1、- 1 -DNA 的粗提取与鉴定一、选择题1下列关于 DNA 的粗提取与鉴定实验的相关叙述，错误的是( )A可以选择 DNA 含量较高的生物组织为材料，如鸡的血细胞BDNA 不溶于酒精，且在 0.14 mol/L 的氯化钠溶液中析出C可以利用嫩肉粉把杂质多糖和 RNA 去除D洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液解析：选 C 鸡血细胞中含有 DNA，可作为提取 DNA 的生物材料，不可选用哺乳动物成熟的红细胞；DNA 不溶于酒精，且 NaCl 溶液浓度为 0.14 mol/L 时 DNA 溶解度最小，两者均可将 DNA 大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可将蛋白质水解，从而除去蛋白
2、质；洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有 DNA 的滤液。2 “DNA 的粗提取与鉴定”实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含 DNA 的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水，其作用分别是( )A防止鸡血细胞失水皱缩和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出B防止鸡血细胞失水皱缩和溶解 DNAC使鸡血细胞吸水涨破和稀释 NaCl 溶液至 0.14 mol/L 使 DNA 析出D使鸡血细胞吸水涨破和溶解 DNA解析：选 C 第一次加蒸馏水的目的是使鸡血细胞涨破，释放出核 DNA，第二次加蒸馏水的目的是将 NaCl 溶液浓度降低到 0.14 mol/L，使 DNA 析出。3某同学用洋葱进
3、行 DNA 粗提取和鉴定实验，操作错误的是( )A加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的 DNAC加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析：选 A 加入洗涤剂后，搅拌动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作；用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质，可纯化过滤后研磨液中的DNA；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证 DNA 分子不断裂，保持其完整性；加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。4若从植物细胞中提取 DNA，发现实验效果不好，如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时颜色反应不明显等。其可能的原因是( )植物细胞中不
4、含 DNA 研磨不充分 过滤不充分 冷酒精的量过大A BC D- 2 -解析：选 D 研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全，提取的 DNA 量变少；过滤不充分也会导致提取的 DNA 量过少；若用于沉淀 DNA 的酒精量过少，也会导致 DNA 的沉淀量少，从而影响实验效果。5在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，如果实验材料是植物细胞，需要进行研磨并搅拌。下列相关说法正确的是( )A在切碎的植物材料中加入一定量的洗涤剂和蒸馏水，充分研磨后过滤获取滤液B加入洗涤剂是为了瓦解细胞膜和核膜C要快速搅拌产生泡沫以加速细胞膜的溶解D先加入洗涤剂，搅拌和研磨后再加入食盐解析：选 B 提取植物材料中的
5、DNA 时，需在切碎的组织中加入一定量的洗涤剂和食盐。加入洗涤剂的目的是瓦解细胞膜和核膜，以利于 DNA 的释放，同时要进行充分地搅拌和研磨，使 DNA 完全释放。搅拌时应轻缓、柔和，避免产生大量泡沫，不利于后续操作。6下表是关于 DNA 的粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述，正确的是( )选项 试剂 操作 作用A 柠檬酸钠溶液 与鸡血混合 有利于血液凝固B 蒸馏水 与鸡血细胞混合 保持细胞形状C 蒸馏水加入溶解有 DNA 的NaCl 溶液中析出 DNA 丝状物D 冷却的酒精加入过滤后的 NaCl溶液中产生特定的颜色反应解析：选 C 在 DNA 的粗提取与鉴定实验中，柠檬酸钠可
