1、- 1 -DNA 的粗提取与鉴定一、实验原理1提取思路：利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。2提取原理(1)DNA 的溶解性：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使 DNA 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离的目的。DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则可溶于其中。(2)DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080 的高温，发生变性，而 DNA 在 80_以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞
2、膜，但对 DNA 没有影响。3鉴定原理：DNA二苯胺沸水浴,蓝色。二、实验操作1实验材料的选取选用 DNA 含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。2破碎细胞，获取含 DNA 的滤液(1)动物细胞的破碎(以鸡血为例)：在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。(2)植物细胞的破碎(以洋葱为例)：先将洋葱切碎，然后加入一定的洗涤剂和食盐，进1.DNA 在 0.14 mol/ L NaCl 溶液中溶解度最低。2DNA 不溶于酒精，但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可利用酒精将DNA 和蛋白质分开。3DNA 对蛋白酶、高温和洗涤剂有耐受性。4在加热条件下，DNA 遇二苯
3、胺会被染成蓝色。5哺乳动物成熟的红细胞不含细胞核，不能作为提取 DNA 的实验材料。若选取肝脏细胞或植物细胞，则必须充分研磨。6鸡血中加入柠檬酸钠可防止血液凝固。7用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓且沿同一个方向进行，以免加剧 DNA 分子的断裂。- 2 -行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。3去除滤液中的杂质(1)方案一：通过控制 NaCl 溶液的浓度去除杂质。(2)方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应 1015 min，嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。(3)方案三：将滤液放在 6075_的恒温水浴箱中保温 1015 min，使蛋白质变性而与 DNA 分离。4DNA 的析出在滤液中加入与滤液体
4、积相等的、冷却的酒精溶液，静置 23 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。5DNA 的鉴定将呈白色丝状的 DNA 溶解于 5 mL 物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中，再加入 4 mL的二苯胺试剂，沸水中加热 5 min，冷却后观察溶液的颜色，注意要同时设置对照实验。三、操作提示1以血液为实验材料时，每 100 mL 血液中需要加入 3 g 柠檬酸钠，防止血液凝固。2加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧 DNA 分子的断裂，导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀
5、。3鉴定 DNA 用的二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。1下图中能反映 DNA 溶解度与 NaCl 溶液浓度之间关系的是( )解析：选 C DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随着 NaCl 溶液浓度的变化而变化，在 NaCl 溶液浓度为 0.14 mol/L 时 DNA 溶解度最小。2.在 DNA 粗提取与鉴定实验中，除去杂质时将滤液放在 6075 的恒温水浴箱中保温1015 min 的目的是( )A使 DNA 变性 - 3 -B使蛋白质变性C使 DNA 和蛋白质变性 D分解蛋白质解析：选 B 大多数蛋白质不能忍受 6080 的高温，而 DNA 在 80 以上才会变性。在 6075
6、 的恒温水浴箱中保温 1015 min，目的是使蛋白质变性，然后分离得到 DNA。3在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的是( )A防止凝血 B加快 DNA 析出C加快 DNA 溶解 D加速凝血解析：选 A 柠檬酸钠是抗凝血物质，防止凝血，有利于鸡血细胞液的制备。Error!核 心 要 点 一 DNA粗 提 取 与 鉴 定 的 原 理 和 方 法1DNA 与蛋白质在 NaCl 溶液中的溶解度项目 溶解规律 2 mol/L 的 NaCl 溶液 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液DNA 溶解 析出蛋白质 部分发生盐析沉淀 溶解总结DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中
7、溶解度不同；选择适当的盐溶液就能使 DNA 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的名师点拨 高温和盐溶液对 DNA 和蛋白质的影响不同(1)盐析过程中 DNA 的空间结构不变，没有变性，只是溶解度在不同盐浓度下不同，因此改变盐浓度，可重新使 DNA 溶解。(2)高温使 DNA 和蛋白质变性时破坏的键不同。DNA 变性时，氢键被破坏；降温时 DNA 能复性，是可逆过程。而蛋白质变性时往往是二硫键被破坏，因此蛋白质变性是不可逆的。2DNA 提取与鉴定的原理和方法基本原理 方法 目的DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同溶于 NaCl 溶液中并稀释NaCl 溶液为 2 mol/
