1、研究生入学考试生物化学（糖类）历年真题试卷汇编 1 及答案与解析1 (中山大学 2009 年考研试题)具有手性碳原子的化合物一定具有旋光性。（A）正确（B）错误2 (南京大学 2008 年考研试题)D-葡萄糖和 D-甘露糖形成的脎，有相同的熔点。（A）正确（B）错误3 (厦门大学 2008 年考研试题)糖原、淀粉和纤维素分子中都有一个还原端，所以它们都有还原性。（A）正确（B）错误4 (厦门大学 2007 年考研试题)葡萄糖的 -型和 -型是对映体。（A）正确（B）错误5 (厦门大学 2007 年、华东理工大学 2006 年考研试题)从热力学上讲，葡萄糖的船式构象比椅式构象更稳定。（A）正确（
2、B）错误6 (四川大学 2006 年考研试题)凡是具有旋光性的单糖都表现有变旋现象。（A）正确（B）错误7 (四川大学 2006 年考研试题)环状结构的己醛糖其立体异构体的数目为 16。（A）正确（B）错误8 (山东大学 2006 年考研试题)糖苷键在大多数只涉及一个单糖的异头碳，另一个异头碳是游离的。（A）正确（B）错误9 (华东理工大学 2007 年考研试题)一切有旋光性的糖都有变旋现象。（A）正确（B）错误10 (郑州大学 2008 年考研试题)麦芽糖和乳糖都是还原性二糖，糖苷键的类型也相同。（A）正确（B）错误11 (江南大学 2008 年考研试题)由两个葡萄糖通过糖苷键相连总共形成
3、8 种葡二糖，它们都具有还原性，这是因为葡萄糖具有还原性的缘故。（A）正确（B）错误12 (浙江工业大学 2006 年考研试题)糖苷环不能打开生成直链结构，且糖苷无还原性。（A）正确（B）错误二、单项选择题下列各题的备选答案中，只有一个是符合题意的。13 (南京大学 2008 年考研试题)下列寡聚糖被溶菌酶水解的相对速度，哪个最快?(G 代表一个 N-乙酰葡糖胺残基，而 M 代表 N-乙酰胞壁酸残基)( )（A）G-G-G-G-G-G（B） M-M-M-M-M-M（C） G-M-G-M-G-M（D）M-G-M-G-M-G14 (厦门大学 2008 年考研试题)下列哪种糖是非还原糖?( )（A）
4、果糖（B）葡萄糖（C）核糖（D）蔗糖15 (华东理工大学 2006 年考研试题)下列哪种糖无还原性( )。（A）麦芽糖（B）蔗糖（C）阿拉伯糖（D）木糖（E）果糖16 (华南农业大学 2009 年考研试题)不属于还原性糖的二糖是( )（A）麦芽糖（B）异麦芽糖（C）乳糖（D）蔗糖17 (郑州大学 2007 年考研试题)纤维素分子的糖苷键为( )。（A）(14)（B） (16)（C） (14)（D）(16)18 (江南大学 2007 年考研试题)下列哪些化合物含有糖基?( )(1)ATP(2)NAD(3)RNA(4)acetylCoA（A）(1)+(2)+(3)（B） (1)+(3)（C） (2
5、)+(4)（D）(4)（E）全部19 (江南大学 2007 年考研试题)下列有关多糖的陈述哪些是正确的?( )(1)多糖是生物的主要能源(2) 多糖以线状式或支链形式存在(3)多糖是细菌细胞壁的重要结构单元(4) 多糖是信息分子（A）(1)+(2)+(3)（B） (1)+(3)（C） (2)+(4)（D）全部20 (天津大学 2002 年考研试题)下列哪个糖不是还原糖?( )（A）D-果糖（B） D-半乳糖（C）乳糖（D）蔗糖21 (天津大学 2002 年考研试题)直链淀粉、支链淀粉遇碘分别呈( )。（A）黄色、紫色（B）蓝色、紫色（C）蓝色、黄色（D）紫色、红色22 (沈阳药科大学 2006
6、 年考研试题)黏多糖包括( )。（A）葡聚糖（B）几丁质（C）纤维素（D）硫酸皮肤素三、多项选择题下列各题的备选答案中，至少有一个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。23 (浙江工业大学 2006 年考研试题)下列哪些糖没有变旋现象?( )（A）果糖（B）蔗糖（C）甘露糖（D）淀粉（E）核糖24 (浙江工业大学 2006 年考研试题)淀粉的葡萄糖单位间存在着哪些连接键?( )（A）-1，6 糖苷键（B） -1，4 糖苷键（C） 3，5-磷酸二酯键（D） 一 1， 4 糖苷键（E） 一 1，6 糖苷键四、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。25 作为糖代谢中心物质的单糖是_