6、以防止血液凝固；鸡血中加入蒸馏水可以使细胞膜和核膜破裂；DNA 在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，在物质的量浓度为 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最低，有利于 DNA 析出；DNA 不溶于酒精，而蛋白质溶于冷却的酒精可以获得较纯的 DNA，DNA 遇二苯胺(沸水浴加热)呈蓝色。7DNA 粗提取与鉴定实验中有以下过滤：过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液；过滤含黏稠物的 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液；过滤溶解有 DNA 的 2 mol/L 的 NaCl 溶液，以上过滤分别为了获得( )A含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液B含核物质的滤液、滤液中 D
7、NA 黏稠物、含 DNA 的滤液C含核物质的滤液、滤液中 DNA 黏稠物、纱布上的 DNAD含较纯的 DNA 滤液、纱布上的黏稠物、含 DNA 的滤液解析：选 A 用蒸馏水稀释鸡血细胞液，使血细胞的细胞膜、核膜破裂，释放出核物质，此时过滤只能得到含 DNA 和其他物质如蛋白质的滤液，这种滤液必须经过实验中其他步骤的- 3 -相继处理，方能得到较纯的 DNA。DNA 在 0.14 mol/L NaCl 溶液中溶解度最低，呈丝状黏稠物，经过滤留在纱布上。8下列关于“DNA 粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是( )A洗涤剂能瓦解细胞膜并增大 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度B将 DNA 丝状物放
8、入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C常温下菜花匀浆中有些酶类会影响 DNA 的提取D用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致 DNA 获得量减少解析：选 C 洗涤剂能瓦解细胞膜，但对 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度无影响；DNA 丝状物需先溶解在适宜浓度的 NaCl 溶液中，然后加入二苯胺试剂，混合均匀后沸水浴加热，待冷却后观察到溶液变蓝；常温下菜花匀浆中有些水解酶可能会使 DNA 水解而影响 DNA 的提取；用玻璃棒朝一个方向缓慢搅拌可减轻对 DNA 分子的破坏，有利于 DNA 分子的提取。9下列与析出 DNA 黏稠物有关的叙述，错误的是( )A操作时缓缓滴加蒸馏水，降低 DNA 的溶解度B在操作时，用
9、玻璃棒轻缓搅拌，以保证 DNA 分子完整C加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度，两者均可析出D当丝状黏稠物不再增加时，NaCl 溶液的物质的量浓度约等于 0.14 mol/L解析：选 C 向含有 DNA 的溶液中加入蒸馏水后，NaCl 溶液的浓度会变小，当 NaCl 溶液的物质的量浓度为 0.14 mol/L 时，DNA 溶解度最小，而此时蛋白质溶解在 NaCl 溶液中。10在利用鸡血进行“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是( )A用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L，滤去析出物B调节 NaCl 溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，可去除部分杂质C将丝状物溶解
10、在 2 mol/L NaCl 溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同解析：选 B 用蒸馏水将 NaCl 溶液浓度调至 0.14 mol/L 后，过滤并收集析出物；利用二苯胺试剂鉴定 DNA 时，需沸水浴加热几分钟，才呈蓝色；用菜花替代鸡血作为实验材料，需加入洗涤剂和食盐，并对材料进行研磨。调节 NaCl 溶液浓度改变不同物质在其中的溶解度，加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质。二、非选择题11如图是“DNA 粗提取与鉴定”相关实验步骤。请据图分析回答：(1)鸡血细胞是进行该实验较好的实验材料，这是因为_。从- 4 -鸡血细胞中释放出核物质的处理方法
11、是_。(2)图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取_(填“滤液”或“析出物”)进行下一步实验；图 B 表示的相关操作过程中，加入 2 mol/L NaCl 溶液的作用是_；图 C 表示在滤液中加入冷却的 95%的酒精，其目的是_。(3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是 DNA，可滴加_溶液，结果丝状物被染成绿色。(4)图 D 中 a 试管为对照组，b 试管为实验组。a 试管现象_；b 试管现象_。在沸水中加热的目的是_，同时说明 DNA 对高温有较强的_。a 试管在实验中的作用是_。b 试管中溶液颜色的变化程度主要与_有关。解析：图 A 表示释放核物质后进行过滤的过程，纱布上的过滤物
