1、E.J 中华人民共和国核行业标准EJ/T 953-95 人血清促甲状腺素放射免疫分析试剂盒1995-07-05发布中国核工业总公司发布060524000155 1995-11-01实施中华人民共和国核行业标准人血清促甲状腺素放射免疫分析试剂盒1 主题内容与适用范围EJ/T 953-95 本标准规定了人血清促甲状腺素（以下简称TSH）放射免疫分析试剂盒的技术条件及检验方法。本标准适用于双抗体聚乙二醇法的TSH放射免疫分析试剂盒，也适用于真它免疫沉淀剂为分离剂的TSH放射免疫分析试剂盒。2 引用标准GB 11806 放射性物质安全运输规定EJ/T 804 放射性同位素产品代号3 产品代号及试J盒的
2、组成3.1 产品代号应按EJ/T804规定编写产品代号。TSH放射免疫分析试剂盒的代号为：TSHRIAl125062x 3. 2 试剂盒的组成及主要试剂特性3.2.1 试剂盒组成试剂盒主要组成如下za. 1251-TSH; b. TSH标准晶pc. 抗TSH抗体，d. 第二抗体；e. 聚乙二醇（PEG);f. 缓冲液。3.2.2 主要试剂特性主要试剂特性如下za. 标记抗原比活度：62.2 124. 3 GBq mol 1 (60 120Ci. g I) 放射化学纯度z不小于90%。b. 抗TSH抗体中国核工业总公司1995-07-05批准1995-11-01实施EJ/T 953-95 亲合常
3、数：K注1l010L.mol-11 交叉反应z与HCG交叉反应不大于410-3%I与FSH交叉反应不大于2102% I与LH交叉反应不大于1io-1%。c. 标准品标准晶应是国家标准晶。4技术指标主要技术指标如下。4. 1灵敏度最小检出值不大于I.OmIU L-1. 4.2 非特异结合率（NSB)不大于5%.4.3最大结合率侣。）应大于30%。4.4精密度用变异系数（CV）表示。批内CV不大于13%(n关10)I 批间CV不大于15%(n注10）。4.5准确度在一次测定中，低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值均应在允许范围（王土2SD)内。4.6 回收率（R)应在90%110%之间。4.7
4、相关系数（r）和有效剂量值（ED)剂量响应曲线的相关系数r的绝对值应不小于0.99; 有效剂量ED25、ED50、ED75C即结合率分别为25%、50%、75%时的对应剂量值均应在剂量响应曲线班围内，其变化均在G士2SD范围内。4.8测定范围推荐在160mIU L-1之间。4.9有效期在28条件下贮存，从生产日期计算，有效期为4周。5幢验方法按附录A（补充件实验程序操作，也可以用其它等效方法。5.1 灵敏度的测定求出零管结合率侣。的标准差SD(n注10），以零管结合率的均值减去2SD所得结合率的相应剂量值，即为试剂盒的灵敏度。2 IU /T 9-53-95 5.2 NSB的测定取两支放免试管分
5、别加入与测定样品相同体积的正常人血清和与抗TSH抗体相同体积的缓冲液操作.NSB按公式(1）计算NSB =CC.一Cb)/(C,- Cb) 100% .“(1) 式中：Cn一一非特异管计数率，计数min;Cb仪器本底计数率，计数min;C，一一总放射性管计数率，计数min.5.3 B。的测定B。按公式（2）计算B. =CC。一C.)/(C，一Cb）100%.（2)式中：C。一一零标准管计数率，计数min。5.4精密度的测定精密度用样品测定值的变异系数表示。CV按公式（3）计算：CV= (SD王100%.”. (3) 式中：SD一n次测定TSH值的标准差F王一n(n注10）次测定TSH的均值。s
6、. 5 准确度的测定用低、中、高三个剂量的质量控制血清测定值计算SD。s. 6 R的测定在已知TSH含量的血样中加入一定量的TSH，然后测定血样中总TSH含量。R按公式（4）计算zR = (D, - D1)/D. 100% 式中：D.一一血样中测得的总TSH的值，mIU L-1, Dk一一血样中已知的TSH值，mIU L一1J D，一一血样中加入的TSH值，mIU L 10 5.7剂量响应曲线的绘制及r、ED值的计算各标准剂量点的放射性结合率B（习惯用B/Bo表示按公式（5）计算z(4) B = (C, -C.)/(C.。一C.）100%“”.（5)3 EJ/T”3一”式中：C.一各标准剂量点
7、的放射性计数率，计数min.以各标准剂量点的B为纵坐标，以各相应的标准剂量点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线并求出r、ED值6撞撞规则产品的质量检验分为型式检验和出厂检验两项6.1 型式检验产品投产前及投产后工艺流程改变、原料变更，均须按第4章技术要求中规定的内容检验6.2 出厂检验6. 2.1全检项目试剂盒组份、包装及标志等6. 2. 2抽检项目NSB、B。、剂量响应曲线及质量控制血清测定值。6.2.3抽样方式抽检采用随机取样方式。100盒以下抽取1盒，101300盒抽取2盒，301500抽取3盒，501盒以上抽取4盒。6. 2.4抽检结果判断如果检验结果有一项指标不符合本标准规定的技术要求
