1、 北 京 市 地 方 标 准 DB 虹鳟养殖技术规范 第 3部分：人工繁殖技术 Technical specifications for rainbow trout culture Part 3: Artificial propagation techniques 2008-11-14发布 2009-03-01实施 北京市质量技术监督局发布DB11/T 157.32008 代替 DB11/T 157.3 2002 ICS 65.150 B 52 备案号：23802-2009 DB11/T 157.3 2008 I 前 言 为保证虹鳟养殖环境、养殖过程、养殖产品符合国家无公害水产品安全要求，特制
2、订 DB11/T 157 虹鳟养殖技术规范，本标准分为九个部分： 第 1部分：亲鱼； 第 2部分：亲鱼培育技术； 第 3部分：人工繁殖技术； 第 4部分：鱼苗培育技术； 第 5部分：成鱼池塘养殖技术； 第 6部分：成鱼网箱养殖技术； 第 7部分：防疫； 第 8部分：常见病诊治与安全用药； 第 9部分：全价配合颗粒饲料。 本部分为 DB11/T 157的第 3部分。 本部分代替并废止 DB11/T 157.32002 虹鳟鱼养殖技术规范 第 3部分：人工繁殖技术。 本部分与 DB11/T 157.32002 相比主要变化如下： 增加了术语和定义部分； 增加采用溢流桶式孵 化器进行 人工授精 的技
3、术要求； 增加了单盐等渗液配 方； 增加了微流 水吸水膨胀 与 流 水孵 化 连续作业操作 技术； 增加了 4细胞期受精率检测技术； 孵化稚鱼管理 增加了 直流式出膜 饲育槽 ； 增加了孵化 及稚鱼饲育 排出水 溶解氧应达 6.5 /L以上 的要求； 增加了术语孵化 稚鱼； 增加孵化最佳 水 温 要求； 根据生产实际 ， 调整孵 化 管理 、发眼卵运输、孵 化稚 鱼管理等技术 内容。 本部分附录 A、B 是规范 性附录 ，附录 C是资 料 性附录 。 本部分由北京市怀柔区质量技术 监督局提出。 本部分由北京市农业 标准化技术 委员会 养殖业分 会归口 。 本部分起草单位：北京顺通虹鳟鱼养殖 中
4、心。 本部分主要 起草人： 沈希顺、 王昭明、 黄剑锋、 杨玛丽 。 DB11/T 157.3 2008 1 虹鳟养殖技术规范 第 3部分：人工繁殖技术 1 范围 本部分规定了虹鳟养殖技术的亲鱼选择 和鉴别 、 采精 、 采卵 、人工授精 、 孵化、 发眼卵运输 、 孵化 稚 鱼的管理 。 本部分适用 于虹鳟的人工繁殖。 2 规范性引用文件 下列文件中 的条款通 过DB11/T 157的引 用而成为本部分的条款 。 凡是注日 期 的引 用 文件 ， 其随后所 有的修改单 （不包括勘误的内容 ）或修 订版均不适 用于 本标准， 然而 ， 鼓励 根据本标准 达 成协议的各 方 研究是否可使 用 这
5、些文件的最 新版本。 凡是不注日 期的 引 用 文件 ，其最新版 本 适 用于 本标准。 NY 5051 无公害食品 淡水养殖用水水 质 DB11/T 157.1 虹鳟养殖技术规范 第1 部分：亲鱼 3 术语和定义 下列术语和定 义 适 用于 本部分。 3.1 敏感期 sensitive period 成熟卵实施授精 后1个小时 期间和第6d 9d（水温 10），对振动很敏感，易引 起死亡， 此期间为 胚胎发育敏感 期 。 3.2 发眼卵 eyed egg 受精卵胚体 眼泡视网 膜上形成 黑色素时， 肉 眼可观察到黑色眼点， 此后到稚鱼 孵出之前 的卵， 称为 发眼卵。 3.3 孵化稚鱼 sa