8、L 时，DNA 溶解，而部分蛋白质发生盐析生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于- 4 -NaCl 溶液的杂质；当 NaCl 溶液稀释至 0.14 mol/L 时，DNA 析出，过滤可除去溶于 NaCl 溶液的部分蛋白质和其他杂质DNA 不被蛋白酶所水解 加入嫩肉粉 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，分解蛋白质DNA 不溶于酒精溶液 加入冷却酒精(95%) DNA 析出，除去溶于酒精的蛋白质DNA 可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺，并沸水浴加热鉴定 DNA题组冲关1在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，实验原理是 DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中的溶解度不同。DNA 的溶解和析出与图中所示曲线的对应点
9、符合的是( )Aa 点浓度最适合析出 DNABb 点浓度最适合析出 DNACc 点浓度最适合溶解 DNADd 点浓度最适合析出 DNA解析：选 B 用高浓度的 NaCl 溶液溶解 DNA，能除去在高盐溶液中不能溶解的杂质，用低浓度的 NaCl 溶液使 DNA 析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质，因此，反复溶解、析出DNA 能除去与 DNA 溶解度不同的杂质。从题图可以看出，DNA 在浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl溶液中(b 点)的溶解度最小，因此最适合析出 DNA，但是随着 NaCl 溶液浓度的增大或减小，溶解度均逐渐增大。2下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验原理的叙述，正确的
10、是( )ADNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随 NaCl 溶液浓度的升高而减小B利用 DNA 不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的 DNACDNA 是大分子有机物，易溶于水也溶于某些有机溶剂D在沸水浴中，DNA 遇二苯胺会出现紫色反应解析：选 B 随 NaCl 溶液浓度的升高，DNA 的溶解度先降低后增大。DNA 不溶于酒精等有机溶剂。在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺后呈现蓝色。Error!核 心 要 点 二 DNA粗 提 取 与 鉴 定 的 实 验 操 作1实验材料的选取不同生物组织中 DNA 的含量不同，在选取材料时，应依据“DNA 含量高、材料易得、便于提取”的原则
11、，如鸡血、菜花、洋葱等。- 5 -若选取鸡血作为实验材料，可在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，使血细胞吸水破裂，释放核物质，过滤后收集滤液。若选取植物细胞，应加入一定量的洗涤剂和食盐，并进行充分地搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。2提取 DNA 的实验步骤步骤 实验操作 目的制备鸡血细胞液 每 100 mL 血液中加入 3 g 柠檬酸钠，然后静置或离心，除去上清液防止血液凝固，使血细胞与血浆分离提取细胞核物质 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，并充分搅拌，过滤后收集滤液使细胞因过度吸水而破裂，释放核物质溶解 DNA向上述滤液中加入 NaCl，使 NaCl 溶液物质的量浓度为 2
12、mol/L，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，然后过滤溶解 DNA，过滤除去不溶的杂质析出 DNA向上述滤液中缓缓加入蒸馏水并轻轻搅拌，至白色丝状黏稠物不再增加时停止加水，然后用多层纱布过滤使 NaCl 溶液的浓度降至 0.14 mol/L，析出 DNA，过滤除去溶于该浓度的 NaCl溶液的杂质DNA 的再溶解将纱布上的黏稠物放入 2 mol/L 的NaCl 溶液中，搅拌至完全溶解，然后过滤溶解 DNA，过滤除去杂质提取较纯净的 DNA向上述滤液中加入等体积的体积分数为 95%的冷却酒精溶液，待出现丝状物时用玻璃棒沿一个方向搅拌，将丝状物卷起除去溶于酒精的杂质，获得较纯净的DNA3DNA 的鉴定试管序
13、号 A B1 加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液 5 mL2 加 DNA 丝状物溶解 3 加 4 mL 二苯胺混匀4 沸水浴 5 min实验现象 变蓝 不变色实验结论DNA 在沸水浴条件下，遇二苯胺会变成蓝色- 6 -4实验操作分析(1)实验中有 2 次加入蒸馏水，第一次加入的目的是使鸡血细胞吸水涨破，第二次加入的目的是稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L，从而析出 DNA。(2)实验中有 3 次加入 NaCl，作用均为溶解 DNA。(3)实验中有 4 次过滤：第一次过滤 第二次过滤 第三次过滤 第四次过滤滤液中 含 DNA 的核物质 DNA溶于 0.14 mol/L NaCl溶
14、液的杂质DNA纱布上细胞膜、核膜等残片不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质 DNA不溶于 2 mol/L NaCl溶液的杂质过滤前加入的物质 蒸馏水 NaCl 溶液 蒸馏水 NaCl 溶液过滤目的去除细胞膜、核膜等杂质去除不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质去除溶于0.14 mol/L NaCl 溶液的杂质去除不溶于 2 mol/L NaCl溶液的杂质名师点拨 DNA 的粗提取与鉴定中的注意事项(1)过滤含 DNA 的黏稠物时不能用滤纸代替纱布，否则会因 DNA 被吸附到滤纸上，而导致 DNA 大量损失。(2)用玻璃棒搅拌时，动作要缓慢且沿同一方向进行，目的是防止 DNA 被破
