1、第三章 药物的杂质检查 Test for purity,,Contents,,来源 （一）生产过程中引入的杂质（二）贮藏过程中引入的杂质,,种 类,来源一般杂质 特殊杂质,结构无机杂质 有机杂质,性质信号杂质 有害杂质,理化性质有机杂质 无机杂质 残留溶剂,,杂质限量检查,,对照法 对乙酰氨基酚 氯化物 取本品2.0g，加水100ml,加热溶解后，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检 查（附录 A），与标准氯化钠溶液5.0ml 制成的对照液比较，不得更浓(0.01) 。 硫酸盐 取氯化物项下剩余的滤液25ml，依法检查（附录 B），与标准硫酸钾溶 液1.0ml 制成的对照液比较，不得更浓(0.0
2、2) 。,,对照法 葡萄糖注射液 重金属 取本品适量（约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录 H第一法），按葡萄糖含 量计算，含重金属不得过百万分之五。,,灵敏度法 硫鸟嘌呤 游离硫 取本品50mg，加氢氧化钠试液5ml ，振摇溶解后，溶液应澄清。,,比较法 盐酸去氧肾上腺素 酮体 取本品，加水制成每1ml 中含2.0mg 的溶液，照分光光度法（附录 A）， 在310nm 的波长处测定吸收度，不得大于0.20。,,第二节 一般杂质的检查方法,一、氯化物布洛芬 【检查】 氯化物 取本品1.0g，加水50ml，振
3、摇5 分钟，滤过，取续滤液25ml，依 法检查（附录 A），与标准氯化钠溶液5.0ml 制成的对照液比较，不得更浓(0.010) 。,,第二节 一般杂质的检查方法,二、硫酸盐检查法卡托普利 【检查】硫酸盐 取本品1.0g，依法检查（附录 B），与标准硫酸钾溶液5.0ml制成的对照液 比较，不得更浓(0.05) 。,,第二节 一般杂质的检查方法,三、铁盐检查法泛影酸 【检查】铁盐 取炽灼残渣项下遗留的残渣，加盐酸1ml,置水浴上蒸干，再加稀盐酸1ml 与 水适量，置水浴上加热，滤过，坩埚用水洗涤，合并滤液与洗液使成25ml，依法检查（ 附录 G），与标准铁溶液1.0ml 用同一方法制成的对照液比
4、较，不得更深(0.001%)。,,第二节 一般杂质的检查方法,四、重金属检查法环拉酸钠 重金属 取本品1.0g，加水23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，依法检查（ 附录 H第一法），含重金属不得过百万分之十。,,第二节 一般杂质的检查方法,四、重金属检查法,供试品置瓷坩锅中 用浓硫酸破坏,炽灼，HNO3破坏,蒸干除尽NO2,残渣加盐酸， 生成水溶性氯化物,氨试液调节至中性 醋酸盐缓冲液 pH=3.5,依法试验,,第二节 一般杂质的检查方法,五、砷盐检查法苯丙氨酸 砷盐 取本品2.0g，加水23ml溶解后，加盐酸5ml，依法检查(附录 J 第一法)，应符合规定 (0.0001)。
5、,,第二节 一般杂质的检查方法,六、溶液颜色检查法 （1）目视比色法盐酸异丙嗪溶液的澄清度与颜色 取本品1.0g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色； 如显浑 浊，与1 号浊度标准液（附录 B）比较，不得更浓；如显色，与黄色2 号标准比色液 （附录 A第一法）比较，不得更深。,,第二节 一般杂质的检查方法,六、溶液颜色检查法 （）分光光度法华法林钠 溶液的澄清度取本品0.50g ，加水10ml溶解后，溶液应澄清；如显浑浊，与1号浊 度标准液（附录 B）比较，不得更浓。 丙酮溶液的澄清度与颜色 取本品 0.20g，加丙酮10ml溶解后，溶液应澄清无色； 如显浑浊，与1 号浊度标准液（附录 B）比
6、较，不得更浓；如显色，置4cm 吸收池中， 依法检查（附录 A 第二法），在460nm 的波长处测定吸收度，不得过0.12。,,第二节 一般杂质的检查方法,六、溶液颜色检查法 （）色差计法 用色差计直接测定药物溶液的三刺激值（在给定的三色系统中与待测色达到色匹配所需要的三个原刺激量），对其颜色进行定量表述和分析。,,第二节 一般杂质的检查方法,七、易炭化物检查法阿司匹林 易炭化物 取本品0.5g，依法检查（附录 K），与对照液（取比色用氯化钴液 0.25ml、比色用重铬酸钾液0.25ml、比色用硫酸铜液0.40ml，加水使成5ml ）比较，不 得更深。,,第二节 一般杂质的检查方法,八、溶液的
