1、ICS 67050X 04 蝠雷中华人民共和国国家标准GBT 22940-2008蜂蜜中氨苯砜残留量的测定200812-31发布液相色谱一串联质谱法Determination of dapsone residues in honeyLCMSMS method2009-05-0 1实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局磐士中国国家标准化管理委员会厦仲刖 置本标准的附录A、附录B为资料性附录。本标准由国家质量监督检验检疫总局提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国秦皇岛出入境检验检疫局。本标准主要起草人：曹彦忠、杨志伟、贾光群、张进杰、石玉秋、庞国芳。GBT 22940-20081范围蜂蜜中
2、氨苯砜残留量的测定液相色谱一串联质谱法本标准规定了蜂蜜中氨苯砜残留量的液相色谱串联质谱测定方法。本标准适用于蜂蜜中氨苯砜残留量的测定。本标准的方法检出限为20 pgkg。2规范性引用文件GBT 22940-2008下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GBT 63791 测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第1部分：总则与定义(GBT 63791 2004，ISO 57251
3、：1 994，IDT)GBT 63792测量方法与结果的准确度(正确度与精密度) 第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法(GBT 637922004，ISO 5725 2：1 994，IDT)GBT 6682分析实验室用水规格和试验方法(GBT 6682 2008，ISO 3696：1987，MOD)3原理蜂蜜中氨苯砜残留用磷酸盐缓冲溶液(pH一9)提取，过滤后，经Oasis HLB”或相当的固相萃取柱净化，用甲醇洗脱并蒸干，残渣用流动相溶解，过02 tzm滤膜后，样品溶液供液相色谱一串联质谱仪测定，外标法定量。4试剂和材料41水：GBT 6682，一级。42甲醇：色谱纯。43乙腈
4、：色谱纯。44磷酸二氢钾(KH：PO。3Hzo)：优级纯。45磷酸氢二钾：优级纯。46淋洗液：甲醇溶液(2+3)。量取40 mL甲醇(42)和60 mL水混合均匀。47 005 molL磷酸盐缓冲溶液：分别称取013 g磷酸二氢钾(44)和548 g磷酸氢二钾(45)，用水溶解，调pH值为90，用水定容至1 000 mL。48氨苯砜标准物质(CAS：80080)：纯度99。49 05 mgmL标准储备溶液：准确称取适量的氨苯砜标准物质(48)，用甲醇配成05 mgmL的标准储备溶液，该溶液在4保存。410 10 bLgmL标准工作溶液：吸取01mL标准储备溶液(49)移至50mL容量瓶中，用甲
5、醇定容至刻度，该溶液在4保存。1)Oasis HLB周相萃取柱是Waters公司产品的商品名称，给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不是表示对该产品的认可。如果其他等效产品具有相同的效果，则可使用这些等效产品。1GBT 22940-2008411基质标准工作溶液：用空白样品提取液配成20 ngmL、5500 ngmL不同浓度的基质标准工作溶液，该溶液需当天配制。412 OasisHLB固相萃取柱或相当者：500mg，6mL。用前依次用5mL甲醇和10mL水处理。保持柱体湿润。413滤膜：02 p-m。5仪器51 液相色谱一串联质谱仪：配有电喷雾离子源。52分析天平；感量01 mg和001
6、g。53液体混匀器。54固相萃取真空装置。55玻璃贮液器：50 mL。56真空泵：最大负压80 kPa。57吹干管：15mL。58氮气浓缩仪。6试样制备与保存61试样的制备对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，冷却至室温。分出05 kg作为试样。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并做上标记。62试样的保存将试样于常温下保存。7测定步骤71提取称取2 g试样，精确至001 g。置于1 50mL三角瓶中，加入25mL磷酸盐缓冲溶液(47)，于液体混匀器(53)上快速混匀l min，使试样完全溶解。72净化将塞有玻璃棉