7、，作为 RNA 组成成分的单糖是_，这两种单糖在生物体内的构型为_型。26 具有芳香族侧链的极性氨基酸是_，本身属于碱性氨基酸，但是其羧基参与形成的肽键不能被胰蛋白酶作用的氨基酸是_。27 (中山大学 2009 年考研试题)甲基、甲烯基、甲炔基及亚氨甲基统称为_。28 (厦门大学 2008 年考研试题)一纤维二糖是由两个_通过_糖苷键相连组成的。29 (厦门大学 2007 年考研试题)生物体内的多糖按其生物功能可以分为两类_、_。前者往往以_糖苷键连接而成；后者往往以_糖苷键连接而成。30 (北京师范大学 2006 年考研试题)纤维素是线形葡聚糖，残基间通过_连接的纤维二糖可看成是它的二糖单位
8、。31 (四川大学 2007 年考研试题)环状结构的葡萄糖分子其立体异构体的总数目为_个。32 (四川大学 2006 年考研试题)判断一个糖是 D 一型还是 L 一型是以_碳原子上羟基的位置作依据。33 (华东理工大学 2006 年考研试题)蔗糖是由一分子_和一分子_组成，它们之间通过_糖苷键相连。34 (湖南大学 2007 年考研试题)纤维素和淀粉都是 14 连接的 D-萄聚糖，但纤维素的二糖单位是_，残基间通过_键连接；而直链淀粉的二糖单位是_、残基间通过_键连接。按其生物功能，淀粉为贮能多糖，而纤维素为_多糖。35 (中科大 2008 年考研试题)生物体中，寡糖常常与_和_共价结合而发挥
9、其生物学功能。36 (郑州大学 2007 年考研试题)500g 淀粉样品用酸完全水解后，得到 400g 纯葡萄糖，可见该淀粉的纯度是_。37 (浙江工业大学 2006 年考研试题)常见的糖苷键有_和_两种类型。38 糖酵解作用的生物学意义是_。39 柠橡酸循环既是需氧生物提供能量的重要代谢系统，又为许多生物合成提供前提物质，因此它具有_和_双重作用。40 乙醛酸循环在植物细胞中的部位是_和_。41 细胞质中的 NADH 必须通过_和或_途径才能进入线粒体内进行再氧化。42 生物体合成双糖和多糖时，糖基的供体是_。43 在高等动物体内，氨基酸脱氨基后形成的氨可转化成_和或_而成为无毒的物质。44
10、 胸腺嘧啶核苷酸的生物合成是由尿嘧啶脱氧核糖核苷酸经甲基化而生成的，催化该反应的酶是_。45 密码子的基本特性有_、_、_和_等。46 某些 RNA 病毒侵入宿主细胞后可借助于 RNA 指导的 RNA 聚合酶进行病毒RNA 的_。47 在原核生物基因表达调节的乳糖操纵子模型中，_起着负调节作用，而_起着正调节作用。48 生物体内错综复杂的酶促反应受到严格的调控，可概括地将该调控分为_、_和_三个水平。49 真核生物在翻译水平的调节主要包括影响_、_和_。50 甘油磷脂与鞘糖脂51 分子伴侣52 透析法与超滤法53 共价催化54 Northern 印迹法55 生物氧化56 葡萄糖-丙氨酸循环57
11、 SH2 结构域58 RNA 干扰技术59 噬菌体表面展示技术60 (浙江大学 2009 年考研试题)淀粉61 (四川大学 2007 年考研试题)糖的变旋性62 (吉林大学 2009 年考研试题)旋光现象63 (吉林大学 2009 年考研试题)寡糖64 (东北师范大学 2008 年考研试题)糖复合物65 (华东理工大学 2007 年考研试题)变旋现象66 (华东理工大学 2007 年考研试题)构象67 回答以下关于蛋白质结构与功能的问题：(1)请列举两个例子证明“ 蛋白质的一级结构决定高级结构” 这一基本原理；(2)血红蛋白的 、 亚基和肌红蛋白并不具有相同的一级结构，但具有相似的生物学功能(