6、c-fry(alevin) 孵出的稚鱼， 孵出 前 已经完 成了仔 鱼发育， 背鳍褶上 已经具备了标 志种的分 类 特 征的 鳍 条 原基 ， 不 摄 食 ， 依赖 卵黄囊的 营养进行 早期发育， 称 为 孵化 稚鱼。 3.4 孵化积温 temperature-day-degree 日均水温与 孵化天数 之积为孵 化积温， 以“ d”表示，也称 发育积温 。 4 亲鱼选择和鉴别 4.1 临产亲鱼的选择 用作繁殖的亲鱼的形 态特征应 符合DB11/T 157.1 的规定。 4.2 雌、雄亲鱼鉴别 雌鱼口小， 吻端部发 圆。雄鱼 口大，吻尖 。 4.3 成熟度鉴别 DB11/T 157.3 200
7、8 2 性成熟雌鱼， 腹部膨 大柔软， 生 殖孔红肿外突， 上提尾柄时, 两侧 卵 巢 下垂轮廓明 显， 轻压腹 部 有 卵 粒 流出。 性成熟雄 鱼腹部较硬 ， 轻压腹 部 有 乳白 色精液流出。 繁殖期内每隔 7d进行 一次成熟 度鉴别， 对已成熟 的雌 鱼应及时采卵 。 5 采精 5.1 每 1万粒卵 需精液 10ml。要 根据 当天的 计划采卵量 确定 采精量。为保证受精率， 同一 授精批次 的 卵 所 需 精液应采自 23 尾雄鱼。 5.2 采精前将雄 鱼体表水分 擦净， 轻压 生殖孔前 上方， 挤 出尿液、 粪便后 再将精液 挤入干燥 的容器中 ， 置 14 条件下保 存备用。 5
8、.3 采过精液的 雄鱼,7d 8d后可 再次采精 。 6 采卵 6.1 采卵前擦净雌 鱼 体 表的水分， 轻压生殖 孔前上方 ，挤 出尿液和粪便 。 6.2 轻压生殖孔 前上方， 将卵挤入孔径 2.5mm的 采卵 网盆 中。 6.3 对于个别雌 鱼，为了避免因 其 挣扎 采出碎卵 ， 可 预先 用 0.3ml/L的乙二醇苯醚 （C 6H5OCH2CH2OH） 水 溶液麻醉 3min 5min。 7 人工授精 7.1 用等渗液淋浴采卵 网 盆 中 的卵 ， 洗除 粪便、血液 、体 腔液等。然后将 卵倒入干燥 的授精盆 。等渗 液配方见附录 A。 7.2 按每 1万粒 卵加 10ml精液的量 将事
9、先备 好的精液 加入 授精盆。 也 可将精液 从雄鱼体 直接挤入 授精 盆。用手快速 将 精卵 拌均匀。 7.3 向授精盆内 加入相当 卵量 1.5倍以上的 清水， 同 时轻轻 拌匀， 2min3min 后将水倒 出。 再反复 加 入 清 水 2 3次 ， 洗除多余的精液 。 7.4 精、卵接触 之前，两 者均不可 遇水。从 采卵、授精 至加水应控制 在 2min 3min之内 完成。 7.5 将授精后的卵在清 水 中 静置 60min， 待卵吸水膨胀 后装 入 孵 化 器进行流 水 孵 化。 采用溢流桶式孵 化器的，可 将授精后 的卵直接倒 入 孵 化桶 ， 使 卵在 微流 水环境下 完成吸
10、水 膨胀，同 时冲出多余 的 精液。 一小时之内 注水量保 持在 3L/min。 7.6 适当时机应进行受精率 的 计 测及受精卵 的计数， 方法 见附录 B.2。 8 孵化 8.1 孵化设备 宜使用溢流桶式孵化 器（孵化 桶），见 附录 C.1。 8.2 孵化条件 8.2.1 孵化桶应放 置在有遮光 和防震 条件的孵 化室内进行流 水孵化。 8.2.2 孵化用水除 符合 NY 5051的规定外 ，水质要 澄清，注 入水与溢出 水溶氧量应 分 别 高于 8.5 mg/L 和 6.5mg/L。 8.2.3 适宜水温为 213 。孵化 最佳水温 为 713 。 8.3 孵化时间 从授精至孵出 ，