8、时，应重新以两倍的数量随机取样进行复检。经复检仍不合格，则本批试剂盒判为不合格。6.2.5检验证书产品应有检验合格证书，见附录B（参考件。7 梅志、包馨、贮存和运输7.1 标志包括试剂盒封面标志、放射性试剂瓶标志、试剂瓶标志。7.1. 1 试剂盒封面标志4 试剂盒封面标志内容包括sa. 生产厂家sb. 产品名称pc. 注册商标Fd. 产品代号se. 产品批号，r. 批准文号Fg. 注意事项Fh. 有效期。7.1. 2放射性试剂瓶标志放射性试剂瓶标志内容包括za. 名称sb. 批号，c. 放射性活度Fd. 测量日期，e. 放射性标志7.1. 3试剂瓶标志试剂瓶标志内容包括za. 名称，b. 批号
9、Fc. 被度，d. 贮存条件，也有效期。7.2 包装和运输7.2. 1 包装IU/T”一”包装必须保证运输及防护安全，应符合GB11806豁免运输包装规定。包装盒内必须附有产品使用说明书。说明书内容包括a. 生产厂家Fb. 产品名称zc. 产品代号Fd. 批准文号se. 产品批号Ff. 适用范围Fg. 方法原理Fb. 试剂盒的组成及试剂配制，i. 操作程序；j. 结果计算sk. 技术指标FI. 垃意事项Fm. 有效期Fn. 参考文献。7.2.2运输运输应符合GB11806的规定。7.3贮存试剂盒应贮存于285 Al 方法提要EJ/T 953-95 附录A人血清促甲状腮嚣放射免在分析方法（补充件
10、促甲状腺素是一种糖蛋白激素，分子量为28,000.本方法用竞争放射免疫分析法测定人血清中促甲状腺素的含量。样品或标准中的TSH和加入的1251-TSH与有限量的抗体进行竞争性结合反应，一部分1251-TSH与抗体结合，而另一部分则呈游离状态。其结合的量与血样或标准中TSH的含量有关。TSH含量高，则结合的1251-TSH量就少，反之，TSH含量低，结合的1251-TSH量就多。用二抗和聚乙二醇作分离剂，将抗原抗体复合沉淀下来，测定其放射性计数率用含不同TSH浓度的血清作标准，获得剂量响应曲线从剂量响应曲线上查出被测样品中TSH的含量Al 仪器及设备计数器、微量加样器、放免试管、负压泵、离心机、
11、恒温水浴锅和一般生物化学实验室仪器设备。A3 实验程序A3.1 按说明书要求配制有关试剂A3.2 试管编号。1,2为总放射性管（T),3,4为NSB管，5,6为零标准管；718为标准管；18号管后依次为质量控制血清及样品管。A3.3操作顺序，按表Al实验顺序进行操作，逐步加入相应的试剂。溶液量以ft表示。A4结果计算各管结合物的放射性计数率减去NSB管的放射性计数率，按公式（5）计算出标准管的结合率，按下式计算出样晶管的结合率zB(B/B.) = (Cp -C.)/(C。一C.）100%.“(Al) 式中：Cp一待测样品管结合物的放射性计数率，计数min.以各标准管的B为纵坐标，TSH标准剂量
12、点的浓度为横坐标，绘制剂量响应曲线。根据待测样品的B，在剂量响应曲线上查得样品TSH含量（见图Al).6 EJ/T 953-95 表AlTSH测定操作顺序表试管编号操作顺序T口，2)NSB(3,4) 零标准（5，的标准（718)样品正常人血清200 TSH标准血清200 200 待测样晶200 抗TSH抗体溶液100 100 100 撼匀，放28冰箱温育过夜(1618h) 1251-TSH溶液100 100 100 100 100 摇匀，放37温育2h第二抗体溶液I - I 100 I 100 1 100 1 100 摇匀，放37温育1h PEG溶液I - I 1 oo I 1 oo I 1
13、oo I 1 oo 充分摇匀，28放置L5min，然后离心（3500r/min)20min.吸出上清液（总放射性管除外）。测量总放射性管和各管的放射性计数率B03, Bo:/o 100 80 60 40 20 。1. () 4. 1 7 8 18 39 68 m!U L TSH 浓度图AlTSH剂量响应曲线7 L 产品名称标记物放化纯度% 标准品批号抗血清批号NSB B. 检验指标结论复核附加说明zEJ/T 953-95 附景B放射免疫分析试剂盒检验合格证书（参考件放射免疫分析试剂盒检验合格证书批号生产人员比活度每瓶放射性活度KBq. mmol-1 kBq ED25 ED50 ED75 质量控制血清批号剂量低值中值范围实测检验人员年月日检监单位印章本标准由全国核能标准化技术委员会放射性同位素分技术委员会提出。本标准由中国原子能科学研究院同位素研究所负责起草。本标准主要起草人燕强奋、王玉肖。8 高值mAWlmmAWH国