12、都能够结合氧分子)，为什么?(3)同样都是氧结合蛋白，为什么肌红蛋白的氧结合曲线是一双曲线，而血红蛋白的氧结合曲线是 S 形曲线 ?68 (1)简述酶的竞争性抑制剂的作用机制，同样作为竞争性抑制剂，为什么过渡态底物类似物比基态底物类似物具有更高的抑制效率?(2)列举酶的反竞争性抑制剂与别构抑制剂在抑制作用上的异同点。69 你从一种植物中制备得到一种具有潜在药用价值的生物分子，你需要对它进行鉴定与进一步的研究：(1)请设计两种不同的实验方案证明该生物分子是蛋白质；(2)在已经证明该生物分子是蛋白质的前提下，你用 SDS-PAGE 方法测得其相对分子质量为 45000，用凝胶过滤法测得相对分子质量
13、为 90000，请解释原因；(3)为了今后能更方便地对其进行纯化，你计划利用大肠杆菌表达该蛋白质，并往其末端连接 6 个 His 残基，请给出这样做的理由。70 简述真核生物中 mRNA 前体的加工过程。71 简述参与真核生物蛋白质生物合成的酶和因子的作用。72 新陈代谢中所有的有机反应类型有哪些?请写出代谢途径中符合每种有机反应类型的反应式(用中文文字或结构式表示反应物和产物均可)。73 (中科大 2009 年考研试题)假设一个细胞表面糖蛋白的一个三糖单位在介导细胞与细胞黏着中起关键作用。请设计一个简单实验以检测该论断正确与否。74 (郑州大学 2007 年考研试题)开链己醛糖可能有多少个光
14、学异构体?为什么?75 (江南大学 2007 年考研试题)五只试剂瓶中分别装的是核糖，葡萄糖，果糖，蔗糖和淀粉溶液，试用最简便的化学方法鉴别。研究生入学考试生物化学（糖类）历年真题试卷汇编 1 答案与解析1 【正确答案】 B【试题解析】 具有手性碳原子的化合物有可能是内消旋体，不一定具有旋光性。【知识模块】 糖类2 【正确答案】 A【知识模块】 糖类3 【正确答案】 B【试题解析】 糖原、淀粉和纤维素分子中都无还原端，所以它们都没有还原性。【知识模块】 糖类4 【正确答案】 B【试题解析】 葡萄糖的 -型和 -型是非对映异构体。【知识模块】 糖类5 【正确答案】 B【试题解析】 从热力学上讲，
15、葡萄糖的椅式构象比船式构象更为稳定。【知识模块】 糖类6 【正确答案】 B【试题解析】 旋光性和变旋现象是两个不同的概念。一切有不对称碳原子的糖都有旋光性；而变旋现象是指一个有旋光性的溶液放置后，其比旋光度改变的现象，有 和 异构体的糖才有变旋现象。【知识模块】 糖类7 【正确答案】 B【试题解析】 环状结构的己醛糖其立体异构体的数目为 32。己醛糖的环状结构中有五个手性碳，故其立体异构体为 25=32 个。【知识模块】 糖类8 【正确答案】 A【知识模块】 糖类9 【正确答案】 B【试题解析】 旋光性和变旋现象是两个不同的概念。一切有不对称碳原子的糖都有旋光性；而变旋现象是指一个有旋光性的溶
16、液放置后，其比旋光度改变的现象，有 和 异构体的糖才有变旋现象。【知识模块】 糖类10 【正确答案】 B【试题解析】 麦芽糖和乳糖都是还原性二糖，但糖苷键的类型不同，麦芽糖是由-1，4 糖苷键连接，乳糖是由 -1，4 糖苷键连接。【知识模块】 糖类11 【正确答案】 B【试题解析】 糖的还原性是由 C1 上的半缩醛羟基决定的。所以由两个葡萄糖通过糖苷键相连总共形成 8 种葡二糖，它们都具有还原性，不是因为葡萄糖具有还原性的缘故。【知识模块】 糖类12 【正确答案】 A【知识模块】 糖类二、单项选择题下列各题的备选答案中，只有一个是符合题意的。13 【正确答案】 C【知识模块】 糖类14 【正确
17、答案】 D【知识模块】 糖类15 【正确答案】 B【知识模块】 糖类16 【正确答案】 D【知识模块】 糖类17 【正确答案】 C【知识模块】 糖类18 【正确答案】 E【知识模块】 糖类19 【正确答案】 A【知识模块】 糖类20 【正确答案】 D【知识模块】 糖类21 【正确答案】 B【知识模块】 糖类22 【正确答案】 D【知识模块】 糖类三、多项选择题下列各题的备选答案中，至少有一个是符合题意的，请选出所有符合题意的备选答案。23 【正确答案】 B,D【知识模块】 糖类24 【正确答案】 A,B【知识模块】 糖类四、填空题请完成下列各题，在各题的空处填入恰当的答案。25 【正确答案】
