1、GBT 14926.3194 1 主题内容与适用范围 本标准规定了大鼠细小病毒（RV 和 H-1株）抗体的检验方法、试剂等。适用于检测实验大鼠群的大鼠细小病毒（RV 和H-1株）感染情况。 2 引用标准 GBT 14926.18 实验动物 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒检验方法 GBT 14926.24 实验动物 小鼠肺炎病毒检验方法 3 设备、材料和试剂 3.1 大鼠细小病毒RV株毒种。 3.2 大鼠细小病毒H-1株毒种。 3.3 SPF大鼠胚细胞，原代至第5代。 3.4 1.5豚鼠红细胞。 3.5 HI、IFA和IEA所需要的设备、材料和试剂见GBT 14926.24中5.3 和 GBT 14
2、926.18中4.2。 4 检验步骤 4.1 血凝素抗原制备：RV和H-1毒种各接种大鼠胚细胞，培养712天，细胞病变达“”，血凝素滴度达1320以上，收获培养物，2000rmin20min离心去碎片，取上清经滴定，分装保存于低温（GBT 14926.24中5.3）。 4.2 玻片抗原制备：RV和H-1毒种各接种大鼠胚细胞，培养712天，病变达“ ”涂片（RV 和H-1以及正常细胞可涂于一张玻片上，方便使用）。涂片、鉴定和保存见GBT 14926.18中4.2.3。 4.3 阳性血清：RV和H-1毒种分别免疫SPF大鼠的阳性血清。HI滴度1160， IFA或IEA 滴度1160。 4.4 阴性
3、血清：确证无RV和H-I病毒感染的SPF大鼠群血清。 5 检验方法和结果判定 5.1 HI法：是首选的方法，RV和H-I分别检查。待检血清加霍乱滤液处理，如有非特异性凝集索，加豚鼠红细胞吸附去除。试验用8个血凝素单位，与待检血清室温作用30min，加入1.5豚鼠红细胞置室温40min读取结果。抗体滴度120判阳性。阳性标本经重试仍为阳性确定为阳性。具体操作方法见GBT 14926.24中5.3。 5.2 IFA和IEA法：亦可使用，用RV和H-1玻片抗原，用抗大鼠IgG荧光结合物（作IFA）或抗大鼠IgG酶结合物（作IEA）。操作步骤和结果判定见GBT 14926.18中4.2.4。待检血清15阳性经重试仍为阳性判阳性。 页码，1/2GB/T 14926.31942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92631R.htm6 结果报告 根据结果判定作出报告。 页码，2/2GB/T 14926.31942006-3-30file:/C:InetpubwwwrootdatagbbBE92631R.htm