15、坏。(3)盛放鸡血细胞液的容器最好是塑料器具，因为 DNA 易被玻璃制品吸附，影响最终的DNA 提取量。最后提取 DNA 用于鉴定时，可用玻璃棒将 DNA 卷出。(4)二苯胺试剂要现配现用，否则二苯胺会变成浅蓝色，影响鉴定效果。(5)鉴定 DNA 还可使用甲基绿染液，甲基绿染液可将 DNA 染成绿色。题组冲关3在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的是( )A取制备好的鸡血细胞液 510 mL 注入烧杯中，迅速加入浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl溶液 20 mL，同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌 5 min，可使鸡血细胞破裂，释放出 DNAB整个 DNA 提取过程中，两次加蒸馏水
16、的目的都是为了降低溶液中 NaCl 的浓度，使DNA 分子的溶解度达到最低，析出 DNA 分子C整个 DNA 提取操作中，两次加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液，目的都是使 DNA 尽可能多地溶解在 NaCl 溶液中- 7 -DDNA 鉴定操作中，只要向溶有 DNA 的 NaCl 溶液中加入 4 mL 的二苯胺试剂，即可出现蓝色解析：选 C 取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中，迅速加入蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌，使鸡血细胞破裂，将 DNA 释放出来。整个 DNA 提取过程中，两次使用蒸馏水，第一次是使鸡血细胞吸水涨破，释放 DNA；第二次是用来稀释 NaCl 溶液，使 DNA 析出。在
17、DNA 鉴定操作中，DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成。4如图为“DNA 的粗提取与鉴定”的实验装置，请回答问题：(1)本实验材料选用鸡血细胞液，而不是鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中_含量较高。(2)图 A 中加入蒸馏水的目的是_。(3)通过图 B 所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入 NaCl，使 NaCl 溶液物质的量浓度为2 mol/L 的目的是_。(4)图 C 所示加入蒸馏水的目的是_。(5)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA，可用_试剂进行检测，在沸水浴条件下，可以看到颜色反应呈_色。解析：(1)鸡血细胞核内 DNA 含量丰富，材料易得；鸡全血包括血浆，而鸡血细胞液为
18、鸡全血除去血浆后剩下的部分，其中 DNA 含量更高，更易提取。(2)如图 A 所示，向鸡血细胞液中加入蒸馏水，细胞会因吸水涨破而释放出核物质 DNA。(3)如图 B 所示，向滤液中加入物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液后，DNA 溶解而蛋白质析出。 (4)如图 C 所示，向 DNA浓盐溶液中加入蒸馏水，使 NaCl 溶液浓度降低，从而使 DNA 溶解度降低而析出。(5)在沸水浴条件下，DNA 与二苯胺反应呈蓝色。答案：(1)DNA (2)使血细胞吸水涨破，释放出核物质 DNA (3)使 DNA 溶解于 NaCl 溶液中 (4)使 DNA 因溶解度下降而析出 (5)二苯胺 蓝随堂
19、基础巩固 1在混合物中提取 DNA 分子的基本思路是( )A根据各种大分子的理化性质的差异B根据各种大分子的理化性质的共性C根据各种大分子在细胞内的功能- 8 -D根据各种大分子的结构和在细胞内的位置解析：选 A 提取生物大分子的基本思路是：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。DNA 分子的粗提取是利用 DNA 与蛋白质等其他成分在物理和化学性质方面的差异进行分离的。2下列不宜选作 DNA 粗提取材料的是( )A洋葱表皮细胞 B鲜豌豆种子C人成熟的红细胞 D猪肝解析：选 C 用于 DNA 粗提取的材料应具备的条件是细胞中要含有 DNA，且 DNA 的含量要丰富，A、
20、B、D 三项都符合要求。人成熟的红细胞无细胞核，不含 DNA，所以不宜选作实验材料。3向溶有 DNA 的物质的量浓度为 2 mol/L 的 NaCl 溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程中 DNA 和杂质蛋白质等的溶解度变化情况分别是( )A减小、减小 B增大、增大C先减小后增大、增大 D减小、增大解析：选 C DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中 DNA 的溶解度最小；蛋白质的溶解度随 NaCl 溶液浓度的降低而逐渐增大。4(江苏高考)下列关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是( )A酵母和菜花均可作为提取 D
21、NA 的材料BDNA 既溶于 2 mol/L NaCl 溶液也溶于蒸馏水C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物DDNA 溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后变蓝解析：选 C 原则上含 DNA 的生物材料都可用来提取 DNA，只是选用 DNA 含量高的生物组织，成功的可能性更大；DNA 在 2 mol/L NaCl 溶液和蒸馏水中溶解度都较大；向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，鸡血细胞会吸水破裂，但在蒸馏水中不会析出 DNA；DNA 溶液加入二苯胺试剂后需沸水浴加热，待冷却后溶液变蓝。5在 DNA 粗提取与鉴定实验中，若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入
