1、中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验鲜乳中抗生素残留量检验Microbiological examination of food hygiene Examlnati。nof residue of antibiotics In fresh milk 1 主题内容与适用范围本标准规定了鲜乳中抗生素残留量的检验方法。本标准适用于能杀灭嗜热乳酸链球菌的各种常用抗生素的检验。2设备和材料2. 1 水浴。2.2 温箱。2-3锅2.4 100温度计。2. 5蜡笔。2.6 试管架。2. 7灭菌吸管,JOmLo2-8 灭菌吸管zI mL。2.9 灭菌试管,15mm 150 mmo 3 菌种、培鼻基和试剂3
2、. 1 菌种2嗜热乳酸链球菌。3. 2脱脂乳z经113灭菌20minoGB 4 789. 27-94 代替GB4789. 27 84 3. 3 4% 2,3,5氯化三苯四氮嗖(TTC)水溶液:称取IgTTC,溶于5mL灭菌蒸馆水中,装褐色瓶内于7冰箱保存,临用时用灭菌蒸馆水稀释至5倍。如遇溶液变为王色或淡褐色,则不能再用。4检验程序鲜乳中抗生素残留检验程序如下2中华人民共和国卫生部1994-03-18批准1994-09 01实施493 GB 4789. 27 94 检样80加热5皿n陪却37以下加菌植,36士1水浴血显包者抗生章阴性加TTC指示剂,36士1水榕30min虹包36土1水豁30mi
3、n不匾色者抗生章阳性抗生章阴性报告报告5操作步骤5. 1 菌液制备z将菌种移种脱脂乳,经361培养15h后,以灭菌脱脂乳1: 1稀释待用。5.2 取检样9mL,置15mm 150 mm试管内,80水浴加热5min冷却37以下,加菌液1mL,36 士ic水浴培养2h,加TTCO.3 mL ,36土1水浴培养30min,观察如为阳性,再于水浴中培养30min 作第二次观察,每份检样作二份,另外再作阴性和阳性对照各一份,阳性对照管用无抗生素的乳BmL 加抗生素及菌液和TTC。阴性对照管用无抗生素乳9mL加菌液和TTC。5. 3 判断方法:准确培养30min观察结果,如为阳性,再继续培养30min作第
4、二次观察。观察时要迅速,避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在,则检样中虽加入菌液培养物,但因细菌的繁殖受到抑制,因此指示剂TTC不还原,不显色。与此相反,如果没有抗生素存在,则加入菌液即行增殖,TTC被还原而显红色,也就是说检样呈乳的原色时为阳性,呈红色为阴性。表1显色状态判断标准显色状态判断未显色者微红色者桃红色红色性疑性阳可阴494 GB 4789. 27-94 表2检测各种抗生素的灵敏度抗生素名称最低检出量素索素萦霉霉霉霉大那青链庆卡0.004单位0.5单位0.4单位5单位附加说明z本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由上海市食品卫生监督检验所负责起草。本标准主要起草人徐用宽。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。495