1、ICS 65. 160 X 87 备禀号:14402-2004 中华人民共和国烟草行业标准YC/T 184-2004 烟草及烟草制晶烟草特有N-亚硝肢的测定Tobacco and tobacco products Determination of tobacco specific N-nitrosoamines 2004-10-19发布2005-03-01实施国家烟草专卖局发布中华人民共和国烟草行业标准烟草及烟草制晶烟草特有N-亚硝酷的测定YC/T 184-2004 * 中国标准出版社出版发行北京复兴门外三里河北街16号邮政编码:100045网址电话:6852394668517548 中国标准
2、出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销* 开本880X 1230 1/16 印张0.5字数9千字2005年2月第一版2005年2月第一次印刷 书号I155066 2-15997 定价8.00元如有印装差错由本社发行中心调换版权专有侵权必究举报电话:(010)68533533本标准的附录A为资料性附录。本标准由国家烟草专卖局提出。前富本标准由全国烟草标准化技术委员会(TC144)归口。本标准起草单位z中国烟草总公司郑州烟草研究院。本标准主要起草人E赵明月、谢复炜、胡清源、王鼻、刘克建。YC/T 184-2004 I YCjT 184-2004 烟草及烟草制品烟草特有N-亚硝肢的测定1 范围本标准
3、规定了烟草和烟草制品中四种烟草特有N-亚硝股N-亚硝基降烟碱(NNN)、N-亚硝基新烟碱(NAT)、N-亚硝基假木贼碱(NAB)、4-(甲基亚硝胶基)-1-(3-毗睫基)-1-丁嗣(NNK)的测定方法。本标准适用于烟草和烟草制品。2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T 5606.1卷烟第1部分z抽样GB/T 19616 烟草成批原料取样的一般原则(GB/T
4、19616-2004, ISO 4874:2000 , MOD) YC/T 31 烟草及烟草制品试样的制备和水分测定烘箱法3 术语和定义3. 1 下列术语和定义适用于本标准。烟草特有N-.!II!.硝肢tobacco specific Nnitrosoamines(TSNAs) 仅在烟草和烟草制品中存在的N-亚硝股。4 原理用二氯甲烧的碱性榕液萃取烟草和烟草制品中的TSNAs，萃取液经碱性氧化铝层析柱纯化，通过气相色谱-热能分析联用仪(GC-TEA)定量分析检测其中四种TSNAs的含量。5 试剂除特别要求以外，均应使用分析纯级试剂，水应为蒸锢水或同等纯度的水。5. 1 二氯甲皖，色谱纯。5.2
5、 甲醇，色谱纯。5.3 元水硫酸铀，分析纯。5.4 10%氢氧化锅溶液，分析纯。5.5 碱性氧化铝，层析用(200目300目)。5.6 内标溶液:配制浓度为4000ng/mL的N-戊基-(3-甲基毗院基)-亚硝股溶液作为内标溶液，以二氯甲烧(5.1)为溶剂。5.7 TSNAs标准系列溶液z按下列浓度范围配制TSNAs标准系列溶液，以二氯甲烧(5.1)为溶剂，其中内标浓度为400ng/mL。标准溶液应当存放在一20.C冰箱中，有效期6个月。NNN: 100 ng/ mL, 200 ng/ mL, 500 ng/ mL, 1 000 ng/ mL, 2 000 ng/ mL, 5 000 ng/
6、mL. NAT:100 ng/mL, 200 ng/mL, 500 ng/mL, 1 000 ng/mL, 2 000 ng/mL, 5 000 ng/mL. l YC/T 184-2004 NAB:30 ng/mL.60 ng/mL.150 ng/mL.300 ng/mL.600 ng/mL.1 500 ng/mL。NNK:100 ng/mL.200 ng/mL.500 ng/mL.1 000 ng/mL.2 000 ng/mL.5 000 ng/mL。6 仪幡常用实验仪器及下述各项$6. 1 分析天平t感量0.1mg。6.2 气相色谱仪(配有热能分析仪检测器)。6.3 色谱柱z弹性毛细管柱