7、的玻璃贮液器(55)连到Oasis HLB或相当的固相萃取柱(412)上，把样液(71)倒人玻璃贮液器中，调节流速小于3mLmin，待样液完全流出后，依次用5mL水和5mL淋洗液(46)洗柱，弃去全部流出液。减压抽干30 rain，晟后用5 mL甲醇洗脱，洗脱液收集于15 mL吹干管(57)中。用氮气浓缩仪(58)于45吹干。准确加入1o mL流动相溶解残渣，样液过02 pm滤膜后，供液相色谱一串联质谱仪测定。73测定条件731液相色谱参考条件a) 色谱柱：Atlantis C18，3 pm，150 mm21 mm(内径)或相当者；b)流动相：乙腈一01甲酸溶液(7+13)；c)流速：02 m
8、Lmin；d)柱温：30 oC；e)进样量：20 pL。732质谱参考条件a)离子源：电喷雾离子源；2b)扫描方式：正离子扫描；c)检测方式：多反应监测；d)电喷雾电压：5 500 V；e)雾化气压力：0069 MPa；f)气帘气压力：0069 Mpa；g)辅助气流速：6 Lmin；h)离子源温度：450；i)定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压见表1。GBT 22940-2008表1 氨苯砜的定性离子对、定量离子对、碰撞气能量和去簇电压定性离子对 定量离子对 碰撞气能量 去簇电压化合物中文名称 化合物英文名称(mz) (mz) V V249156 249156 22 75氨苯砜 24
9、9108 33Z4992 3774液相色谱一串联质谱测定741定性测定被测组分选择1个母离子，2个以上子离子，在相同的试验条件下，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应的保留时间偏差在士25之内；且样品中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液中对应的定性离子的相对丰度进行比较，若偏差不超过表2规定的范围，则可判定样品中存在对应的待测物。表2定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 以表示相对离子丰度K K50 20K50 i0K20 K10允许最大偏差 士20 土25 土30 士50742定量测定用基质标准工作溶液(411)分别进样，以峰面积为纵坐标，工作溶液浓度为横坐标，绘制标准工作曲线
10、，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中氨苯砜的响应值均应在仪器测定的线性范围内。在上述色谱条件和质谱条件下，氨苯砜的参考保留时间为521 rain。氨苯砜的标准物质总离子流图参见附录A中的图A1。本方法的添加平均回收率数据参见附录B中的表B1。75平行试验按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。76空白试验除不称取样品外，均按上述步骤进行。8结果计算蜂蜜中氨苯砜残留量的测定结果按式(1)计算。xc筹獬 ，n 1 UUU式中：x试样中被测组分残留量，单位为微克每千克(ggkg)；c一从标准工作曲线上得到的被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升(ngmL)；3GBT 22940-2008V样品溶液
11、定容体积，单位为毫升(mL)；m一一样品溶液所代表试样的质量，单位为克(g)。计算结果应扣除空白值。9精密度91 一般规定本标准的精密度数据是按照GBT 63791和GBT 63792的规定确定的，其重复性和再现性的值是以95的可信度来计算。92重复性在重复性试验条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过重复性限r，蜂蜜中氨苯砜添加浓度范围及重复性方程见表3。表3 添加浓度范围及重复性和再现性方程 单位为微克每千克化合物名称 添加浓度范围 重复性限r 再现性限R氨苯砜 04100 lg T-1112 1 19m一1151 9 lg R一1180 6lgm一1，049 9注：m为两次测定值的
12、平均值。如果差值超过重复性限r，应舍弃试验结果并重新完成两次单个试验的测定。93再现性在再现性试验条件下，获得的两次独立测试结果的绝对差值不超过再现性限R，蜂蜜中氨苯砜添加浓度范围及再现性方程见表3。4附录A(资料性附录)标准物质总离子流图氨苯砜标准物质总离子流图见图A1。5+f18GBT 22940-20081 0 l 5 2 0 2 5 3 0 3 5 4 0 4 5 5 0 5 5 6 0 6 5f炯】n图A1 氨苯砜标准物质总离子流图附录B(资料性附录)回收率本方法中氨苯砜添加浓度及其平均回收率的试验数据见表B1。表B1 氨苯砜添加浓度及其平均回收率的试验数据化合物名称 添加浓度(,ugkg) 平均回收率20 76 450 789氨苯砜10 o 77650 o 78o5098765432I掣埕罾