22、洗涤剂和食盐的目的分别是( )利于 DNA 的溶解 分离 DNA 和蛋白质 瓦解细胞膜 溶解蛋白质A BC D解析：选 D 食盐的主要成分是 NaCl，DNA 在一定物质的量浓度的 NaCl 溶液中易溶解，加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜。6在蛋白质和 DNA 的混合液中，要想得到较纯的 DNA，可采用的方法有( )- 9 -向混合液中加入足量的蒸馏水向混合液中加入 DNA 水解酶向混合液中加入冷的体积分数为 95%的酒精溶液向混合液中加入蛋白酶A BC D解析选 B DNA 分子在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，在冷的酒精溶液中可析出，据此可将 DNA 和蛋
23、白质分离；蛋白酶可将蛋白质水解成可溶性的多肽，从而将蛋白质与 DNA 分离。7如图为 DNA 粗提取实验过程中的一些重要步骤，据图回答：(1)正确的操作顺序是_。(2)图中步骤 C、E 都加入蒸馏水，但加入的目的不同，分别是_和_。(3)图中步骤 A 中所用的酒精必须经过_才能使用，该步骤的目的是_。解析：DNA 粗提取的过程：鸡血细胞加蒸馏水,涨破后过滤 用 2 mol/L 的 NaCl 溶液溶解 过滤除去不溶杂质加蒸馏水,析出含 DNA 的黏稠物 过滤 黏稠物溶解在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中 过滤 95%的酒精中进一步提纯。根据图示及以上分析，正确的操作顺序为 CBEDA。答案
24、：(1)CBEDA (2)加速血细胞的破裂 降低 NaCl 溶液的浓度，使 DNA 析出 (3)充分预冷处理 提取含杂质较少(或较纯净)的 DNA课时跟踪检测 一、选择题1下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的相关叙述，错误的是( )A可以选择 DNA 含量较高的生物组织为材料，如鸡的血细胞BDNA 不溶于酒精，且在 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中析出C可以利用嫩肉粉把杂质多糖和 RNA 去除- 10 -D洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液解析：选 C 鸡血细胞中含有 DNA，可作为提取 DNA 的生物材料，不可选用哺乳动物成熟的红细胞；DNA 不溶于酒精，且 NaCl
25、溶液浓度为 0.14 mol/L 时 DNA 溶解度最小，两者均可将 DNA 大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可将蛋白质水解，从而除去蛋白质；洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液。2 “DNA 的粗提取与鉴定”实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含 DNA 的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水，其作用分别是( )A防止鸡血细胞失水皱缩和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出B防止鸡血细胞失水皱缩和溶解 DNAC使鸡血细胞吸水涨破和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出D使鸡血细胞吸水涨破和溶解 DNA解析：选 C 第一次加蒸馏水的目的是使
26、鸡血细胞涨破，释放出核 DNA，第二次加蒸馏水的目的是将 NaCl 溶液浓度降低到 0.14 mol/L，使 DNA 析出。3某同学用洋葱进行 DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是( )A加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNAC加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析：选 A 加入洗涤剂后，搅拌动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作；用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质，可纯化过滤后研磨液中的DNA；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证 DNA 分子不断裂，保持其完整性；加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜
27、色反应。4若从植物细胞中提取 DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时颜色反应不明显等。其可能的原因是( )植物细胞中不含 DNA 研磨不充分 过滤不充分 冷酒精的量过大A BC D解析：选 D 研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全，提取的 DNA 量变少；过滤不充分也会导致提取的 DNA 量过少；若用于沉淀 DNA 的酒精量过少，也会导致 DNA 的沉淀量少，从而影响实验效果。5在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，如果实验材料是植物细胞，需要进行研磨并搅拌。下列相关说法正确的是( )A在切碎的植物材料中加入一定量的洗涤剂和蒸馏水，充分研磨后过滤获取滤液B加入洗涤剂
