1、1,DNA重组,2,DNA重组技术 一、 DNA重组技术相关概念 二、 DNA重组技术基本原理,3,一、 DNA重组技术相关概念 (一) DNA克隆 (二) 工具酶 (三) 目的基因 (四) 基因载体,4,(一) DNA克隆所谓的DNA克隆就是DNA分子扩增的过程。通常首先将某一目的DNA片段插入一适当的载体中,构建重组复制子,继而转化宿主细胞并筛选出含有重组复制子的细胞,然后进行扩增即可以获得大量的目的DNA分子。上述过程即为DNA克隆。,5,6,7,(三) 目的基因(target gene)所感兴趣的基因就是目的基因。,8,目的基因的来源source of target gene* 直接来
2、源于基因组It is from genomic DNA of organisms directly, this isgenerally only prokaryotic gene. * 来源于人工合成It is from artificial synthesis, this is generally simplepolypeptide gene.* 来源于mRNAIt is from mRNA. * 来源于cDNA文库或基因组文库It is from genomic library or cDNA library.,9,10,11,(四) 基因载体所谓的基因载体是一些经过结构改造的DNA分子。他们可以携带目的基因或DNA片段,并实现后者的克隆扩增甚至是表达。,12,13,14,15,16,17,18,