18、葡萄糖 核糖 D26 【正确答案】 酪氨酸(Tyr) 组氨酸(His)27 【正确答案】 一碳单位【知识模块】 糖类28 【正确答案】 D 一吡喃葡糖 -1，4【知识模块】 糖类29 【正确答案】 贮能多糖 结构多糖 O N【知识模块】 糖类30 【正确答案】 (14) 糖苷键【知识模块】 糖类31 【正确答案】 32【知识模块】 糖类32 【正确答案】 距离半缩醛 OH 最远或距离伯羟基最近的手性【知识模块】 糖类33 【正确答案】 葡萄糖 果糖 -葡萄糖(1-2) -果糖【知识模块】 糖类34 【正确答案】 纤维二糖 (14) 糖苷 麦芽糖 (14) 糖苷 结构【知识模块】 糖类35 【正
19、确答案】 脂类 蛋白质【知识模块】 糖类36 【正确答案】 80【知识模块】 糖类37 【正确答案】 O-糖苷键 N-糖苷键【知识模块】 糖类38 【正确答案】 为生物体提供一定的能量，糖酵解的中间物为生物合成提供原料，是某些特殊细胞在氧供应正常情况下的重要获能途径。39 【正确答案】 分解代谢 合成代谢40 【正确答案】 乙醛酸体 细胞质基质41 【正确答案】 磷酸甘油穿梭系统 苹果酸一天冬氨酸穿梭系统42 【正确答案】 糖核苷酸43 【正确答案】 尿素 尿酸44 【正确答案】 胸腺嘧啶核苷酸合酶45 【正确答案】 简并性 通用性 变偶性 变异性46 【正确答案】 复制47 【正确答案】 阻
20、遏蛋白 激活蛋白48 【正确答案】 酶区域定位 酶含量(浓度) 酶浓度49 【正确答案】 启动子活性 阻遏蛋白活性 mRNA 加 poly-A 尾端序列50 【正确答案】 甘油磷脂是组成细胞膜脂双层分子的主要成分，为双亲性分子。脂肪酸酯化连接到甘油的 C-1 和 C-2 上，极性头通过磷酸二酯键与甘油相连，由于头部的化学性质不同而分成不同的磷脂，如磷脂酰丝氨酸、磷脂酰胆碱等。鞘糖脂是指糖基或糖链通过糖苷键和神经酰胺连接而形成的糖脂，是生物膜脂双层的组分，包括脑苷脂、神经节苷脂和寡糖基神经酰胺。51 【正确答案】 分子伴侣是一类能够稳定另一种蛋白质的不稳定构像和协助其他多肽进行正常折叠、组装、跨
21、膜转位、降解错误折叠蛋白质的蛋白质，并在 DNA的复制、转录、细胞信号转导、微管的形成和修复、免疫调控、抗肿瘤和病毒感染、细胞抗衰老等过程中发挥重要作用的蛋白质。52 【正确答案】 (1)透析法是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，而大分子物质不能通过半透膜的性质，达到分离的方法。透析只需要使用专用的半透膜即可完成。透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。(2)超滤法是一种根据溶液中分子的大小和形态，在埃(10 -8 厘米)数量级选择性过滤的技术。这种方法，在一定的压力下(外源 N2 压或真空泵压)，使溶剂和较小分子的溶质能通过一定孔径的薄膜，大分子的溶质则不能透过，从而可以
22、使高分子物质脱盐、脱水和浓缩；在一定的条件下，还可以起到分离和纯化的作用。从另一角度来看，超滤也可以认为具有溶液相的分子筛作用，根据所用超滤膜的型号不同，可以在分子量 500100,000 内进行筛分。53 【正确答案】 共价催化是第二种类型的化学催化模式，通过底物与催化剂形成共价键加快反应速度，主要进行基团转移。共价键一般都是通过催化剂上的亲核基团与底物上的亲电基团反应形成的。因此这种形式的催化也称为亲核催化。54 【正确答案】 将 RNA 固定在硝酸纤维素膜上后，用互补的具有放射性标记的RNA 或 DNA 探针与其杂交，这种方法称为 Northern 印迹法。DNA 印迹技术由Southe
23、rn 于 1975 年创建，称为 Southern 印迹技术，RNA 印迹技术正好与 DNA 相对应，故称为 Northern 印迹杂交。55 【正确答案】 生物细胞将糖、脂和蛋白质等燃料分子氧化分解，最终生成 CO2和 H2O 并释放出能量的作用称为生物氧化。生物氧化包含了细胞呼吸作用中的一系列氧化还原反应，所以又称为细胞氧化或细胞呼吸。在真核生物细胞，生物氧化在线粒体中进行，而原核生物是在细胞质膜上进行的。56 【正确答案】 肌肉中的氨基酸将氨基转给丙酮酸生成丙氨酸，后者经血液循环转运至肝脏经过联合脱氨基作用再脱氨基，放出的氨用于合成尿素；生成的丙酮酸经糖异生转变为葡萄糖后，再经血液循环转
