和交沙霉素)的残留用乙腊提取，提取液用正己:院去除脂肪后被缩，再用磷酸盐搭液榕解后，经OasisHLB固相萃取柱净化，甲醇洗脱，洗脱被浓缩定容后，供液相色谱币串联质谱法测定，内标法定量。4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为优级纯，水为GB/T6682规定的一级水。4. 1 甲酶:色谱纯。4.2 乙睛:色谱纯。4.3 正己烧:色谱纯。4.4 甲酸债。4.5 磷酸氢二铀。4.6 氢氧化铀。4. 7 氯化铀。1 GB/T
6、20762-2006 4.8 2%氧化铀榕液:称取10.0g氧化纳(4.7)，播解于500mL 7.l50 I 20-50 I 10-20 I :10 允许的最大偏差| 土20I 土25I 土30I 土507.3.3.2 定量测定在仪器最佳工作条件下，以基质标准工作溶液放度为横坐标，以峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线。用基质标准工作梅破的工作曲线对样品进行定量，应使样品溶液中九种大环内醋类抗生素的响应值在仪器测定的线性范围内。在上述色谱条件和质谱条件下，尤种大环内醋类抗生素的参考保留时间见表4，九种大环内醋类抗生素的标准物质多反应监测(MRM)色谱图参见图A.10 表4九种大环内醋捷抗生素参考
7、保留时间被视物名称保留时间/rnin林可霉素6.96 竹桃霉素7.36 红霉素8.06 替米考垦8.36 4 GB/T 20762-2006 表4C续)被测物名称保留时间/min泰乐菌素8.48 克林霉素8.51 螺旋霉素8.67 吉它霉素8.83 交沙霉素9.14 一一7.4 平行试验按试样步骤，对同一试样进行平行试验测定。7.5 空白试验不称取样品，其余均按试样步骤进行。结果计算8 . ( 1 ) AUFAU nuxu nu-HU v-m AZ c-A A-A fiv -X 结果按式(1)计算:式中:X一一试样中被测物残留量，单位为微克每千克(g/kg);Cs一一基质标准工作将液中被视1物
8、的故度，单位为纳克每毫升Cng/mL); A一一试样榕液中被测物的色谱峰面积;As -基质标准工作溶液中被测物的色谱峰面积;Ci -e-i式样榕液中内标物的浓度，单位为纳克每毫升Cng/mU;Csi -基质标准工作溶掖中内标物的浓度，单位为纳克每毫升(口g/mL); Ai一基质标准工作溶液中内标物的色谱峰面积;Ai一一试样溶液中内标物的色谱峰面积;V 一一样液最终定容体积，单位为毫升(mL); m一一试样播液所代表试样的质量，单位为克Cg)。注:计算结果应扣除空白值。精密度9 本标准的精密度数据是按照GB/T6379. 1和GB/T6379.2的规定确定的，其重复性和再现性的值以95%的可信度
9、来计算。9. 1 重复性在重复性实验的条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限r，畜禽肉中九种大环内醋类抗生素含量范围及重复性方程见表5。表5含量范围及重复性和再现性方程被测物名称含量范围/C阳/kg)重复性限r再现性限R林可霉素1. 010. 0 19 1= 1. 094 0 19 m一1.421 4 19 R=O. 933 1 19 m-O. 833 5 竹桃霉素1.010.0 19 1=1. 0632 19 m-1. 4236 R=O. 146 1 m-O. 012 4 红霉素1.010.0 19 1=0. 8820 19 m-1. 3150 19 R= 1. 0196 1
10、9 m-O. 8527 替米考星1. 010. 0 19 1=1. 154 3 19 m一1.456 8 R=O. 1157 m十0.0094 5 GB/T 20762-2006 被测物名称含量范围!问/kg)泰乐菌素1. 0-10. 0 克林霉素1. 0-10. 0 螺旋霉素1. 0-10. 0 吉它霉素1. 0-10. 0 交沙霉素1.0-10.0 注:m为两次测定值的算术平均值。如果差值超过重复性限r.应舍9.2 再现性在再现性实验的条件下，环内醋类抗生素的含量范B 表5(续)重复性限r再现性限R19 r= 1. 113 7 19 m一1.437 3 19 R=1. 3973 19 m一