28、是为了瓦解细胞膜和核膜- 11 -C要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解D先加入洗涤剂，搅拌和研磨后再加入食盐解析：选 B 提取植物材料中的 DNA 时，需在切碎的组织中加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜和核膜，以利于 DNA 的释放，同时要进行充分地搅拌和研磨，使 DNA 完全释放。搅拌时应轻缓、柔和，避免产生大量泡沫，不利于后续操作。6下表是关于 DNA 的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是( )选项 试剂 操作 作用A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 有利于血液凝固B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状C 蒸馏水加入溶解有 DNA 的NaCl 溶
29、液中析出 DNA 丝状物D 冷却的酒精加入过滤后的 NaCl溶液中产生特定的颜色反应解析：选 C 在 DNA 的粗提取与鉴定实验中，柠檬酸钠可以防止血液凝固；鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂；DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，有利于 DNA 析出；DNA 不溶于酒精，而蛋白质溶于冷却的酒精可以获得较纯的 DNA，DNA 遇二苯胺(沸水浴加热)呈蓝色。7DNA 粗提取与鉴定实验中有以下过滤：过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；过滤含黏稠物的 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液；过滤溶解有 DNA 的
30、2 mol/L 的 NaCl 溶液，以上过滤分别为了获得( )A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液B含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、含 DNA 的滤液C含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD含较纯的 DNA 滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液解析：选 A 用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含 DNA 和其他物质如蛋白质的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤的相继处理，方能得到较纯的 DNA。DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最低，呈丝状黏稠物，经过滤留在纱布上。8下列关于“D
31、NA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是( )A洗涤剂能瓦解细胞膜并增大 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度B将 DNA 丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取D用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少- 12 -解析：选 C 洗涤剂能瓦解细胞膜，但对 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度无影响；DNA 丝状物需先溶解在适宜浓度的 NaCl 溶液中，然后加入二苯胺试剂，混合均匀后沸水浴加热，待冷却后观察到溶液变蓝；常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使 DNA 水解而影响 DNA 的提取；用玻璃棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对 DNA 分子的破坏
32、，有利于 DNA 分子的提取。9下列与析出 DNA 黏稠物有关的叙述，错误的是( )A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低 DNA 的溶解度B在操作时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证 DNA 分子完整C加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度，两者均可析出D当丝状黏稠物不再增加时，NaCl 溶液的物质的量浓度约等于 0.14 mol/L解析：选 C 向含有 DNA 的溶液中加入蒸馏水后，NaCl 溶液的浓度会变小，当 NaCl 溶液的物质的量浓度为 0.14 mol/L 时，DNA 溶解度最小，而此时蛋白质溶解在 NaCl 溶液中。10在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是(
33、)A用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L，滤去析出物B调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，可去除部分杂质C将丝状物溶解在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：选 B 用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L 后，过滤并收集析出物；利用二苯胺试剂鉴定 DNA 时，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血作为实验材料，需加入洗涤剂和食盐，并对材料进行研磨。调节 NaCl 溶液浓度改变不同物质在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质。二、非选择题11如图是“DNA