12、主要是细胞膜、核膜的碎片等杂质，而 DNA 主要存在于下面的滤液中，所以过滤后应取滤液进行下一步实验。DNA不溶于冷酒精，而其他一些物质可以溶于冷酒精，从而可进一步提纯 DNA。甲基绿为比较常用的细胞核染色剂，染色后细胞核中染色体呈绿色，可以用来鉴定 DNA。答案：(1)鸡血细胞核中 DNA 含量丰富，材料易得 向鸡血细胞溶液中加入蒸馏水，并搅拌 (2)滤液 溶解 DNA 分子 提取杂质更少的 DNA(或去除脂溶性杂质) (3)甲基绿 (4)溶液不变蓝 溶液变蓝 加快颜色反应速度 耐受性 对照 加入 DNA(丝状物)的多少12如图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料
13、A 可以是_等，研磨前加入的 B 应该是_。(2)通过上述所示步骤得到滤液 C 后， 再向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液的目的是_，再过滤得到滤液 D，向滤液 D 中加入蒸馏水的目的是_。(3)在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中，将含有一定杂质的 DNA 丝状物分别放入体积为 2 mL 的 4 种溶液中，经搅拌后过滤，获得下表所示的 4 种滤液，含 DNA 最少的是滤液_。1 研磨液中 搅拌研磨后过滤 滤液 E2 2 mol/L 的 NaCl 搅拌后过滤 滤液 F- 5 -溶液中30.14 mol/L 的 NaCl溶液中搅拌后过滤 滤液 G4冷却的 95%的酒精溶液中搅拌后过滤
14、 滤液 H(4)DNA 鉴定的原理是_。解析：选用洋葱、菜花等植物材料提取 DNA 时，要在切碎的材料中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨；DNA 在 2 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度较高，而在 0.14 mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最小。向滤液中加入 2 mol/L 的 NaCl 溶液可以使 DNA 溶解，过滤除去不溶的杂质。向滤液中加入蒸馏水可降低 NaCl 溶液的浓度，使 DNA 析出，除去溶解在低盐溶液中的杂质；DNA 不溶于冷酒精，可利用这一原理进一步提纯 DNA；鉴定 DNA 的原理是在沸水浴的条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色。答案：(1)洋葱、菜
15、花 洗涤剂和食盐 (2)使 DNA 溶解 使 DNA(溶解度下降而沉淀)析出 (3)H(4)在沸水浴条件下，DNA 遇二苯胺会被染成蓝色13临床上常利用血液中的 DNA 进行身份鉴定、基因诊断等，但血液中 DNA 含量少、不易提取。为了从血液中获取更多的 DNA，科研人员以大鼠血液为材料，尝试比较两种提取DNA 的方法，主要操作如下：实验结果(表中 OD260反映溶液中核酸的浓度，OD 280反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度，理论上，纯 DNA 溶液的 OD260/OD280为 1.8)：提取方法 OD260 OD280 OD260/OD280DNA 含量(g/mL 血液)方法 A 0.304
16、0.188 1.62 38方法 B 0.612 0.420 1.46 76.5试回答下列问题：(1)补全相关实验步骤：_，_。- 6 -(2)实验中利用异丙醇溶液纯化 DNA 的原理是_。(3)与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的 DNA 总是很少，这是因为_。(4)两种方法中，OD 260/OD280均低于 1.8，主要原因是_；其中方法 A 的 OD260/OD280更接近 1.8，原因是_。(5)根据实验结果，从人血液中提取 DNA 时应优先选择方法_(填“A”或“B”)。解析：(1)DNA 在 2mol/L 的 NaCl 溶液中溶解度最大，应取上清液；DNA 不溶于酒精，细
17、胞中的某些蛋白质溶于酒精，为沉淀物。(2)实验中利用异丙醇溶液纯化 DNA 的原理是DNA 不溶于异丙醇，有些杂质溶于异丙醇。(3)与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的 DNA 总是很少，这是因为哺乳动物血液中红细胞无细胞核，只有白细胞内有DNA。(4)两种方法中 OD260/OD280均低于 1.8，主要原因是溶液中混有较多的蛋白质；其中方法 A 的 OD260/OD280更接近 1.8，原因是蛋白酶 K 能催化部分蛋白质的水解。(5)根据实验结果，由于 B 方法获得的 DNA 含量较多，故从人血液中提取 DNA 时应优先选择方法 B。答案：(1)上清液 沉淀物 (2)DNA 不溶于异丙醇，而有些杂质能溶解 (3)哺乳动物血液中只有白细胞内有 DNA(或哺乳动物红细胞中无细胞核) (4)溶液中混有较多的蛋白质 蛋白酶 K 能催化部分蛋白质的水解 (5)B
