1、ICS 65.020.30 B 44 备案号 :36786-2013 DB11 北京市地方 标准 DB11/T 961 2013 梅花鹿人工授精技术规程 Code of practice on artificial insemination in the sika deer 2013 - 01 - 31发布 2013 - 05 - 01实施 北京市质量技术监督局 发布DB11/T 9612013 I 目 次 前言 . II 1 范围 . 1 2 规范性引用文件 . 1 3 术语和定义 . 1 4 人工授精室要求 . 2 5 适繁母鹿选择 . 2 6 母鹿发情鉴定 . 2 7 采精、精液品质检查
2、和冷冻保存 . 3 8 输精 . 3 9 配种产仔记录 . 4 附录 A（资料性附录） 母鹿配种产仔记录表 5 DB11/T 9612013 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。 本标准由北京市农业局提出。 本标准由北京市农业标准化技术委员会归口。 本标准由北京市农业局组织实施。 本标准起草单位：北京市畜牧兽医总站、 中国 农业 大学。 本标准 主要起草人： 刘国世 、 蒋益民 、 薛水玲 、 王俊 、 史文 清、 赵广华 、 陈连国、 商业、 王梁、 任 康 、 杨宇泽 。 DB11/T 9612013 1 梅花鹿人工授精技术规程 1 范围 本标准规定 了梅花
3、 鹿人工授精室要求、适繁母鹿选择、母鹿发情鉴定、采精、精液品质检查和冷冻 保存、输精、配种产仔记录。 本标准适用 于梅花 鹿人工授精技术 操作与管理 。 2 规范性引用文件 下列文件 对于 本文件的 应用 是必不可少 的。 凡是注日期的引用文件 ，仅所注日期的 版本适用 于 本文 件。凡是不注日期 的引用文件，其最新版 本（ 包括所有的 修改 单）适用 于本文件。 GB 4143 牛冷冻精液 NY/T 1234 牛 冷冻精液 生产技术规 程 DB11/T 421 梅花 鹿饲养技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用 于本文件。 3.1 性成熟 sexual maturity 梅花鹿 经过生
4、长 发育到一 定时期开始 表现 性行为， 出 现第二 性征， 性腺能够产 生成熟 的、 具有受 精 能力的 生殖细胞 。梅花 鹿性 成熟一般为 16月龄 28月龄。 3.2 发情周期 estrous cycle 母畜初 情期 后，其生殖 器官及性 行为 发生一 系列 周期 性 变化（ 非 繁 殖 季节及 母畜怀孕除外 ） ， 发情 周 期 的计算 是从这次 发情 之日起 至下 次发情 开始 的这 一 段时 间。 3.3 人工授精 artificial insemination 人工方法 采集公 畜精液，经 检查和 处理 后， 再 输到发情母畜 生殖 道内， 以代替公母畜 自然交 配而 繁 殖后
5、代 的一 种繁 殖技术。 3.4 电刺激采精 electro-ejaculation 通 过 电流刺激腰椎 有关神 经和壶腹部而 引起 公畜 射精的方法 。 DB11/T 9612013 2 4 人工授精室要求 4.1 布局 人工授精 操作 室包括 采精室、精液检查室。采精室要求安静 、通风 、保 温， 精液检查室要求 洁净、 室 温 不能 低于 20。 4.2 器械 输精枪 、 一 次性 套管 、 一 次性长 臂手套 、 载玻片 和盖玻片 、 显微镜 、 温度计 、 大镊子 、液 氮罐、 电 刺激采精 器、保 温箱 、消毒柜。 4.3 药品及试剂 凡士林 、75% 乙醇 、生理 盐 水。 4
6、.4 稀释液的配制 按 NY/T 1234的规定配 制稀释 液。 4.5 器械的清洗及消毒 4.5.1 器械清洗 先 用 肥皂 液或碳酸 氢钠溶 液洗涮 ，除 去污垢 。最 后用 生理 盐水 或者 温开水 冲净 残留 的污渍 。 4.5.2 消毒 按照器 械的种 类采用 相应 的消毒方法 。按 NY/T 1234的规定 进行 消毒 。 5 适繁母鹿选择 5.1 梅花鹿 育成 母鹿 不宜进 行人工授精。 5.2 经产母鹿 可进 行人工授精 ，母鹿 应是 当年正常 产仔 且无难 产、 死胎等 产科疾病 。 5.3 母鹿保 持 89 成膘 情。 6 母鹿发情鉴定 6.1 母鹿的发情特点 梅花鹿母鹿
7、一般 多在 9月下旬 至 11月中 旬发情 ， 10月 上旬 和 中旬 为发情 高峰 期。发情 周 期7d 23d(平 均14.4d)， 发情 持续 时间 18h36h 。 6.2 公鹿试情法 6.2.1 试情公鹿的选择 试情公 鹿要求在 35 岁，性 欲强 ，性情 较为 温顺 ，驯 化 程度 较好 。 6.2.2 试情公鹿的饲养 按照种 公鹿的要求单 圈喂 养，饲养管理 按照 DB11/T 421的规定。 DB11/T 9612013 3 6.2.3 公鹿试情 6.2.3.1 在试情 开始时 要认真调教 。 6.2.3.2 将试情 公鹿 放入 母鹿 群中，一般 按 1:1020 准备试情 公