7、澄清度检查塞替派 【检查】 溶液的澄清度 取本品0.20g ，加水10ml溶解后，溶液应澄清；如显浑 浊，与1号浊度标准液（附录 B）比较，不得更浓。,,第二节 一般杂质的检查方法,九、炽灼残渣检查法,供试品置瓷坩锅中 用浓硫酸炭化,低温除尽硫酸,700-800 炽灼,灰化,放冷,700-800 炽灼,恒重,,第二节 一般杂质的检查方法,九、炽灼检查法阿苯达唑 炽灼残渣 取本品1.0g，依法检查（附录 N），遗留残渣不得过0.2 。,,第二节 一般杂质的检查方法,十、 干燥失重测定法,,第二节 一般杂质的检查方法,十、干燥失重测定法奥沙西泮 干燥失重 取本品，在105 干燥至恒重，减失重量不得
8、过1.0（附录 L）。,,第二节 一般杂质的检查方法,,第二节 一般杂质的检查方法,十一、水份测定法Karl Fisher法测定药物中的水份() 标定 用水分测定仪直接标定。或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水约30 mg，除另有规定外加无水甲醇25ml，用本液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永 停滴定法（附录 A）指示终点；另作空白试验，按下式计算。 FAB 式中 F为每1ml费休氏试液相当于水的重量，mg； W为称取重蒸馏水的重量，mg； A为滴定所消耗费休氏试液的容积，ml； B为空白所消耗费休氏试液的容积，ml。,,第二节 一般杂质的检查方法,测定法 精密称取供试品适量(约消耗费休氏
9、试液15ml),除另有规定外,溶剂为甲 醇，用水分测定仪直接测定。或将供试品置干燥的具塞玻瓶中，加溶剂25ml，在不断 振摇(或搅拌)下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色,或用永停滴定法(附录 A)指示终点；另作空白试验，按下式计算。 供试品中水分含量() (AB)F W 100 式中 A为供试品所消耗费休氏试液的容积,ml；B为空白所消耗费休氏试液的容积,ml； F为每1ml费休氏试液相当于水的重量,mg； W为供试品的重量,mg。,,第二节 一般杂质的检查方法,十一、水份测定法Karl Fisher法测定药物中的水份阿莫西林 水分 取本品，照水分测定法（附录 M第一法A）测定，含水分
10、应为12.015.0。,,第二节 一般杂质的检查方法,十二、残留溶剂测定法,,第二节 一般杂质的检查方法,白田道夫法 作为锑干扰时的补充方法。原理：氯化亚锡在盐酸酸性中将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液同法处理后的颜色比较，可判断供试品中的含砷量。 灵敏度：以AS2O3计为20ug。加入少量二氯化汞可提高灵敏度：2ug 。,,一般杂质的检查方法,,第三节 特殊杂质的检查方法,一、物理分析法 （）特殊气味 乙醇中杂醇油检查 取本品10ml，加水5ml 与甘油1ml ，摇匀后，分次滴加在无臭的滤纸上， 使乙醇自然挥散，始终不得发生异臭。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）特殊颜色 盐酸
11、胺碘酮 游离碘 取本品0.5g，加水10ml，振摇30秒钟，放置5 分钟，滤过，滤液加稀硫酸 1ml 与氯仿2ml ，振摇，氯仿层不得显色。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）特殊颜色 盐酸胺碘酮 游离碘 取本品0.5g，加水10ml，振摇30秒钟，放置5 分钟，滤过，滤液加稀硫酸 1ml 与氯仿2ml ，振摇，氯仿层不得显色。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）溶解度差异 高三尖杉酯碱 溶液的澄清度 取本品10mg，加0.1 酒石酸溶液10ml溶解后，溶液应 澄清。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）比旋度的测定硫酸阿托品 莨菪碱 取本品，按干燥品计算，加水制成每1ml 中含50mg的溶液,
12、依法测定（附录 E），旋光度不得过0.40。,,第三节 特殊杂质的检查方法,二、化学分析法 （）酸碱性差异 乙琥胺 酸度 取本品0.10g ，加水10ml使溶解，依法测定（附录 H），pH 值应为3.0 4.5 。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）氧化还原性差异盐酸可卡因 肉桂酰可卡因与其他易氧化物取本品0.10g ，加水5ml 溶解后，加5 硫酸溶液 0.3ml 与高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)0.10ml ，密塞，在1520的暗处放置30分钟， 紫色不得完全消失。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）沉淀反应 间苯二酚 邻苯二酚 取本品0.5g，加水10ml溶解后，加稀醋酸2 滴与醋