24、运至肌肉重新分解产生丙酮酸，丙酮酸再接受氨基生成丙氨酸。丙氨酸和葡萄糖反复地在肌肉和肝之间进行氨的转运，故将这一循环过程称为丙氨酸-葡萄糖循环。57 【正确答案】 SH2 结构域是“Src 同源结构域”的缩写。这种结构域是能够与受体酪氨酸激酶磷酸化残基紧紧结合，形成多蛋白的复合物进行信号转导。SH2 结构域含有约 100 个氨基酸残基，中间一段为反平行 一片层，两端各一个 -螺旋，SH2 结构域特异性地识别配基上磷酸化的酪氨酸残基及其 c 端的 35 个氨基酸残基。SH2 结构域能够与生长因子受体(如 PDGF 和 EGF)自我磷酸化的位点结合。58 【正确答案】 RNA 干扰(RNAi)是正
25、常生物体内抑制特定基因表达的一种现象，它是指当细胞中导入与内源性 mRNA 编码区同源的双链 RNA(dsRNA)时，该mRNA 发生降解而导致基因表达沉默的现象，这种现象发生在转录后水平，又称为转录后基因沉默(PTGS)。外源 dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰RNA(siRNA)的反义链和多种核酸酶形成沉默复合物(RISC)，RISC 具有结合和切割mRNA 的作用而介导 RNA 干扰的过程。RNAi 具有特异性和高效性。这种技术已经成为研究基因功能的重要工具，并将在病毒性疾病、遗传性疾病以及肿瘤的治疗方面发挥重要作用。59 【正确答案】 噬菌体表面展示技术(PDT)是以改造的噬菌体为
26、载体，把待选基因片段定向插入噬菌体外壳蛋白质区，使外源多肽或蛋白质表达并展示于噬菌体表面，进而通过亲和富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体，最终获得具有特异结合性质的多肽蛋白质，并实现基因克隆化的一种重要的分子生物学技术。60 【正确答案】 淀粉是一种多糖，可以看作葡萄糖的高聚体，通式是(C 6H10O5)n，是植物界中存在的极为丰富的有机化合物，大量存在于植物的种子、根、茎等部位。淀粉以球状颗粒贮藏在植物中，是植物贮存营养的一种形式。淀粉有直链淀粉和支链淀粉两类。【知识模块】 糖类61 【正确答案】 由于某些糖溶于水后，即产生环式与链式异构体间的互变，所以新配成的糖溶液在放置的过程中其旋光
27、度会逐渐改变，糖的这种性质称为糖的变旋性。【知识模块】 糖类62 【正确答案】 当光波通过尼克棱镜时，由于棱镜的结构，通过的只是沿某一平面振动的光波，这种光波通过具有旋光性质的某异构物溶液时，则偏振面会向右或向左旋转的现象即为旋光现象。【知识模块】 糖类63 【正确答案】 寡糖是由比较少数分子的单糖(26 个)缩合形成的糖。【知识模块】 糖类64 【正确答案】 糖复合物是糖以共价键与蛋白质、多肽或脂类所形成的共价复合大分子，包括糖蛋白、糖脂和蛋白聚糖。【知识模块】 糖类65 【正确答案】 变旋现象是指一个有旋光性的溶液放置后，其比旋光度改变的现象，有 和 异构体的糖才有变旋现象。【知识模块】
28、糖类66 【正确答案】 含有两个或两个以上多价原子的有机化合物，由于围绕单键旋转导致分子中其他原子或基团在空间排列不同，分子的这种立体形象称为构象。【知识模块】 糖类67 【正确答案】 (1)蛋白质的一级结构是指氨基酸残基的排列顺序。各种蛋白质中氨基酸排列顺序是由该生物遗传信息决定的，一级结构是蛋白质分子的基本结构，它是决定蛋白质空间构象的基础，而蛋白质的空间构象则是实现其生物学功能的基础。 例如，核糖核酸酶含 124 个氨基酸残基，含 4 对二硫键，在尿素和还原剂 一巯基乙醇存在下松解为非折叠状态。通过透析法可以去除尿素和 -巯基乙醇，该酶有正确一级结构的肽链，4 对二硫键重建在原来的位置，