8、 鹿。 每天试 情 34 次 。每次 试情 20min30min。 6.2.4 母鹿发情的判断 母鹿稳 定接 受公 鹿爬跨即 为发情。母鹿 爬跨 其它 母鹿 或公 鹿不能列为 正式 发情。 6.3 直肠触摸法 6.3.1 直肠触摸 法是 把手臂 伸到 母鹿直肠 内， 隔着肠壁触摸卵巢上 的卵泡 ，感觉 其卵泡发 育程 度， 排 卵的变 化情 况， 来判 定母鹿发情 周期 进度 。直肠 检查 与 试情 相结合 ，可 提高 受孕率 。 6.3.2 宫角轻轻触摸卵巢 ，看卵巢 是 否有 卵泡 发育 。 7 采精、精液品质检查和 冷冻保存 7.1 电刺激采精 7.1.1 采精准备 公 鹿 进行 麻醉
9、，剪 去包 皮周 围的 被毛 ，用 生理 盐水 擦净，清 除直肠 内宿粪 。 7.1.2 采精步骤 将 电 极棒插 入到 公鹿 直肠 深20 25 ， 进行 由低 到高的 电压 刺激 ， 每 次通电 5s， 断电 3s 5s， 直 至某一 电压 时公 鹿在 通电后 开始 射精 ， 则不 再上 升 电压 ， 但继 续以 5s通电 、 3s 5s断 电的 方式直 至不 再 射 精 为止 。 7.2 精液品质检查 精 子 活力 和密 度的检查按照 GB 4143。鲜 精要求 活力0.60以 上, 精子 密度1.2 10 9 /mL左右 。 7.3 精液冷冻 精液冷冻 方法 按照 NY/T 1234。
10、 7.4 冻精解冻 取 冻精 ，放入 38 2 的 水浴中 解冻8s 左右 ，精液 活力大于 0.30，每 支细管不少于1000万个 有效 精 子 。 8 输精 8.1 输精时间 母鹿发情 盛期 后应 每隔 1h 2h进行 复试 ，直 到母鹿不 再 接受 爬跨 时进行 1次输精。 8.2 细管安装 将 解 冻后 的细管 冻精 ， 从 棉球封口 处一 端插 入输精 枪尖端， 剪去 细管 的多 余部 分 ， 安上 硬外套 即可。 DB11/T 9612013 4 8.3 输精方法 8.3.1 直肠把握输 精法 8.3.1.1 直肠把 握输精 法主 要适用 于直肠 围度 在 20cm以上 的 体型较
11、 大的 梅花 鹿。 8.3.1.2 母鹿输精前 进行 麻醉 。 8.3.1.3 输精员 将母鹿 宿粪 排出。 8.3.1.4 一手伸入直肠隔着直肠壁 找到并握住 子宫 颈， 使子 宫颈口 握于 手心 内， 另一 手持输精 枪， 从 阴 道 前庭 入口 斜向 与直肠 内壁 呈 45度角 缓缓插 入，当 枪 头部 位进入 后， 再将 输精枪后 端抬 起呈 平行 状 态缓缓插 入阴 道内， 通过双 手 互相 配合 使输精 枪找 到并插 入子 宫颈 口 ， 通 过 4个子 宫颈皱褶 ， 将精液 注 入 子 宫体 内， 然后 撤回 输精 枪 。 8.3.1.5 输精时 要求 轻插 、慢 注、 缓出。 8
12、.3.1.6 输精后静 脉注 射解麻药 。 8.3.2 开膣器 输精法 8.3.2.1 开膣器 输精 法适用 于体型小 、 直肠 围度在 20cm以下梅花鹿。 8.3.2.2 将麻醉 后母鹿 抬到 输精 台上 ， 头向 下倾斜 30度角 ， 将开膣 器用 生理 盐水 浸湿 ， 徐徐插 入阴 道， 使前端紧靠 子宫 颈口 处， 借助光源 ，找 到子 宫颈 口。 将 输精 枪插 入子 宫颈内 2cm3cm，注 入精液 ，取 出输精 枪，注 射解麻药 。 8.3.3 腹腔内窥镜输 精法 8.3.3.1 将麻醉 母鹿 固定 于手 术架 上。 8.3.3.2 术部备 皮消毒 。 8.3.3.3 在腹正
13、中线 的左侧 ，用 7mm的 套管 和探针打 一孔 ，抽 出 探针 ，放入 内窥 镜管 。在腹 正中 线右 侧相同 部位 ， 用 手术 刀片 划入一 小口 约 1.5cm， 插入宫 颈 钳， 借助 内窥 镜管 观察 子 宫角 及卵泡 发育 情况 。 将宫颈 钳拔 出， 插入 专用输精枪 ，将 精液输 到有成熟 卵泡 发育一 侧的 子宫角 大弯处 。 8.3.3.4 输精后 皮肤创 口缝合 1针。 8.3.3.5 肌注 160万 单位 青霉素 ，注 射 解麻药 。 9 配种产仔记录 应对母鹿发情、人工授精、 妊娠 和产仔 进行 详细 的记录， 见附录 A。 DB11/T 9612013 5 A A 附 录 A （资料 性附录） 母鹿配 种产仔记录表 表A.1 母鹿配 种产仔记录表 记录员 母鹿耳号 年龄 品种 历年产仔 特征 药物注射 时间 名称 剂量 术者 发 情 鉴 定 时间 试情公鹿 表现症状 左卵巢 右卵巢 术者 人 工 授 精 时间 公鹿 耳号 精液 类别 精液 编号 输精量 精子 活力 输精 方法 术者 妊 娠 诊 断 时间 诊断方法 特征 结论 备注 术者 产 仔 预产期 产仔时间 怀孕期 产仔性别 品种 耳号 初生重 术者 _
