1、ICS 6720010X 14 雷雪中华人民共和国国家标准GBT 553512008IS0 3596：2000代替GBT 553511998动植物油脂 不皂化物测定第1部分：乙醚提取法Animal and vegetable fats and oils-Determination of unsapOnifiable matterPart 1：Method using diethyl ether extraction200808-22发布(IS0 3596：2000，IDT)20081201实施宰瞀徽鬻瓣警糌瞥霎发布中国国家标准化管理委员会仪19前 言GBT 55351-2008ISO 3596
2、：2000GBT 5535(动植物油脂不皂化物测定分为两个部分：第1部分：乙醚提取法；第2部分：己烷提取法。本部分为GBT 5535的第1部分。本部分等同采用ISO 3596：2000(动植物油脂不皂化物测定乙醚提取法(英文版)。为了便于使用，本部分对ISO 3596：2000进行了下列编辑性修改：删除国际标准的前言；将“本国际标准”改为“本部分”；用小数点“”代替原文中作为小数点的“，”；用GBT 1 5687代替原国际标准中的ISO 661。本部分自实施之日起代替GBT 55351-1998(动植物油脂不皂化物测定第1部分：乙醚提取法(第一方法)。本部分的附录A为资料性附录。本部分由国家粮
3、食局提出。本部分由全国粮油标准化技术委员会归口。本部分起草单位：武汉工业学院。本部分主要起草人：姚理、何东平、张世宏、宫智勇、胡小泓、黄小平。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：GBT 5535 1985、GBT 55351 1998。GBT 55351-20081IS0 3596：2000动植物油脂不皂化物测定第1部分：乙醚提取法1范围GBT 5535的本部分规定了用乙醚提取法测定动植物油脂不皂化物含量的方法。本部分适用于一般动植物油脂不皂化物含量的测定。本部分不适用于蜡。对于某些不皂化物含量高的油脂，如海产动物油脂，仅能得到近似结果。当气候条件或规定不允许使用乙醚时，可使用GBT 553
4、52的方法。2规范性引用文件下列文件中的条款，通过在GBT 5535的本部分中引用而成为本部分的条款。凡是注目期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GBT 15687油脂试样制备(GBT 15687-1995，eqv ISO 661：1989)3术语和定义下列术语和定义适用于GBT 5535的本部分。31不皂化物 unsaponifiable matter用氢氧化钾皂化后的全部生成物用指定溶剂提取，在规定的操作条件下不挥发的所有物质。4原理
5、油脂与氢氧化钾乙醇溶液在煮沸回流条件下进行皂化，用乙醚从皂化液中提取不皂化物，蒸发溶剂并对残留物干燥后称量。5试剂本部分使用的试剂均为分析纯，水为蒸馏水、去离子水或等同纯度的水。51乙醚：新蒸过，不含过氧化物和残留物。52丙酮。53氢氧化钾一乙醇溶液：c(KOH)一1 molL。在50 mL水中溶解60 g氢氧化钾，然后用95(体积分数)乙醇稀释至1 000 mL。溶液应为无色或浅黄色。54氢氧化钾水溶液：c(KOH)-05 molL。55酚酞指示剂溶液：10 gL的95(体积分数)乙醇溶液。6仪器实验室常用仪器，特别是下列仪器：61 圆底烧瓶：带标准磨口的250 mL圆底烧瓶。62 回流冷凝
6、管：具有与烧瓶(61)配套的磨口。lGBT 55351-2008ISO 3596：200063 500 mL分液漏斗：使用聚四氟乙烯旋塞和瓶塞。64水浴锅。65电烘箱：可控制在1032。7扦样扦样不是本部分规定的内容，推荐采用ISO 5555的方法。实验室收到的样品应具有代表性，在运输和存储过程中不应受损或改变。8试样制备按GBT 15687执行。9操作步骤91试样称取约5 g试样(第8章)，精确至001 g，置于250 mL烧瓶中(61)。92皂化加入50mL氢氧化钾一乙醇溶液(53)和一些沸石。烧瓶与回流冷凝管(62)连接好后，小心煮沸回流1 h。停止加热，从回流管顶部加入100 mL水并
7、旋转摇动。如果提取的不皂化物用于测定生育酚，则必须添加联苯三酚且尽快地完成操作(30 rain以内)。93不皂化物的提取冷却后转移皂化液到500 mL分液漏斗(63)，用100 mL乙醚(51)分几次洗涤烧瓶和沸石，并将洗液倒入分液漏斗。盖好塞子，倒转分液漏斗，用力摇1 min，小心打开旋塞，间歇地释放内郡压力。静置分层后，将下层皂化液尽量完全放人第二只分液漏斗中。如果形成乳化液，可加少量乙醇或浓氢氧化钾或氯化钠溶液进行破乳。采用相同的方法，每次用i00 mL乙醚再提取皂化液两次，收集三次乙醚提取液放人装有40 mL水的分液漏斗中。94乙醚提取液的洗涤轻轻转动装有提取液和40 mL水的分液漏斗
8、。警告：剧烈的摇动可能会形成乳化液。等待完全分层后弃去下面水层。用40 mL水再洗涤乙醚溶液两次，每次都要剧烈震摇，且在分层后弃去下面水层。排出洗涤渡时需留2 mL，然后沿轴线旋转分液漏斗，等待几分钟让保留的水层分离。弃去水层，当乙醚溶液到达旋塞口时关闭旋塞。用40 mL氢氧化钾水溶液(54)、40 mL水相继洗涤乙醚溶液后，再用40 mL氢氧化钾水溶液进行洗涤，然后用40 mL永洗涤至少两次以上。继续用水洗涤，直到加人1滴酚酞溶液(55)至洗涤液后，不再呈粉红色为止。95蒸发溶剂通过分液漏斗的上口，小心地将乙醚溶液全部转移至250 mL烧瓶(61)中。此烧瓶需预先于103 oC土2的烘箱(6