29、盘曲成天然三级结构构象并恢复生物学功能。 又例如，镰刀形红细胞贫血症。正常红细胞血红蛋白的 亚基 N 末端第六位氨基酸残基为谷氨酸。正常红细胞为双凹圆盘彤，不正常红细胞血红蛋白的 亚基 N 末端第六位氨基酸残基由谷氨酸变为缬氨酸。谷氨酸在生理条件下带负电，而缬氨酸的侧链是一个非极性基团，因此，不正常红细胞血红蛋白一级结构氨基酸序列的突变不仪使血红蛋白三维结构表面的电荷性质改变了，而且多了一个疏水尾巴，创造了一个“黏性” 突起，促使细胞在脱氧情况下相互黏连形成纤维状多聚体。血红蛋白的这种变化，促使红细胞变为镰刀状，易在毛细血管处发牛堵塞，引起炎症；镰刀形红细胞易碎裂溶血，导致贫血。 (2)虽然血
30、红蛋白的、 亚基和肌红蛋白并不具有相同的一级结构，但肽链折叠后的三维结构非常相似，肌红蛋白甚至与血红蛋白的 亚基几乎有相同的三维结构，三维结构的相似使它们具有相似的生物学功能。 (3)肌红蛋白的氧结合曲线呈双曲线，而血红蛋白呈 S 形曲线，这是因为每个肌红蛋白分子仅有一个 O2 的结合位置，因此每一肌红蛋白分子和 O2 的结合均是独立的，和其他肌红蛋白分子无关。而血红蛋白分子是由四个亚基所组成，每一亚基均有一个 O2 的结合位置，血红蛋白分子对 O2 的结合是四个亚基的协同作用的结果。 这也反映了两种蛋白质的生理功能是不同的。肌红蛋白的功能是储备氧，只有当剧烈活动时血液输氧不足以补偿肌肉消耗而
31、致局部氧分压很低的情况下，才放出氧来应急。而血红蛋白的功能是运输氧，所以它既能在肺筛泡的高氧分压条件下充分结合氧，又能在周围组织的低氧分压条件下将大部分氧释放出来。68 【正确答案】 (1)竞争性抑制剂的作用机制如图附录 1-1 所示，抑制剂 I 和底物S 对游离酶 E 的结合有竞争作用，互相排斥，已结合底物的 ES 复合体，不能再结合 I。同样已结合抑制剂的 EI 复合体，不能再结合 S。过渡态底物是指底物和酶结合成中间复合物后被活化的过渡态形式。过渡态底物类似物是指结构与过渡态底物相似的化合物，过渡态的势能比基态的低，过渡态底物类似物对酶的亲和力远远大于底物，故其抑制效率比基态底物类似物高
32、很多倍。 (2)抑制剂不能与游离酶结合，但可与 ES 复合物结合并阻止产物生成，使酶的催化活性降低，称酶的反竞争性抑制。 某些代谢物能与变构酶分子上的变构部位特异性结合，使酶的分子构象发生改变，从而改变酶的催化活性以及代谢反应的速度，这种调节作用就称为别构调节。共同点：都能使酶的催化活性降低，改变代谢的反应速度。 不同点。反竞争性抑制剂：抑制剂不能与酶结合，与 ES 复合物结合阻止产物生产； 必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；不改变酶的构象。 别构抑制剂： 抑制剂与酶结合；无需底物存在，抑制剂也可以抑制酶的活性； 改变酶的构象。69 【正确答案】 (1)第一种方法：考马斯亮蓝法。在加
33、有该生物分子的试管中加入考马斯亮蓝溶液，如果考马斯亮蓝溶液由红色变为青色，则证明该生物分子为蛋白质。考马斯亮蓝在游离状态下呈红色，最大光吸收在 488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质一色素结合物在 595nm 波长下有最大光吸收。 第二种方法：双缩脲法。在加有该生物分子的试管中先加入 NaOH 溶液(2mL)，振荡摇匀，形成碱性的反应环境，然后再加入 3-4 滴 CuSO4 溶液，振荡摇匀后观察现象，如果看到紫色，则证明该生物分子为蛋白质。双缩脲反应是在碱性环境下的 Cu2+与双缩脲(H 2NOCNH-CONH2)发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，所以蛋白质
34、都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。 (2)SDS-PAGE 主要依据蛋白质的分子量对其进行分离。SDS 与蛋白质的疏水部分相结合，破坏其折叠结构，并使其稳定地存在于一个广泛均一的溶液中。SDS- 蛋白质复合物的长度与其分子量成正比。由于在样品介质和聚丙烯酰胺凝胶中加入离子去污剂和强还原剂后，蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于亚基分子量的大小，。而电荷因素可以被忽略。根据标准蛋白质分子量的对数和迁移率所作的标准曲线，即可求得未知物的分子量。 凝胶过滤法是一种高效分离纯化蛋白质的方法，其原理是不同的蛋白质分子对固定化在载体上的特殊配基具有不同的识别和结合能力。选择与待纯