13、酸铅试液0.5ml ，不 得发生浑浊。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）显色反应盐酸乙基吗啡 吗啡 取本品0.10g ，加盐酸溶液(91000)5ml使溶解，再加亚硝酸钠试液2ml ， 摇匀，放置15分钟，加氨试液3ml ，摇匀；如显黄棕色，与吗啡溶液取无水吗啡2.0 mg，加盐酸溶液(91000) 使溶解成100ml 5.0ml 用同一方法制成的对照液比较，不 得更深(0.1)。,,第三节 特殊杂质的检查方法,（）产生气体反应 氧化镁 碳酸盐 取本品0.10g ，加水5ml ，煮沸，放冷，加醋酸5ml ，不得泡沸。,,第三节 特殊杂质的检查方法,三、光谱分析法 1、紫外光谱法 （）杂质有最
14、大吸收华法林钠 酚酮 取本品，加5 氢氧化钠溶液制成每1ml 中含0.125g的溶液，照分光光度法 （附录 A），于15分钟内在385nm 的波长处测定吸收度，不得过0.30。,,第三节 特殊杂质的检查方法,2、红外光谱法甲苯咪唑 【检查】 晶型 取本品与含晶型为10的甲苯咪唑对照品各约25mg，分别加 液状石蜡0.3ml ，研磨均匀，制成厚度约0.15mm的石蜡糊片，同时制作厚度相同的空白 液状石蜡糊片作参比，照红外分光光度法（附录 C）测定并调节供试品与对照品在 803cm-1 波数处的透光率为9095，分别记录620 803cm-1 波数处的红外光吸收图 谱。在约620cm-1和803c
15、m-1波数处的最小吸收峰间联接一基线，再在约640cm-1和 662cm-1波数处的最大吸收峰之顶处作垂线使基线相交，从而得到这些最大吸收峰处的校 正吸收值，供试品在约640cm-1与662cm-1波数处的校正吸收值之比，不得大于含晶型 为10的甲苯咪唑对照品在该波数处的校正吸收值之比。,,第三节 特殊杂质的检查方法,3、原子吸收分光光度法维生素 铁 取本品5.0g两份，分别置25ml量瓶中，一份中加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至 刻度，摇匀，作为供试品溶液(B)；另一份中加标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵863mg，置 1000ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇
16、匀，精密量取10ml，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀， 作为对照溶液(A)。照原子吸收分光光度法（附录 D 杂质检查法），在248.3nm的波长处 分别测定，应符合规定。,,第三节 特殊杂质的检查方法,四、色谱分析法 1、薄层相色谱法设备简单，操作简便，分离速度快，灵敏度和分辩率较高 ）杂质对照品法）自身对照法）杂质对照品法与自身对照法联用）对照药物法,,第三节 特殊杂质的检查方法,1、薄层相色谱法）杂质对照品法枸橼酸乙胺嗪 【检查】 甲基哌嗪 取本品，加甲醇制成每1ml 中含50mg的溶液，作为供试 品溶液，另取甲基哌
17、嗪对照品，加甲醇制成每1ml 中含50g 的溶液，作为对照品 溶液。照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述两种溶液各10l ，分别点于同一硅 胶薄层板上，以氯仿甲醇氨溶液(13:5:1)为展开剂，展开后，晾干，置碘蒸气中显 色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其颜色与对照品溶液的主斑点比较，不 得更深(0.1) 。,,第三节 特殊杂质的检查方法,）自身对照法 吡罗昔康 【检查】 有关物质 取本品，加氯仿制成每1ml 中含20mg的溶液，作为供试品溶 液；精密量取适量，加氯仿稀释成每1ml 中含0.2mg 的溶液，作为对照溶液。照薄层色 谱法（附录 B）试验，吸取上述两种溶液各10l，分别
18、点于同一硅胶254 薄层板 （0.5 羧甲基纤维素钠与1mol/L氢氧化钠溶液等容混合液为黏合剂）上，以氯仿丙 酮甲醇(25:25:5) 为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(254nm) 下检视。供试品溶 液如显杂质斑点，与对照溶液所显的主斑点比较，不得更深。,,第三节 特殊杂质的检查方法,）杂质对照品法与自身对照法联用硫酸奈替米星 有关物质 取本品，加水制成每1ml中含150mg的溶液，作为供试品溶液；另取奈替米星标准品，分别加水制成每1ml中含1.5mg和3mg的溶液，作为标准品溶液(1)、(2)；取西梭米星标准品，加水制成每1ml中含1.44mg的溶液，作为标准品溶液(3)。照薄层色谱法