34、 粗提取与鉴定”相关实验步骤。请据图分析回答：(1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_。从鸡血细胞中释放出核物质的处理方法是_。(2)图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取_(填“滤液”或“析出物”)进行下一步实验；图 B 表示的相关操作过程中，加入 2 mol/L NaCl 溶液的作用是_；图 C 表示在滤液中加入冷却的 95%的酒精，其目的是_。(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA，可滴加_溶液，结果丝状物被染成- 13 -绿色。(4)图 D 中 a 试管为对照组，b 试管为实验组。a 试管现象_；b 试管现象_。在沸水中加热的目的是_，同时说明 DNA 对
35、高温有较强的_。a 试管在实验中的作用是_。b 试管中溶液颜色的变化程度主要与_有关。解析：图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，纱布上的过滤物主要是细胞膜、核膜的碎片等杂质，而 DNA 主要存在于下面的滤液中，所以过滤后应取滤液进行下一步实验。DNA不溶于冷酒精，而其他一些物质可以溶于冷酒精，从而可进一步提纯 DNA。甲基绿为比较常用的细胞核染色剂，染色后细胞核中染色体呈绿色，可以用来鉴定 DNA。答案：(1)鸡血细胞核中 DNA 含量丰富，材料易得 向鸡血细胞溶液中加入蒸馏水，并搅拌 (2)滤液 溶解 DNA 分子 提取杂质更少的 DNA(或去除脂溶性杂质) (3)甲基绿 (4)溶液不变
36、蓝 溶液变蓝 加快颜色反应速度 耐受性 对照 加入 DNA(丝状物)的多少12如图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料 A 可以是_等，研磨前加入的 B 应该是_。(2)通过上述所示步骤得到滤液 C 后， 再向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液的目的是_，再过滤得到滤液 D，向滤液 D 中加入蒸馏水的目的是_。(3)在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的 DNA 丝状物分别放入体积为 2 mL 的 4 种溶液中，经搅拌后过滤，获得下表所示的 4 种滤液，含 DNA 最少的是滤液_。1 研磨液中 搅拌研磨后过滤 滤液 E22 mol/L 的 N
37、aCl溶液中搅拌后过滤 滤液 F30.14 mol/L 的 NaCl溶液中搅拌后过滤 滤液 G4冷却的 95%的酒精溶液中搅拌后过滤 滤液 H(4)DNA 鉴定的原理是_。解析：选用洋葱、菜花等植物材料提取 DNA 时，要在切碎的材料中加入一定的洗涤剂和- 14 -食盐，进行充分的搅拌和研磨；DNA 在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度较高，而在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最小。向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液可以使 DNA 溶解，过滤除去不溶的杂质。向滤液中加入蒸馏水可降低 NaCl 溶液的浓度，使 DNA 析出，除去溶解在低盐溶液中的杂质；D
38、NA 不溶于冷酒精，可利用这一原理进一步提纯 DNA；鉴定 DNA 的原理是在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。答案：(1)洋葱、菜花 洗涤剂和食盐 (2)使 DNA 溶解 使 DNA(溶解度下降而沉淀)析出 (3)H(4)在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色13临床上常利用血液中的 DNA 进行身份鉴定、基因诊断等，但血液中 DNA 含量少、不易提取。为了从血液中获取更多的 DNA，科研人员以大鼠血液为材料，尝试比较两种提取DNA 的方法，主要操作如下：实验结果(表中 OD260反映溶液中核酸的浓度，OD 280反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度，理论上，纯 DNA 溶液的
39、OD260/OD280为 1.8)：提取方法 OD260 OD280 OD260/OD280DNA 含量(g/mL 血液)方法 A 0.304 0.188 1.62 38方法 B 0.612 0.420 1.46 76.5试回答下列问题：(1)补全相关实验步骤：_，_。(2)实验中利用异丙醇溶液纯化 DNA 的原理是_。(3)与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的 DNA 总是很少，这是因为_。(4)两种方法中，OD 260/OD280均低于 1.8，主要原因是_；- 15 -其中方法 A 的 OD260/OD280更接近 1.8，原因是_。(5)根据实验结果，从人血液中提取 DNA
40、 时应优先选择方法_(填“A”或“B”)。解析：(1)DNA 在 2mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最大，应取上清液；DNA 不溶于酒精，细胞中的某些蛋白质溶于酒精，为沉淀物。(2)实验中利用异丙醇溶液纯化 DNA 的原理是DNA 不溶于异丙醇，有些杂质溶于异丙醇。(3)与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的 DNA 总是很少，这是因为哺乳动物血液中红细胞无细胞核，只有白细胞内有DNA。(4)两种方法中 OD260/OD280均低于 1.8，主要原因是溶液中混有较多的蛋白质；其中方法 A 的 OD260/OD280更接近 1.8，原因是蛋白酶 K 能催化部分蛋白质的水解。(5)根据实验结果，由于 B 方法获得的 DNA 含量较多，故从人血液中提取 DNA 时应优先选择方法 B。答案：(1)上清液 沉淀物 (2)DNA 不溶于异丙醇，而有些杂质能溶解 (3)哺乳动物血液中只有白细胞内有 DNA(或哺乳动物红细胞中无细胞核) (4)溶液中混有较多的蛋白质 蛋白酶 K 能催化部分蛋白质的水解 (5)B