35、化蛋白质具有特殊识别和结合作用的配基，然后应用化学方法将该配基与载体共价链接。将这种有配基的载体装入层析柱中，当含有待纯化的蛋白质溶液通过层析柱时，该蛋白质即与配基发生特异性结合而被吸附在层析柱上，而其他蛋白质则流出柱外。被特异性结合在层析柱上的蛋白质，可以用适当的配体洗脱液洗脱。从凝胶过滤的原理可知，蛋白质分子通过凝胶柱的速度并不直接取决于分子的质量，而是它的斯笃克半径，利用凝胶过滤法测定蛋白质分子量时，标准蛋白质(已知分子量和斯笃克半径)和待测蛋白质必须具有相同的分子形状(接近球体) ，否则不能得到比较准确的分子量。 因此，该分子可能与标准蛋白质的分子形状差别比较大，故用凝胶过滤法无法得到
36、准确的分子量，而使用 SDS-PAGE 的方法测得的结果比较可靠。 (3)大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，备受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛、最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系，所以用大肠杆菌来表达该蛋白质是非常理想的选择。 往该蛋白质分子末端连接 6个 His 残基利于纯化。组氨酸在中性和弱碱性条件下可以和固定化的金属离子，如Ni2+、Zn 2+和 Co2+相互作用，是应用最为广泛的亲和标签。连接 6 个 His 残基的分子量最小，不影响目标蛋白的功能；His 标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性
37、条件下纯化，前者存纯化疏水性强的蛋白得到应用，后者在纯化包涵体蛋白时特别有用，用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯合亲和层析去除杂蛋白，使复性不受其他蛋白的干扰，或进行金属螯合亲和层析复性，在提纯蛋白质时起很大作用。70 【正确答案】 真核生物 DNA 转录生成的原始转录产物 mRNA 前体是核不均一RNA(hnRNA)，即 mRNA 初级产物中含有不编码任何氨基酸的插入序列，该序列由内含子编码，这种内含子将编码序列外显子隔开，所以前体 mRNA 分子一般比成熟 mRNA 大 410 倍，必须经过加工修饰才能作为蛋白质翻译的模板。其加工修饰主要包括 5端加“ 帽”和甲基化修饰、3端加 polyA“
38、尾”和剪去内含子拼接外显子等。(1)5端帽子的生成。mRNA 的帽子结构(GpppmG-)是在 5一端形成的。转录产物第一个核苷酸往往是 5一三磷酸鸟苷 pppG。mRNA 成熟过程中，先由磷酸酶把 5-pppG 一水解，生成 5一 ppG 或 5一 pG 一，然后，5一端与另一三磷酸呜苷(pppG)反应，生成三磷酸双鸟苷。在甲基化酶的作用下，第一或第二个鸟嘌呤碱基发生甲基化，形成帽子结构。帽子结构是前体 mRNA 在细胞核内的稳定因素，也是 mRNA 在细胞质内的稳定因素，没有帽子结构的转录产物很快被核酸酶水解。帽子结构可以促进蛋白质生物合成起始复合物的生成，因此提高了翻译强度。(2)3末端
39、多聚 A 尾的生成。真核生物的成熟的 mRNA 3一端通常都有 100-200个腺苷酸残基，构成多聚腺苷酸(poly A)尾巴。加尾过程是在核内进行的。加工过程先由核酸外切酶切去 3一末端一些过剩的核苷酸，然后由多聚腺苷酸酶催化，以 ATP 为底物，在 mRNA 3-末端逐个加入腺苷酸，形成 polv 尾。3一末端切除信号是 3一端一段保守序列 AAuAAA。polyA 尾巴的功能：mRNA 由细胞核进入细胞质所必需的形式，大大提高了 mRNA 在细胞质中的稳定性。(3)甲基化作用。真核生物 mRNA 链中含有甲基化的核苷酸，除了 5端帽子结构中含有 13 个甲基化核苷酸外，在 mRNA 分子
