1、1 印月958月 本標準非經本局同意得翻印 中華民國國家標準 CNS 總號 號 ICS 67.060 N638415022經濟部標準檢驗局印 公布日期 修訂公布日期 958月24日 月日 (共2頁)食品檢驗法兒茶素之測定 Method of test for foodstuffs Determination of catechins 1. 適用範圍:本標準規定於含有兒茶素之脫脂食品及茶葉(固狀、粉狀或液狀)中兒茶素含量之檢驗方法。 2. 方法 2.1 裝置 2.1.1 高效液相層析儀(high performance liquid chromatography ,HPLC) 2.1.1.1 偵
2、檢器:紫外線/可見光偵檢器。 2.1.1.2 層析管柱:YMC-Pack ODS-AM S-5 m, 12 nm, 4.6250 mm前端加保護管或同等級品。 2.1.1.3 積分記錄器。 2.1.2 水浴振盪器。 2.1.3 電子天平(可精確至0.0001 g)。 2.2 試藥:85%磷酸採試藥級,乙腈採HPLC級,去離子水,Gallocatechin(GC), Epigallocatechin(EGC), Catechin(CT)、Epicatechin(EC), Epigallocatechin Gallate(EGCG), Gallocatechin Gallate(GCG), Epi
3、catechin Gallate (ECG) , Catechin Gallate (CG)等8種標準品。 2.3 器具及材料 2.3.1 玻璃錐形瓶:100 mL,附瓶蓋。 2.3.2 濾膜:孔徑0.45 m,直徑25 mm,PVDF材質。 2.4 溶液之配製 2.4.1 0.1%磷酸溶液:取85%磷酸1.2 mL於定量瓶中,以去離子水定容至1000 mL。 2.4.2 移動相溶液:分A、B種。 2.4.2.1 A液:100 %乙腈溶液,使用前先除氣。 2.4.2.2 B液:0.1 %磷酸溶液,使用前先除氣。 2.5 標準溶液之配製 2.5.1 標準原液:分別精稱8種標準品10 mg,以0.
4、1%磷酸溶液定量至10 mL即為1000 mg/kg之標準原液,可分裝至樣品瓶,避光凍藏,有效期限為1年。 2.5.2 標準操作液:以標準原液稀釋5種濃度混合濃度,分別為100、50、25及10 mg/kg作為標準曲線,臨用時配製。 2.6 檢液之調製 2.6.1 固體樣品:固體樣品均質化後取約0.5-1.0 g,精確稱定,置入錐形瓶中,加0.1 %磷酸溶液50 mL,於60 水浴振盪1小時後以0.45 m濾膜過濾至2 CNS 15022, N 6384 HPLC樣品瓶,備用。 2.6.2 液體樣品:取適量樣品,精確稱定,置入定量瓶中,以0.1 %磷酸溶液定容至50 mL,混合均勻後以0.45
5、 m濾膜過濾至HPLC樣品瓶,備用。 2.7 高效液相層析儀(HPLC)分析測定參考條件 注入量:20 L 移動相流速:1.2 mL/min 移動相比例 起始 A液 16% B液 84% 第12分鐘 A液 16% B液 84% 第15分鐘 A液 35% B液 65% 第18分鐘 A液 35% B液 65% 第22分鐘 A液 16% B液 84% 續接下一樣品 管柱恆溫器溫度:30。 紫外線/可見光偵檢器條件:波長280 nm 2.8 計算 2.8.1 標準曲線之製作:由分析所得5種濃度之混合標準溶液圖譜,以波峰面積對應於濃度作圖,經線性迴歸求得直線迴歸方程式yaxb,y為波峰面積,x為濃度,a為斜率,b為截距。 2.8.2 比對檢液HPLC圖譜中各兒茶素之波峰面積,藉由標準曲線之直線方程式得各檢液中兒茶素之含量,代入以下公式,求出樣品中各茶多酚含量,最終單位以mg/g表示。 ()100050g/mg=樣品重檢液中各兒素含樣品中各兒素含 2.9 注意事項 2.9.1 若兒茶素樣品易氧化,若樣品中兒茶素的濃度過高(超過標準曲線最高濃度),需重新萃取或稀釋。 2.9.2 圖譜有與標準液相近滯時間之波峰無法判,可等添加標準品(標準液:樣品液1:1)於樣品中,以判。