9、5)中干燥，冷却后称量，精确至01 mg。在沸水浴(64)上蒸馏回收溶剂。加入5 mL丙酮，在沸水浴上转动时倾斜握住烧瓶，在缓缓的空气流下，将挥发性溶剂完全蒸发。96残留物的干燥和测定961将烧瓶水平放置在103士2的烘箱(65)中，干燥15 min。然后放在干燥器中冷却，取出称量，准确至01 mg。按上述方法间隔15 mln重复干燥，直至两次称量质量相差不超过15 mg。如果三次干燥后还不恒质，则不皂化物可能被污染，需重新进行测定。2GBT 55351-2008ISO 3596：2000注：如果条件允许，尤其是如果不皂化物需要进一步检测时，可使用真空旋转蒸发器。962当需要对残留物中的游离脂
10、肪酸进行校正时，将称量后的残留物溶于4 mL乙醚中，然后加入20 mL预先中和到使酚酞指示液(55)呈淡粉色的乙醇。用01 molL标准氢氧化钾醇溶液滴定到相同的终点颜色。以油酸来计算游离脂肪酸的质量，并以此校正残留物的质量(第i0章)。97测定次数同一试样需进行两次测定。98空白试验用相同步骤及相同量的所有试剂，但不加试样进行空白试验。如果残留物超过15 mg，需对试剂和方法进行检查。10结果计算试样中的不皂化物含量按式(1)计算X T21-7T12-771,3100 m0式中：x试样中不皂化物的含量，以质量分数计，；m。试样的质量，单位为克(g)；m，残留物的质量，单位为克(g)；m：空白
11、试验的残留物质量，单位为克(g)；m。游离脂肪酸的质量，如果需要，等于028 VX C，单位为克(g)其中：v一一滴定所用标准氢氧化钾乙醇溶液的体积，单位为毫升(mL)；c氢氧化钾乙醇标准溶液的准确浓度，单位为摩尔每升(toolL)。用两次测定数据的算术平均值作为结果。11精密度附录A汇总了本方法精密度的实验室问测试情况。从这些测试中得到的值可能不适用于其他浓度范围和其他测试对象。12测试报告测试报告需说明：测试样品所需的所有有关信息；若已知采样方法，则注明；采用的检验方法及引用标准；本部分中没有具体说明的或者被认为是可选性的，以及所有可能影响结果的操作细节测定结果，如果进行了重复性试验，则列
12、出最终结果。3GBT 55351-2008ISO 3596：2000附录A(资料性附录)实验室间测试结果A1 16个国家51个实验室参与了联合实验，使用乙醚法对下列样品进行了测试样品A：碱炼，脱色，脱臭大豆油；样品B：干燥后的水化脱胶原油。此测试由英国国际油、油料、脂肪联合协会(FOSFA)于1995年组织实施，所得的结果按照ISO 5725进行了统计分析，其数据见表A1。表A1测试结果统计分析大豆油样品参 数A B去除偏离值后的测试实验室数 49 50平均值 o58 o69重复性的标准偏差(s。) o025 o027重复性的变异系数 43 39重复性限值(r) 007 008再现性标准偏差(
13、S。) 022 024再现性变异系数“ 379 347再现性限值(R) 062 067A2另一次联合实验在1989年7月由17个国家43个实验室参与，使用乙醚法对El本鱼油进行测试。此测试由英国国际油、油料、脂肪联合协会(FOsFA)组织实施，所得的结果按照ISO 5725进行了统计分析，其数据见表A2。表A2测试结果统计分析参 数 鱼 油去除偏离值后的测试实验室数 37平均值 081重复性的标准偏差(S。) 002重复性的变异系数“ 246重复性限值(r) 006再现性标准偏差(sn) 029再现性变异系数 358再现性限值(R) 081A3第三次由10个实验室参与的联合实验由国际纯化学与应
14、用化学联盟(1uPAc)油、油料、脂肪联合协会(F0sFA)于1976年至1997年问组织实施，所得的结果按照ISO 5725进行了统计分析，其数据见表A3。4表A3测试结果统计分析GBT 55351-2008SO 3596：2000参 数 精炼大豆油 精炼牛脂 菜籽原油去除偏离值后的测试实验室数 10 lO lO平均值 0630 0253 1432重复性的标准偏差(s，) 0032 0024 0068重复性的变异系数 50 93 019重复性限值(r) 0089 0067 019再现性标准偏差(SR) 0140 0154 0137再现性变异系数 223 609 96再现性限值(R) 0397
15、 0435 03895GBT 55351-2008Is0 3596：2000参考文献1lsO 5555 Animal and vegetable fats and oils-Sampling2ISO 5725-1986 Precision of test methods-Determination of repeatability and reproducibilityfor a standard test method by interlaboratory tests3GBT 55352动植物油脂不皂化物测定第2部分：己烷提取法(GBT 55352 2008，IS0 18609：2000，IDT)6