11、1.195 5 r=0.043 6 m-O. 013 7 IgR=1. 44361gm-1, 1911 19 r= 1. 152 11g m-l, 4711 19 R=O. 993 0 19 m-O. 837 9 19 r=O. 7018 19 m-l. 2580 IgR=l, 01711gm-l, 0072 19 r=O. 997 1 19 m-l. 436 9 19 R=O. 986 5 19 m-O. 797 2 附录A(资料性附录)九种大环内醋类抗生素标准物质多反应监测(MRM)色谱固九种大环内醋类抗生素标准物质多反应监测(MRM)色谱图，见图A.10 2.805 2.585 2.00
12、5 1. 505 1. Oe5 5.0e4 O.。:. 8: i 6.084 4.084 2.084 0.0 1. 00e5 i 8.0004 6.00e4 4. 0084 2.0004 0.00 1 1 2 3 4 2 3 4 5 6 替米考星B 日13 14 d) 泰乐菌素7 8 9 10 11 12 13 14 e) 泰乐菌素GB/T 20762-2006 tlmin 15 16 17 tlmin 15 16 17 tlmin 圄A.1 九种大环内酣类抗生素标准物质多反应监测(MRM)色i曾圄7 G/T 20762-2006 8.51 1. 5e5 克林霉素1. Oe5 5.0e4 0.
13、0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 tlmin f) 克林霉素8000 螺旋草草索6000 4000 2000 。1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 ( Imin g) 螺旋霉素吉它霉素1. Oe4 5000.0 0.0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 t I mill h) 吉它霉素9.14 6.0,4 交沙霉素4.0e4 2.0e4 0.0 1 2 3 4 5 6 7 B 9 10 11 12 13 14 15 16 17 tlmin 交沙
14、霉素图A.1 (续)B GB/T 20762-2006 附录B(资料性附录)回收率本方法中九种大环内酣类抗生素添加被度及其平均回收率的试验数据，见表B.1o表B.l九种大环内醋类抗生素添加51x.度及其平均回收率的试验数据被测物名称添加浓度I(问Ikg)平均回收率1%)1.0 88.0 林可霉素2.0 88. 2 5. 0 87.1 10.0 84.5 1. 0 84.9 竹桃霉素2.0 85.1 5.0 85.7 10.0 86.4 1. 0 84.9 2.0 82. 7 红霉素5.0 86.7 10.0 88.6 1. 0 86.9 2.0 87.8 替米考星5. 0 84.8 10.0
15、89.4 1. 0 86.6 2.0 77. 2 泰乐菌素5. 0 84.0 10.0 85.5 l. 0 89.5 2.0 82.0 克林霉素5.0 88.8 10.0 87.0 l. 0 86.8 2.0 86.6 螺旋霉素5. 0 88.4 10.0 86.8 1. 0 83. 3 2. 0 88. 2 吉它毒素5. 0 87.4 10.0 87.1 1. 0 85.9 2. 0 84.2 交沙霉素5. 0 86.9 10.0 82.9 9 CON-NkhONH筒。华人民共和国家标准畜禽肉中林可霉素、竹桃霉素、红毒素、替米考星、泰乐菌素、克林a素、螺旋毒素、吉它霉素、交沙草草素残留量的测定被相色i普-串联质谱法GB/T 20762-2006 国白将中国标准出版社出版发行北京复兴门外三旦河北街16号邮政编码:100045 网址电话:6852394668517548 中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销祷印张l字数19千字2007年3月第一次印刷开本880X 1230 1/16 2007年3月第一版定价16.00元* 书号:155066 1-28972 如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)6853353320762-2006