19、(附录 B)试验，吸取上述四种溶液各2l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇-浓氨溶液(4:4:2)为展开剂，展开后，晾干，喷以0.2茚三酮的水饱和正丁醇溶液，在110加热20分钟。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与标准品溶液(3)所显主斑点相比较，不得更深(1)，其他杂质与标准品溶液(1)所显主斑点相比较，均不得更深(1)，如有一点超过，应不深于标准品溶液(2)的主斑点(2)。,,第三节 特殊杂质的检查方法,）药物对照法马来酸麦角新碱 【检查】 有关物质 取本品，加乙醇浓氨溶液(9:1) 制成每1ml中含5mg 的溶液 (1) 与每1ml中含0.2mg 的溶液(2) ，同时取马来酸麦
20、角新碱对照品制成每1ml中含5mg 的 溶液(3) ，照薄层色谱法（附录 B）试验，吸取上述三种溶液各10l,分别点于硅胶 薄层板上，以氯仿甲醇水(25:8:1)为展开剂，展开后，晾干，置紫外光灯(365nm ) 下检视，溶液(1) 主斑点的颜色及位置应与溶液(3) 的主斑点相一致，所显杂质斑点 的颜色不得深于溶液(3) 对应的杂质斑点，并不得有溶液(3) 以外的杂质斑点；溶液(2) 除主斑点外，不得显任何杂质斑点。,,第三节 特殊杂质的检查方法,2、高效液相色谱法分离效能高，专属性强和检测灵敏度高，可准确测量各组分的峰面积 ）峰面积归一化法）不加校正因子的主成分自身对照法）加校正因子的主成分
21、自身对照法）内标法加校正因子测定供试品中杂质）外标法,,第三节 特殊杂质的检查方法,2）不加校正因子的主成分自身对照法尼群地平 有关物质 避光操作。取本品，加甲醇分别制成每1ml 中含1.0mg 的供试品溶液和 每1ml 中含10g 的预试溶液。照高效液相色谱法（附录 D）测定，以十八烷基硅烷 键合硅胶为填充剂；甲醇水(7:3) 为流动相；检测波长为237nm 。理论板数按尼群地 平峰计算应不低于2000。取预试溶液10l 注入液相色谱仪进行预试，调节检测灵敏度， 使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的10；再取供试品溶液10l 注入液相色谱 仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5 倍。供试
22、品溶液的色谱图中如显示杂质峰， 量取各杂质峰面积的和，不得大于总面积的7.0 。,,第三节 特殊杂质的检查方法,四、色谱分析法 （二）高效液相色谱法）外标法 卡托普利 【检查】 卡托普利二硫化物 避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml中含2mg的溶液 ，作为供试品溶液（立即使用）;另取卡托普利二硫化物对照品适量，加甲醇制成每1ml中 含30g的溶液，作为对照品溶液（1）；再另取卡托普利对照品与托普利二硫化物对照品 适量，加甲醇制成每1ml中各含10g的混合溶液，作为对照品溶液（2）。照高效液相色谱法 （附录 D）试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；9四氢呋喃的甲醇溶液0.05 磷酸溶液（33:
23、67）为流动相；检测波长为220nm，用外标法进行测定。取对照品溶液（2） 20l注入液相色谱仪进行预试，调节检测灵敏度，使卡托普利色谱峰的峰高约为满量程的 50；相对保留时间卡托普利约为1.0，卡托普利二硫化物为3.2。精密量取供试品溶液和对 照品溶液（1）各20l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液如显与对照品溶液 （1）相应的卡托普利二硫化物色谱峰，其含量不得过1.5%。,,第三节 特殊杂质的检查方法,1）峰面积归一化法）加校正因子的主成分自身对照法红霉素）内标法加校正因子测定供试品中杂质,,1.药物的质量可以从哪三个方面考查?它们在质量标准中又是通过哪些项目来衡量的? 2.药物中的杂质可分为哪几类？简述杂质的来源有哪些？ 一般杂质检查和特殊杂质检查分别指哪些项目？它们各自的检查方法和原理？,思考题,,Thank You !,