7、30mXO. 32 mmX 1m.固定液5%-二苯基-95%-二甲基聚硅烧。6.4 柱前保护柱z弹性毛细管柱1mXO. 32 mmX 1m.固定液5%-二苯基-95%-二甲基聚硅烧。6.5 超声波发生器。6.6 浓缩仪。6. 7 玻璃层析柱z具塞，内径为20mm.长度为500mm。7 分析步7. 1 抽样按GB/T19616和GB/T5606. 1抽取样品。7.2 烟草样晶制备按YC/T31制备试样，并测定水分含量。7.3 测定次擞每个样品应平行测定两次。7.4 样晶分析7.4. 1 样晶萃取称取1.00 g烟样，将其放入100mL锥形瓶中，加入1mL10%氢氧化销溶液(5.的和20mL二氯甲
8、烧溶液(5.口，置于起声波发生器(6.5)超声(频率:40kHz)提取20min。7.4.2 柱层析7.4.2. 1 层析桂准备碱性氧化铝(5.5)在110C条件下活化2h待用。层析柱(6.7)保持洁净干燥，先加入30mL二氯甲皖(5.).将15g喊性氧化铝(5.5)经湿法处理后加入到层析柱(6.7)中，用玻棒搅拌氧化铝赶走气泡。再加入2g已烘干的无水硫酸铀，用50mL二氯甲烧洗脱层析柱(6.7)。当液面下降至硫酸铀层时关闭层析柱活塞。7.4.2.2 愚析将锥形瓶中所有样品加入层析柱(6.7).并用5mLX3二氯甲烧(5.)洗撮锥形瓶内壁。洗襟液加人层析柱(6.7)。等液面接近柱头后，再用30
9、mL二氯甲皖(5.)挠脱层析柱(6.7).该部分洗脱液不收集。最后用100mL甲醇=二氯甲烧为8I 92(体积比)溶液洗脱层析柱(6.7).收集该部分洗脱液。7.4.3 洗脱擅浓缩在洗脱液中准确加入100L内标溶液(5.的，在高纯氯气保护吹扫下将其浓缩至1mL左右，转移到2mL色谱小瓶中进行GC-TEA分析，自肋烟和烤烟样品的色谱图示倒在附录A中已给出。7.5 GC-TEA分析7.5. 1 气相色谱仪(6.2)条件7.5. 1. 1 色谱柱(6.3)。7.5. 1.2 柱前保护柱(6.的，在进行100次样品分析后需更换。7.5. 1.3 程序升温z初始温度50C.保持2min，10C/min升
10、至180C，保持10min, 10C/min升至230C ，30C/min升至260C，保持20min. 7.5.1.4 进样口温度:225C。7.5.1.5 载气z氯气，2.5mL/min. 7.5. 1.6 进样量2L，不分流，不分班时间1min，吹扫流量50mL/min。7.5.2 熟能分析仪(6.2)条件7.5.2.1 热裂解温度:550C。7.5.2.2 接口温度:250C。8 结果计算以干基计的四种TSNAs的含量，按式。)进行计算z式中zm= fXA X m. X 100 -A. XnX (lOO-w) m一一每克试样的TSNAs含量，单位为纳克每克(ng/g);f一一相对校正因
11、子(由校正曲线求出); m.一一样品溶液中内标量，单位为纳克(ng) J A一-TSNAs峰面积FA. -_内标峰面积pn一一试样的质量，单位为克(g); w-一试样的水分含量，%。以两次测定的平均值作为测定结果，结果精确至0.1ng/g。9 重复性、国收率和栓出限烟草中四种TSNAs测定的重复性、回收率和检测限结果见表1。YC/T 184-2004 .( 1 ) 事1帽尊申阳神TSNAs测定的量复性、固收率和槛测限结果TSNAs 重复性(n=5)/(%)回收率/(%)检测限/(ng/mL)NNN 4.0 92.9 14.01 NAT 4.8 90.7 4.80 NAB 4.0 96.9 15.87 NNK 4. 7 98.6 8.46 一一守CON-gFHU阳YCjT 184一2004附录(资料性附景)色谱圈示例A ;NNN NAT 自肋烟中TSNAs分析典型色谱固圈A.1;NAT IS , NNN NNK ; 烤烟中TSNAs分析典型色谱圈圈A.2侵权必究书号:155066 2-15997 定价28.00元等版权专有YC/T 184-2004