11、需 孵化 积 温 320 d左右 ， 从授精 至发眼的积 温数约为 孵化积温 的一半。 8.4 孵化管理 8.4.1 溢流式孵化 桶， 每桶可 孵化 5万粒 卵， 孵化开始至发眼期 注 水 量 要 从 3L/min逐渐 增加到 5L/min。 排出水溶解氧量应达 6.5/L 以上。 DB11/T 157.3 2008 3 8.4.2 将亚甲基蓝 制成 0.005mg/L水 溶液， 从注水口 注入孵 化桶内， 每 周 2次 ， 每次 持续 1h， 可控制 水霉菌的滋 生。 8.4.3 授精后 1h之内和受精 后 24h至 发眼期，特 别是授精 后第 6d9d 之间（ 水温 910） 受精 卵敏感
12、期阶段 要防止 卵震动。 8.4.4 孵化积温达 220 d， 进 入发眼中 期时， 将发眼卵 倒 入拣卵槽内 拣除死卵 ， 计数 死卵数并 计算 发眼率 （总卵数 与死卵数 之差占总 卵数的百 分率） 。 然后将发眼卵 移 入 稚鱼 出膜孵 化槽或进行发眼卵运 输 。 8.4.5 孵化期间及稚 鱼 孵出 后 2周之 内，应避免 直 射光照射 。 9 发眼卵运输 9.1 运卵箱与包装 9.1.1 运卵箱采用 泡沫塑料箱，箱 底 与 四周放置潮湿 的 软 泡沫塑料。 将 24 只总重 12 的塑料 冰袋塞于箱 内四角。 9.1.2 把卵分装于 多孔 （ 孔径 3mm） 聚乙烯袋 中 ， 将 卵
13、袋放 入箱内， 冰袋 与 卵袋 间 隔 以潮湿泡沫塑 料。 卵袋上放一 层潮湿泡 沫塑料，加 盖封箱 即可启运 。 9.2 运卵注意事项 9.2.1 最适运卵时 机是发眼 中期（孵 化积温 220 d280 d） 的 卵， 运输时间 超 过 4d的， 不宜 运输发眼后 期（孵化 积温 280d320 d）的 卵。 9.2.2 装箱前参照 附录 B.1计测卵数 。 9.2.3 运途中要防止 剧烈震 动。 9.2.4 箱内温度保 持在 5 1， 可 安全运输 5昼夜。 当运输 时间长或 气温高时 ， 应适时 检查箱内 冰 块融化和温 度情况并 及时补充 冰块。 9.2.5 运抵卵移入 出膜孵化 槽
14、时，要 经调温使 箱内温度 与孵 化槽水温相 近，防止 温差大于 3。 10 孵化稚鱼的管理 10.1 采用反冲式 平列槽或 直流式出膜 饲育槽进行出膜孵 化和 孵 化 稚 鱼饲育。 平列 槽与出膜 饲育槽构造 见 附录 C.2与 C.3。 10.2 将发眼卵放 入平列槽 的出膜孵 化盘或直流式出膜 饲育 槽内，加盖 遮光。 10.3 每只孵化盘 放卵(苗)8000 粒( 尾),每万 粒 （尾）注 水 量 5L/min6L/min。 直流式出膜 饲育槽每 平 方米放养 2万粒（尾 ），每万 粒（尾）注 水 量 5L/min6L/min。 10.4 排出水溶解氧应达 6.5 /L以上 。 10.
15、5 及时清除死 卵死苗，保 持 水 流畅 通 。 10.6 稚鱼全部孵出后 第 3d4d ，将直流式出膜饲育槽内的 河 卵 石 清除。 待稚鱼上浮 后，在原槽内进 行开食驯饲。 使 用 平列 槽 的， 待稚鱼上 浮后，即 在孵 化盘内进行 开食驯饲。 DB11/T 157.3 2008 4 附 录 A （规范性附录） 等渗液的配 方 A.1 三盐等渗液 将氯化钠、 氯化钾、 氯化钙 3种盐依次 溶于水中 ，配比见附表 A.1。 表 A.1 三盐 等渗液配比 成分 配比 氯化钠 （ Nacl） 90.4g 氯化钾 （ Kcl） 2.4g 氯 化 钙 （ Cacl 2 H 2 O） 2.6g 水
16、（ H 2 O） 10.0L A.2 单盐等渗液 将食用盐溶 于水中，配比见附 表 A.2。 表 A.2 单盐 等渗液配比 成分 配比 食用盐（氯 化钠 Nacl ） 95 g98g 水 10.0L DB11/T 157.3 2008 5 附 录 B （规范性附录） 虹鳟鱼卵计数 和 受 精率计算 B.1 虹鳟鱼卵计数 将 吸 水 膨胀 后的卵或 发眼卵逐 个排列在 受精卵计数 尺上 ， 先 测出 20cm长 度 的 卵 粒 数 ， 查 表 B.1， 得平均卵径 和每升容 积的卵粒 数，再乘 以卵的实际 升数 ， 即得实际 的 卵 数。 表B.1 虹鳟鱼卵计数对照表 B.2 受精率计算 B.2