40、内部还有甲基化的核苷酸，主要在嘌呤环 6 位上甲基化，即 m6A。(4)剪接修饰。剪接核内出现的转录初级产物，分子量往往比在胞浆内出现的成熟 mRNA 大几倍，甚至数十倍，核内的初级 mRNA 称为杂化核 RNA，即hrRNA。真核生物的结构基因往往是断裂基因，即由若干个编码序列被若干个非编码序列分隔，连续镶嵌为一体，为一个由连续氨基酸组成的完整蛋白质编码。其中不编码的序列，称为内含子，编码序列即外显于。mRNA 剪接是在剪接体上进行的。在转录时，外显子和内含子均转录到同一hnRNA 中，转录后把 hnRNA 中的内含子除去，把外显子连接起来，这就是 RNA的剪接作用。snRNA 和核内的蛋门
41、质组成核糖核酸蛋白体，称为并接体，并接体结合在 hnRNA 的内含子区段，并把内含子弯曲使两端(5和 3)端相互靠近，利于剪接过程的进行。并接体和 hnRNA 的结合，并接体上的 U1snRNA 和 U2 一snRNA 分别靠碱基互补关系去辨认及结合内含了的 5和 3端，发生二次转酯反应，内含子以套索形式被剪切下来，同时使外显子相互连接起来。71 【正确答案】 真核细胞蛋白质生物合成的起始步骤，可概括为： (1)形成 43S 核糖体复合物：由 40S 小亚基与 elF3 和 elF4c 组成。 (2)形成 43S 前起始复合物：即在 43S 核糖体复合物上，连接 elF2-GTPMettRNA
42、Met 复合物。 (3)形成 43s 前起始复合物：由 mRNA 及帽结合蛋白 1(CBP1)、elF4A、elF4B 和 elF4F 共同构成一个 mRNA 复合物：mRNA 复合物与 43S 前起始复合物作用，形成 48S 前起始复合物。 (4)形成 80S 起始复合物：在 e1F5 的作用下， 48S 前起始复合物中的所有elF 释放出，并与 60S 大亚基结合，最终形成 80S 起始复合物，即 40S 亚基-tuRNA-Met-tRNAMet-60S 亚基。 与真核细胞蛋白质生物合成的起始因子相比较，在延长和终止步骤中所涉及的因子就十分简单。延长闪子(EF)，分子量约 50kD。EFl
43、 可与 GTP 和 aatRNA 形成复合物，并把 aa-tRNA 供给核糖体。对 EFl 的研究不像对原核细胞 EF-Ts 那么清楚，但已证明 EFl 能催化GDP-GTP 交换，有助于 EFl 再循环利用，EF2 分子量约 100kD，相当于原核细胞的 EFG，催化 GTP 水解和使 aa-tRNA 从 A 位转移至 P 位。肽链合成的终止仅涉及到一种释放因子(RF)，分子量约 115KD。它可以识别所有的三种终止密码子UAA，UAG 和 UGA。RF 在活化了肽链酰转移酶释放新生的肽链后，即从核糖体解离，解离过程涉及 GTP 水解，故终止肽链合成是耗能的。72 【正确答案】 新陈代谢中的
44、有机反应类型有基团转移反应、氧化还原反应、消除异构化及重排反应、碳-碳键的形成与断裂反应。 基团转移反应如图附录 1-2 所示。 氧化还原反应如图附录 1-3 所示。消除反应如图附录 1-4 所示。 异构化反应如图附录 1-5 所示。重排反应如图附录 16所示 碳-碳键的形成与断裂反应如图附录 1-7 所示。73 【正确答案】 假如糖单位是关键的，则此三糖本身应是细胞黏着的竞争性抑制剂。【知识模块】 糖类74 【正确答案】 开链己醛糖町能有 16 个光学异构体。因为环状乙醛糖有 5 个手性碳(C*) ，故 25=32；则开链乙醛糖有 4 个 C*，即 24=16。【知识模块】 糖类75 【正确答案】 首先在这五种糖中各加入适量碘液，只有淀粉变蓝色，其余四糖不变色。然后在除淀粉外的四种糖中分别加适量菲林试剂，蔗糖不变色，其余三种糖呈黄色或红色。然后在剩余的三种糖中分别加入几滴溴水，核糖和葡萄糖具有还原性而使溴水褪色，果糖无还原性，不能使溴水褪色。最后在葡萄糖和核糖之间加入盐酸和间苯二酚，核糖呈绿色，葡萄糖则呈浅红色。【知识模块】 糖类