17、.1 鉴别液的配制 鉴别液a和鉴别 液 b的配 方 如下 表B.2所示 。 表B.2 鉴别 液a、b的 配方 鉴别液a的配 方 鉴别液b的配 方 福尔马林 5ml 甘 油 6ml 冰 乙 酸 4ml 蒸 镏 水 85ml 福尔马林 3ml 酒 精 6ml 冰 醋 酸 1ml B.2.2 胚体计算法 孵化积温达100 d时，取 一定数量的 卵放入鉴别 液a 中 ， 经 5min后， 可看到白 色线条状胚体 的 卵 即 为 受精卵 。根据受精卵所占 的比例（ 二次观察 平均 值） ，计算出受精率。 B.2.3 四细胞期计算法 日均水温10 条件下， 授精后10h12h ，将20粒 卵浸 入鉴别液b
18、中 ，10min 后置实体 显微镜（40 倍 ） 下 观察。在卵的 一端，4个 细胞大小、 形状相同的为受精卵。细胞大 小相差很 大、呈不规 则排列的，分 辨 不 出细胞 个数的是 未受精卵 。根据二 次观测的 受精卵 数 平 均 值计 算 受精率 。 20cm 卵 数 (粒 ) 28 30 32 34 36 38 40 42 44 46 48 50 平均卵径 mm 7. 14 6. 66 6. 25 5. 88 5. 55 5. 26 5. 00 4. 76 4. 54 4. 34 4. 16 4. 0 卵 数 (粒 /L) 3200 4000 4900 5800 6900 8000 940
19、0 10800 12500 14400 16400 18400 DB11/T 157.3 2008 6 附 录 C （资料性附录） 孵化设备示 意图 C.1 溢流桶式孵化 器示意 图 1、供 水管 2 、 集 水 漏斗 3、注 水管 4 、 孵 化 桶 盖 5、孵 化桶 6 、 孵 化网盆 桶高 29.0cm， 内口 径 30.0cm。 穿 过 桶盖正中安 装一注 水管， 管长 34.7cm，孵化网盆孔径 4 mm 1.2mm， 孵化网盆内口 径 24.9cm， 盆高 11.0cm， 盆口沿卡 在孵 化桶内壁上。 盆底距桶 底 6.5cm， 距桶口 沿 22.0cm， 盆底至桶口 沿之间是 装
20、受精卵 的空间。 孵化用水 通过 集水漏斗注 入注水管， 从上至下 通过注 水管下端 的 三角口注入 桶底，又 从下至上 通过孵化网 盆 内 的受精卵 后 从 桶口 周边溢出 。 C.2 反冲式稚鱼 出膜孵化 及开食驯饲槽（平列槽）示 意图 DB11/T 157.3 2008 7 1、 平 列槽 2、 孵化盘 3、 孔径为 2毫米 的过水 筛 4、 排水管 此槽为玻璃钢 槽 。 槽口 长 300cm， 宽 42cm。槽底 长 298 cm， 宽 40 cm。槽高 17cm。 槽后部有 一直 径 5cm可 上 、下 活 动 、调 节 槽内 水位的排 水管。槽内放 置 6个 孵 化盘 。 孵 化盘 上口 为 42cm42cm， 孵 化盘底为 40cm 40cm。 每只孵 化盘配 一块盖板。 孵 化盘底和后 壁是孔径 2mm的多 孔筛。 孵 化盘后壁 下 部延长出盘 底 2cm。 因后壁下 延部分的 阻挡，水 从孵 化盘的筛孔 进入槽内 ，从后壁筛 孔 流出 。 C.3 直流式稚鱼 出膜孵化 及开食驯饲槽示意 图 1、档水板 2、河 卵石 3、排水口 此槽可以是 玻璃钢槽 ， 也可 以是木槽 或水泥槽 。 槽内口 长 2m、 宽 0.5m、 深 30。 槽上 设 盖板 ， 槽 底 散 放 一 层直 径 约 1.5 2.0 河 卵石 。
